STAALVOORBEREIDING
INLEIDING
staalvoorbereiding = belangrijke stap in farmaceutische analyse, vnl in bio-analyse
afhankelijk van:
chemische aard van analyt
o water oplosbaar, niet-water oplosbaar
o polair-apolair
o hydrofiel-lipofiel
o neutraal, zuur, basisch
soort matrix: serum, bloed, urine, weefsel, melk, voeding
instrumentele analyse techniek: LC, GC, TLC
detectie techniek: HPLC bv
er moet een goede match zijn tussen analyten, matrix en analytische methode!
DOEL
= analyt in een compatibele vorm brengen met instrumentele analyse -> analyt:
zuiveren, isoleren, derivatiseren, concentreren
we willen analyt isoleren uit matrix = selectieve extractie -> eventueel zuiveringsstap doen
achteraf om interferenties te vermijden
BEHANDELEN VAN STALEN
Pre-analytische fase = alles wat je doet met staal voor je aan analyse zelf begint -> soms zijn deze
stappen in een protocol
STABILISEREN, DROGEN, STOCKEREN
(Cross)-contaminatie vermijden
geen stoffen induceren in staal, dus geen transfer
cross = contaminatie van ene staal in andere
o bv te veel matrix bij staal 1: niet alles is weg na 1e run
o vb te veel analyt: deel ervan doet nog mee met 2 e run
o kan ook gebeuren in pre-analytische fase; vnl met volatiele stoffen
o tijdens extractie: vuil glaswerk
- reinig door autoclaaf op 400°C
- salpeterzuur: organische resten worden geoxideerd -> spoelen
Homogenisatie = doen om representatief staal te hebben
niet-vluchtige analyten: mortier of ultrasoon bad gebruiken (voor kleine hoeveelheden)
zeer vluchtige stoffen: homogenisatie vermijden -> niet-reproduceerbare verliezen
vloeibare stalen: bewaren in gasdichte flessen en direct analyseren -> makkelijk te homogeniseren
Vereisten voor glascontainers gebruiken -> voor biologische stalen: plastieken containers zoals teflon (PTFE) en
materialen/chemicalië polypropyleen
n voorbereiding glaswerk: zorgvuldig reinigen
o verwarmen in oven bij hoge temperatuur > 200°C
45
INLEIDING
staalvoorbereiding = belangrijke stap in farmaceutische analyse, vnl in bio-analyse
afhankelijk van:
chemische aard van analyt
o water oplosbaar, niet-water oplosbaar
o polair-apolair
o hydrofiel-lipofiel
o neutraal, zuur, basisch
soort matrix: serum, bloed, urine, weefsel, melk, voeding
instrumentele analyse techniek: LC, GC, TLC
detectie techniek: HPLC bv
er moet een goede match zijn tussen analyten, matrix en analytische methode!
DOEL
= analyt in een compatibele vorm brengen met instrumentele analyse -> analyt:
zuiveren, isoleren, derivatiseren, concentreren
we willen analyt isoleren uit matrix = selectieve extractie -> eventueel zuiveringsstap doen
achteraf om interferenties te vermijden
BEHANDELEN VAN STALEN
Pre-analytische fase = alles wat je doet met staal voor je aan analyse zelf begint -> soms zijn deze
stappen in een protocol
STABILISEREN, DROGEN, STOCKEREN
(Cross)-contaminatie vermijden
geen stoffen induceren in staal, dus geen transfer
cross = contaminatie van ene staal in andere
o bv te veel matrix bij staal 1: niet alles is weg na 1e run
o vb te veel analyt: deel ervan doet nog mee met 2 e run
o kan ook gebeuren in pre-analytische fase; vnl met volatiele stoffen
o tijdens extractie: vuil glaswerk
- reinig door autoclaaf op 400°C
- salpeterzuur: organische resten worden geoxideerd -> spoelen
Homogenisatie = doen om representatief staal te hebben
niet-vluchtige analyten: mortier of ultrasoon bad gebruiken (voor kleine hoeveelheden)
zeer vluchtige stoffen: homogenisatie vermijden -> niet-reproduceerbare verliezen
vloeibare stalen: bewaren in gasdichte flessen en direct analyseren -> makkelijk te homogeniseren
Vereisten voor glascontainers gebruiken -> voor biologische stalen: plastieken containers zoals teflon (PTFE) en
materialen/chemicalië polypropyleen
n voorbereiding glaswerk: zorgvuldig reinigen
o verwarmen in oven bij hoge temperatuur > 200°C
45
