El laboratorio de
cultivos celulares
1. Introducción
Laboratorio: lugar dotado de los medios necesarios para realizar investigaciones, experimentos y trabajos
de carácter científico o técnico. Realidad en la cual se experimenta o se elabora algo.
Cultivo: desde el punto de visto biológico, es un método de obtención de microorganismo, cél. o tejidos
mediante siembras controladas en medios adecuados. También se puede definir como una población de
microorganismos, cél. o tejidos obtenidos por medio de cultivo.
Célula: biológicamente, es la unidad fundamental de los organismos vivos, generalmente de tamaño
microscópico, capaz de reproducción independiente y formada por un citoplasma y un núcleo rodeados por una
membrana.
Cultivo celular: proceso o conjunto de técnicas que nos permiten aislar, crecer, mantener y reproducir “in
vitro” cél. de origen animal o vegetal manteniendo al máximo sus propiedades fisiológicas, metabólicas,
bioquímicas, genéticas… Las claves para el éxito de un cultivo celular son conservar la salud de nuestras cél.,
seguir los protocolos, y comprobar la salud constantemente.
2. Tipos de laboratorios
Lo ideal para trabajar con las cél. es contar con un espacio específico y exclusivo (aislada, lejos de zonas de
paso), lo que sería, una sala de cultivos. Es importante tener un espacio independiente para mantener un
buen nivel de asepsia.
Características y aspectos a tener en cuenta:
o Debe contar con todos los mecanismos disponibles y razonables para mantener el nivel de esterilidad
necesario para el tipo de ensayos que se lleven a cabo en su interior.
o Los centros, normalmente, tienen salas separadas de eucariotas y de procariotas.
o Encontramos diferentes niveles de seguridad, exigencia y normativa según el uso del laboratorio.
Debemos también tener en cuenta que la tasa de crecimiento de las cél. en cultivo es muy inferior a la de
los contaminantes habituales (bacterias, virus, hongos, levaduras y micoplasmas), por lo que, es fundamental
mantenerlos lejos de nuestros cultivos. Lo que ocurre es que las bacterias se dividen cada 10 minutos, mientras
que las cél. en cultivo cada 24 horas, por lo que, si 1 millón de cél. se contaminan con 1 bacteria, tras 24 horas,
habrá 2 millones de cél. y 4000 trillones de bacterias.
Por tanto, las instalaciones para cultivos son muy diferentes en función del tipo de centro o industria en el que
se usen y la finalidad de los cultivos que se lleven a cabo en esas instalaciones.
2.1. Tipos de laboratorio según su patogenicidad
Bioseguridad: conjunto de principios, normas, protocolos, tecnologías y prácticas que se implementan
para evitar el riesgo para la salud y el medio ambiente que proviene de la exposición a agentes biológicos
causantes de enfermedades infecciosas, tóxicas o alérgicas.
Tenemos que proteger: a nosotros (autoprotección), a las cél. y cultivos, al equipo, materiales, etc., y al medio
ambiente (residuos).
Nuestras cél. también son agentes biológicos, según el Artículo 2 del Real Decreto 664/1997, 12 de mayo,
sobre la protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos
durante el trabajo, los cultivos celulares son considerados agentes biológicos.
Agente biológico: microorganismos, incluso los genéticamente modificados, cultivos y endoparásitos
humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad.
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, Clasificación de los agentes biológicos: a efectos de lo dispuesto en el RD, los agentes biológicos se clasifican
en función del riesgo de infección en 4 grupos.
Agente biológico del grupo 1: Agente biológico del grupo 2: aquél que puede causar una
aquél que resulta poco probable que enfermedad en el hombre y que puede suponer un peligro
cause una enfermedad en el hombre. para los trabajadores, siendo poco probable que se propague
a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o
Agente biológico del grupo 3: aquél tratamiento eficaz. Por ejemplo, Helicobacter pylori.
que puede causar una enfermedad
grave en el hombre y presenta un serio Agente biológico del grupo 4: aquél que, causando una
peligro para los trabajadores, con riesgo enfermedad grave en el hombre, supone un serio peligro para
de que se propague a la colectividad y los trabajadores, con muchas probabilidades de que se
existiendo generalmente una profilaxis propague a la colectividad, y sin que exista generalmente una
o tratamiento eficaz. Por ejemplo, profilaxis o un tratamiento eficaz. Por ejemplo, Nairovirus de
Bacillus anthracis, Brucella abortus… la fiebre hemorrágica, Ebolavirus…
Por tanto, los laboratorios se clasifican atendiendo a los distintos niveles de bioseguridad
Las designaciones del nivel de bioseguridad se basan en una combinación de las características del diseño, la
construcción, los medios de contención, el equipo, y las prácticas y procedimientos de operación que se vayan
a realizar. Todos estos requisitos son necesarios para trabajar con agentes patógenos de los distintos grupos
de riesgo.
