Formularium Analytische Biochemie 2 Door Zeno De Paus
Hoofdstuk 1: Analytische performantie, kwaliteitscontrole en
kalibratie
Het gemiddelde van 𝒏 metingen en zijn standaardafwijking:
∑ 𝑥𝑖
〈𝑥〉 =
𝑛
∑(𝑥𝑖 − 〈𝑥〉)2
𝑆𝐷 = √
𝑛−1
De sensitiviteit van een biochemisch onderzoek:
Deze wordt voorgesteld door de helling (𝑎) van de ijklijn
𝑔𝑒𝑚𝑒𝑡𝑒𝑛 𝑠𝑖𝑔𝑛𝑎𝑎𝑙
ℎ𝑒𝑙𝑙𝑖𝑛𝑔 =
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑡𝑖𝑒
Indien we een lineaire curve hebben, kunnen we dit herschrijven:
𝑓(𝑥) = 𝑎𝑥 + 𝑏 → 𝑆𝑖𝑔𝑛𝑎𝑎𝑙 = 𝑠𝑒𝑛𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡. 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑡𝑖𝑒 + 𝑟𝑢𝑖𝑠
De detectielimiet (LOD) van een biochemisch onderzoek:
𝐿𝑂𝐷 = 3𝑆𝐷𝑎𝑐ℎ𝑡𝑒𝑟𝑔𝑟𝑜𝑛𝑑
Waarbij
∑(𝑑𝑖 − 〈𝑑〉)2
𝑆𝐷𝑎𝑐ℎ𝑡𝑒𝑟𝑔𝑟𝑜𝑛𝑑 = √
𝑛−1
De kwantificatielimiet (LOQ) van een biochemisch onderzoek:
𝐿𝑂𝑄 ≈ 10𝑆𝐷𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
De accuraatheid van een biochemisch onderzoek:
(𝑔𝑒𝑚𝑖𝑑𝑑𝑒𝑙𝑑𝑒) 𝑏𝑒𝑘𝑜𝑚𝑒𝑛 𝑤𝑎𝑎𝑟𝑑𝑒
𝑎𝑐𝑐𝑢𝑟𝑎𝑎𝑡ℎ𝑒𝑖𝑑 =
(𝑔𝑒𝑚𝑖𝑑𝑑𝑒𝑙𝑑𝑒) 𝑡ℎ𝑒𝑜𝑟𝑒𝑡𝑖𝑠𝑐ℎ𝑒 𝑤𝑎𝑎𝑟𝑑𝑒
De precisie van een biochemisch onderzoek:
𝑆𝑄 1
𝑉𝐶 = ~
𝜇 𝑝𝑟𝑒𝑐𝑖𝑠𝑖𝑒
Waarbij 𝑆𝐷 de standaardafwijking en 𝜇 het gemiddelde. Er geldt dat:
• Een hoge variatiecoëfficiënt (VC) → een lage precisie
• Een lage variatiecoëfficiënt (VC) → een hoge precisie
1
, Formularium Analytische Biochemie 2 Door Zeno De Paus
Algemene formule voor een externe kalibratie
𝑆 = 𝑘. 𝐶
Waarbij 𝑆 het signaal, 𝑘 een proportionele constante en 𝐶 de concentratie
Formule voor een éénpuntskalibratie:
We werken hier met 1 onbekend signaal (𝑆𝑥 ; 𝐶𝑥 ) en 1 kalibrator oftewel een standaard
(𝑆𝑆 ; 𝐶𝑆 ):
𝑆𝑆
𝑆𝑆 = 𝑘. 𝐶𝑆 → 𝑘 = 𝑆𝑥 𝑆𝑥 𝐶𝑆
𝐶𝑆
→ 𝐶𝑥 = =
𝑆𝑥 𝑘 𝑆𝑆
𝑆𝑥 = 𝑘. 𝐶𝑥 → 𝐶𝑥 = }
𝑘
Formule voor de standaard-additiemethode:
𝑆𝑆 = 𝑆𝑥+𝑆 − 𝑆𝑥
𝑉𝑆 𝑆𝑥
𝐶𝑥 = 𝐶𝑠 . .
