Microscopía

Microscopía.



Microscopía.

1. Conceptos básicos de óptica.
La óptica e s la rama de la física que estudia la naturaleza de la luz, sus características y
sus manifestaciones. Comprende el estudio del comportamiento de la luz, la
interacción de la luz con la materia y la formación de las imágenes.
A) La luz.
Es una oscilación electromagnética que se propaga en el vacío y en medios transparentes.
Son las radiaciones que nuestro sentido de la vista puede percibir. Es una radiación
electromagnética, es decir, forma parte del espectro electromagnético: son las radiaciones
que tienen una longitud de onda de entre 380 y 750 nm
Contiene todos los colores. La percepción de los colores depende de las longitudes de
onda que el objeto refleje.
 Comportamiento de los materiales frente a la luz:
 Opacos: No dejan pasar la luz a través de ellos.
 Transparentes: Dejan pasar la luz y podemos ver bien a través de ellos.
 Translúcidos: Dejan pasar la luz, pero la transmiten en varias direcciones, por lo
que a través veremos formas borrosas.
B) Las lentes.
Son instrumentos que permiten el enfoque y obtener imágenes de objetos cuando se usan
solas o combinadas.
Ejemplos de sistemas ópticos basados en lentes: Ojo humano, cámara de fotos, proyector
de imágenes, microscopio, telescopio…
C) Tipos de lentes.
 Convexas, convergentes, de aumento o positivas: Unen (convergen) los rayos paralelos
al eje principal en un punto (foco de imagen).
 Cóncavas, divergentes, de dispersión o negativas: Separan (divergen) los rayos
paralelos al eje principal.
D) Otras propiedades de la luz.
 Reflexión: Fenómeno por el cual la luz no penetra sino que rebota sobre un objeto y es
dispersada. Puede ser:
 Difusa: La luz es esparcida en todas direcciones, en superficies mates.
 Especular: Sale en una sola dirección, en superficies pulidas o brillantes.
 Mixta: Situación intermedia.
 Refracción: Fenómeno por el que cambian de dirección los rayos de la luz al pasar de
un medio (n1) a otro (n2) que tiene distinta densidad.
 Difración: La luz se “dobla/curva” al pasar por el extremo de una superficie y no sigue
su propagación en línea recta. Produce la borrosidad que limita la capacidad de
aumento de las lentes.
 Absorción: Cuando la luz llega a un objeto, éste puede absorberla toda o una parte. La
luz absorbida se convierte en calor.
 Transmisión: La luz atraviesa una superficie u objeto.
 Directa: En objetos transparentes (vidrio, aire), no se producen cambios de
dirección o calidad de la luz.



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, Microscopía.


 Difusa: En objetos transparentes o semitransparentes (vidrio esmerilado), la luz se
desvía en muchas direcciones.
 Selectiva: En objetos con color (filtros de color), parte es absorbida y parte
transmitida.
 Interferencia: Ocurre cuando 2 ondas con la misma longitud de onda se superponen y
se interfieren.
 Constructiva: Si las dos ondas están en fase, se suman.
 Destructiva: Si las ondas están en contrafase, se cancelan.
 Polarización: El campo eléctrico de la luz oscila en un solo plano.
2. Microscopia.
Es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio
que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo humano.
A) Componentes básicos de los microscopios.
 Sistema de iluminación: Que emita luz (fotones, microscopio óptico) u otras
radiaciones electromagnéticas (UV, fluorescencia) o electrones (microscopio
electrónico).
 Sistema óptico: Es un conjunto de lentes que aumentan el objeto de estudio y
permitan su visualización.
 Sistema mecánico: Dan el soporte y permiten mover las lentes y/o la preparación.
 Accesorios: Cámaras de fotos o de vídeo, ordenadores…
B) Tipos de iluminación.
 Transiluminación: La luz es perpendicular a la preparación/muestra que debe ser muy
delgada y transparente, extensiones celulares o cortes muy finos de tejidos.
 Epiiluminación: El rayo de luz incide oblicuamente sobre la preparación/muestra que
no necesita ser tan fina ni transparente. En microscopios estereoscópicos, de
epifluorescencia o electrónicos de barrido
C) Propiedades ópticas.
 Aumento: nº de veces que se aumenta el tamaño real del objeto.
 Poder de resolución: Capacidad para distinguir dos puntos muy cercanos entre sí.
 Límite de resolución (R): Distancia mínima entre dos puntos para visualizarlos como
imágenes separadas. Poder de resolución y límite de resolución son dos magnitudes
inversamente proporcionales.
 Profundidad de foco: Posibilidad de enfocar correctamente un objeto de cierto grosor.
 Amplitud de campo: parte de la preparación que se ve aumenta, a mayor aumento
menor campo.
3. Microscopia óptica.
A) El sistema mecánico.
 Pie o base: Soporte del microscopio. Aloja la fuente de luz.
 Columna: Contiene el condensador y los mecanismos de enfoque.
 Mecanismo de enfoque: Permite desplazar en sentido vertical la platina, donde está la
muestra para enfocarla, para ello se giran.
 Tornillo macrométrico: Enfoque aproximado.
 Tornillo micrométrico: Enfoque fino.
 Platina: Soporte horizontal donde se sitúan las preparaciones tiene un agujero que
permite el paso de la luz. Suele tener pinzas de sujeción y un mecanismo para mover la
muestra en el plano horizontal.


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