Samenvatting BLT20 Pathologische Microbiologie - Bacteriologie

1


Hoofdstuk 2 Identificatiemethoden
Primaire kenmerken
Morfologische kenmerken
1) Gramkleuring
 Werking
o Kristalviolet  lugol (beitser)  aceton:ethanol (30 :70)  safranine
 Resultaten
o Grampositief = paars
o Gramnegatief = roze

2) Ziehl-Neelsen kleuring
 Werking
o Basische fuschine  ontkleurder  zure methyleenblauw
 Resultaten
o Zuurvast = paars
o Niet zuurvast = blauw
Groeivoorwaarden
1) Zuurstofbehoefte



2) Omgevingsatmosfeer
 Temperatuur
 Omgeving  capnofiel (verhoogde CO2-concentratie), anaeroob…
 Zouttolerantie- en depentie
o Halofiel
o MSA-bodem
 Galtolerantie- en stimulatie (MacConkey)

3) Mannitol Salt agar
 Selectief
o Hoge zoutconcentratie (7,5 %)
 Di erentieel
o Mannitol & fenolrood

4) MacConkey agar
 Selectief
o Galzouten  zullen neerslaan bij heftige zuurproductie
o Kristalviolet  zal ervoor zorgen dat enkel Gramnegatieve bacteriën groeien
 Di erentieel
o Lactose & neutraalrood
 Resultaten
o Positief = rood
o Negatief = geel
 Wat is er gebeurd? Rood = positief = zuurproductie door fermentatie van
lactose

, 2


Gevoeligheid voor chemische stoffen & AB
 Gevoelig of resistent tegen AB  identificatie
 Groei-inhiberende sto en
o Briljantgroen  isolatie Salmonella
o Telluriet  isolatie C. diphteriae
Pigmentproductie
 Pigmentproductie afhankelijk van soort bacterie
Hemolyse
1) Bloedagar
 Universeel
 Resultaten
o α-hemolyse  productie H2O2 waardoor Hb  metHb wordt  groen
o β-hemolyse  volledige hemolyse van RBC’n  helder
o γ-hemolyse  geen hemolyse van RBC’n  niks



2) CAMP-tests
 Werking
o CAMP-factor + β-toxines  synergetische hemolyse
 CAMP-factor  S. agalactiae
 β-toxines  S. aureus
 β-toxines = β-hemolysine
 Resultaten
o Positief pijlvorming  S. agalactiae
o Negatief niets veranderd

3) Omgekeerde CAMP-test
 Werking
o CAMP-factor + α-toxines  synergetische hemolyse
 CAMP-factor  S. agalactiae
 α-toxines  C. perfringens
 Resultaten
o Positief vlinderdasvorming  C. perfringens
o Negatief niets veranderd

, 3


Snelle enzymatische testen
4) Katalasetest
 Werking
o Katalase splitst H2O2 in H2O & O2
 Resultaten
o Positief belletjes
o Negatief niets

5) Cytochroomoxidasetest
 Werking van enzym
o Brengt O2 naar de cel voor de productie van ATP
 Resultaten
o Positief blauwe kleuring
o Negatief niets

6) Andere testen
 Animopeptidasetest  voor Gramlabiele bacteriën
 Latexagglutinatietest  S. aureus



Secundaire kenmerken
Afbraak koolhydraten
1) Vergisting koolhydraten
 Werking
o Polysacharide (koolhydraat)  glucose  pyrodruivenzuur
o Purple broth met broomcresolpurper
 Resultaten
o Positief geel
o Negatief paars
 Opgelet
o Te lang laten incuberen  geen zuur meer doordat zuur + CO2 + H2O wordt
omgevormd  geen geel kleur meer dus vals negatief

2) Oxidatie-fermentatie test
 Werking
o Broomthymolblauw
 Resultaten
o Inert  geen zuurvorming  volledig blauw
o Oxiderend  zuurvorming bovenaan  bovenaan geel
o Fermenterend  volledige zuurvorming  volledig geel