𝑉𝑥 𝑆𝑆
Formule voor de inwendige standaard (IS):
𝑆𝑥
𝐶𝑥 = 𝐶𝐼𝑆 . . 𝑅𝐹
𝑆𝐼𝑆
Waarbij 𝑅𝐹 de responsfactor
Sensitiviteit aan de hand van de karakteristieke massa:
0,0044
𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 . = 𝑘𝑎𝑟𝑎𝑘𝑡𝑒𝑟𝑖𝑠𝑡𝑖𝑒𝑘𝑒 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎
𝑔𝑒𝑚𝑒𝑡𝑒𝑛 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑡𝑖𝑒
Verband tussen ppm en ppb:
1 𝑝𝑝𝑚 = 1𝑚𝑔/𝑙
1𝑝𝑝𝑏 = 1𝜇𝑔/𝑙
2
Hoofdstuk 1: Analytische performantie, kwaliteitscontrole en
kalibratie
Het gemiddelde van 𝒏 metingen en zijn standaardafwijking:
∑ 𝑥𝑖
〈𝑥〉 =
𝑛
∑(𝑥𝑖 − 〈𝑥〉)2
𝑆𝐷 = √
𝑛−1
De sensitiviteit van een biochemisch onderzoek:
Deze wordt voorgesteld door de helling (𝑎) van de ijklijn
𝑔𝑒𝑚𝑒𝑡𝑒𝑛 𝑠𝑖𝑔𝑛𝑎𝑎𝑙
ℎ𝑒𝑙𝑙𝑖𝑛𝑔 =
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑡𝑖𝑒
Indien we een lineaire curve hebben, kunnen we dit herschrijven:
𝑓(𝑥) = 𝑎𝑥 + 𝑏 → 𝑆𝑖𝑔𝑛𝑎𝑎𝑙 = 𝑠𝑒𝑛𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑒𝑖𝑡. 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑡𝑖𝑒 + 𝑟𝑢𝑖𝑠
De detectielimiet (LOD) van een biochemisch onderzoek:
𝐿𝑂𝐷 = 3𝑆𝐷𝑎𝑐ℎ𝑡𝑒𝑟𝑔𝑟𝑜𝑛𝑑
Waarbij
∑(𝑑𝑖 − 〈𝑑〉)2
𝑆𝐷𝑎𝑐ℎ𝑡𝑒𝑟𝑔𝑟𝑜𝑛𝑑 = √
𝑛−1
De kwantificatielimiet (LOQ) van een biochemisch onderzoek:
𝐿𝑂𝑄 ≈ 10𝑆𝐷𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜
De accuraatheid van een biochemisch onderzoek:
(𝑔𝑒𝑚𝑖𝑑𝑑𝑒𝑙𝑑𝑒) 𝑏𝑒𝑘𝑜𝑚𝑒𝑛 𝑤𝑎𝑎𝑟𝑑𝑒
𝑎𝑐𝑐𝑢𝑟𝑎𝑎𝑡ℎ𝑒𝑖𝑑 =
(𝑔𝑒𝑚𝑖𝑑𝑑𝑒𝑙𝑑𝑒) 𝑡ℎ𝑒𝑜𝑟𝑒𝑡𝑖𝑠𝑐ℎ𝑒 𝑤𝑎𝑎𝑟𝑑𝑒
De precisie van een biochemisch onderzoek:
𝑆𝑄 1
𝑉𝐶 = ~
𝜇 𝑝𝑟𝑒𝑐𝑖𝑠𝑖𝑒
Waarbij 𝑆𝐷 de standaardafwijking en 𝜇 het gemiddelde. Er geldt dat:
• Een hoge variatiecoëfficiënt (VC) → een lage precisie
• Een lage variatiecoëfficiënt (VC) → een hoge precisie
1
, Formularium Analytische Biochemie 2 Door Zeno De Paus
Algemene formule voor een externe kalibratie
𝑆 = 𝑘. 𝐶
Waarbij 𝑆 het signaal, 𝑘 een proportionele constante en 𝐶 de concentratie
Formule voor een éénpuntskalibratie:
We werken hier met 1 onbekend signaal (𝑆𝑥 ; 𝐶𝑥 ) en 1 kalibrator oftewel een standaard
(𝑆𝑆 ; 𝐶𝑆 ):
𝑆𝑆
𝑆𝑆 = 𝑘. 𝐶𝑆 → 𝑘 = 𝑆𝑥 𝑆𝑥 𝐶𝑆
𝐶𝑆
→ 𝐶𝑥 = =
𝑆𝑥 𝑘 𝑆𝑆
𝑆𝑥 = 𝑘. 𝐶𝑥 → 𝐶𝑥 = }
𝑘
Formule voor de standaard-additiemethode:
𝑆𝑆 = 𝑆𝑥+𝑆 − 𝑆𝑥
𝑉𝑆 𝑆𝑥
𝐶𝑥 = 𝐶𝑠 . .
𝑉𝑥 𝑆𝑆
Formule voor de inwendige standaard (IS):
𝑆𝑥
𝐶𝑥 = 𝐶𝐼𝑆 . . 𝑅𝐹
𝑆𝐼𝑆
Waarbij 𝑅𝐹 de responsfactor
Sensitiviteit aan de hand van de karakteristieke massa:
0,0044
𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 . = 𝑘𝑎𝑟𝑎𝑘𝑡𝑒𝑟𝑖𝑠𝑡𝑖𝑒𝑘𝑒 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎
𝑔𝑒𝑚𝑒𝑡𝑒𝑛 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑡𝑖𝑒
Verband tussen ppm en ppb:
1 𝑝𝑝𝑚 = 1𝑚𝑔/𝑙
1𝑝𝑝𝑏 = 1𝜇𝑔/𝑙
2
