HPLC: kwantitatieve bepaling propylparabeen in een
onbekende oplossing via vloeistofchromatografie
H
PLC = high performance liquid chromatography
=> vloeistofchromatografie
=> maakt gebruik van hoge drukken, leidt tot betere scheiding
!! maak GEEN gebruik van interne standaard, want UPLC toestel kan zeer
nauwkeurig volumes
injecteren => werk met piek oppervlakte in concentratiebepaling
Proef => reversed phase
• Mobiele fase:
– vloeistof (Bv mengsel methanol en water)
– Meer polair dan de stationaire fase
• Stationaire fase:
– Apolaire stof op silicadrager
– C8 kolom
– C18 kolom
– Phenyl of cyanogroepen
• Specifiek voor scheiding oplosbare componenten: 2 principes:
– verschil in oplosbaarheid en/of (= NIET verschil in vluchtigheid
gaschromatografie)
!! stof die beter oplosbaar is = minder neiging om te interaggeren met
stationaire fase
en meer in mobiele fase voorkomen; stof die slecht oplosbaar is zal
liever niet in
mobiele fase zitten en wel veel interaggeren met stationaire fase => zal
langer op
kolom blijven
– verschil in affiniteit voor de stationaire fase (bv polariteit)
!! polaire stof zal meer interactie tonen met polair stationaire fase
en trage elutie
vertonen
• Detector: UV/VIS detector
onbekende oplossing via vloeistofchromatografie
H
PLC = high performance liquid chromatography
=> vloeistofchromatografie
=> maakt gebruik van hoge drukken, leidt tot betere scheiding
!! maak GEEN gebruik van interne standaard, want UPLC toestel kan zeer
nauwkeurig volumes
injecteren => werk met piek oppervlakte in concentratiebepaling
Proef => reversed phase
• Mobiele fase:
– vloeistof (Bv mengsel methanol en water)
– Meer polair dan de stationaire fase
• Stationaire fase:
– Apolaire stof op silicadrager
– C8 kolom
– C18 kolom
– Phenyl of cyanogroepen
• Specifiek voor scheiding oplosbare componenten: 2 principes:
– verschil in oplosbaarheid en/of (= NIET verschil in vluchtigheid
gaschromatografie)
!! stof die beter oplosbaar is = minder neiging om te interaggeren met
stationaire fase
en meer in mobiele fase voorkomen; stof die slecht oplosbaar is zal
liever niet in
mobiele fase zitten en wel veel interaggeren met stationaire fase => zal
langer op
kolom blijven
– verschil in affiniteit voor de stationaire fase (bv polariteit)
!! polaire stof zal meer interactie tonen met polair stationaire fase
en trage elutie
vertonen
• Detector: UV/VIS detector