¿Cómo se evalúa el riesgo de un cultivo para establecer su clasificación?: se analizan
varios parámetros como las propiedades intrínsecas del cultivo, las propiedades adquiridas como resultado de
la modificación genética, las propiedades adquiridas como resultado de un infección con agentes patógenos, y
las condiciones de trabajo.
Propiedades intrínsecas del cultivo:
1. El tipo de cél. o tejido de procedencia
2. Tipo de cultivo
3. La fuente (especie origen de las cél.)
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cultivos celulares
1. Introducción
Laboratorio: lugar dotado de los medios necesarios para realizar investigaciones, experimentos y trabajos
de carácter científico o técnico. Realidad en la cual se experimenta o se elabora algo.
Cultivo: desde el punto de visto biológico, es un método de obtención de microorganismo, cél. o tejidos
mediante siembras controladas en medios adecuados. También se puede definir como una población de
microorganismos, cél. o tejidos obtenidos por medio de cultivo.
Célula: biológicamente, es la unidad fundamental de los organismos vivos, generalmente de tamaño
microscópico, capaz de reproducción independiente y formada por un citoplasma y un núcleo rodeados por una
membrana.
Cultivo celular: proceso o conjunto de técnicas que nos permiten aislar, crecer, mantener y reproducir “in
vitro” cél. de origen animal o vegetal manteniendo al máximo sus propiedades fisiológicas, metabólicas,
bioquímicas, genéticas… Las claves para el éxito de un cultivo celular son conservar la salud de nuestras cél.,
seguir los protocolos, y comprobar la salud constantemente.
2. Tipos de laboratorios
Lo ideal para trabajar con las cél. es contar con un espacio específico y exclusivo (aislada, lejos de zonas de
paso), lo que sería, una sala de cultivos. Es importante tener un espacio independiente para mantener un
buen nivel de asepsia.
Características y aspectos a tener en cuenta:
o Debe contar con todos los mecanismos disponibles y razonables para mantener el nivel de esterilidad
necesario para el tipo de ensayos que se lleven a cabo en su interior.
o Los centros, normalmente, tienen salas separadas de eucariotas y de procariotas.
o Encontramos diferentes niveles de seguridad, exigencia y normativa según el uso del laboratorio.
Debemos también tener en cuenta que la tasa de crecimiento de las cél. en cultivo es muy inferior a la de
los contaminantes habituales (bacterias, virus, hongos, levaduras y micoplasmas), por lo que, es fundamental
mantenerlos lejos de nuestros cultivos. Lo que ocurre es que las bacterias se dividen cada 10 minutos, mientras
que las cél. en cultivo cada 24 horas, por lo que, si 1 millón de cél. se contaminan con 1 bacteria, tras 24 horas,
habrá 2 millones de cél. y 4000 trillones de bacterias.
Por tanto, las instalaciones para cultivos son muy diferentes en función del tipo de centro o industria en el que
se usen y la finalidad de los cultivos que se lleven a cabo en esas instalaciones.
2.1. Tipos de laboratorio según su patogenicidad
Bioseguridad: conjunto de principios, normas, protocolos, tecnologías y prácticas que se implementan
para evitar el riesgo para la salud y el medio ambiente que proviene de la exposición a agentes biológicos
causantes de enfermedades infecciosas, tóxicas o alérgicas.
Tenemos que proteger: a nosotros (autoprotección), a las cél. y cultivos, al equipo, materiales, etc., y al medio
ambiente (residuos).
Nuestras cél. también son agentes biológicos, según el Artículo 2 del Real Decreto 664/1997, 12 de mayo,
sobre la protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos
durante el trabajo, los cultivos celulares son considerados agentes biológicos.
Agente biológico: microorganismos, incluso los genéticamente modificados, cultivos y endoparásitos
humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad.
1
, Clasificación de los agentes biológicos: a efectos de lo dispuesto en el RD, los agentes biológicos se clasifican
en función del riesgo de infección en 4 grupos.
Agente biológico del grupo 1: Agente biológico del grupo 2: aquél que puede causar una
aquél que resulta poco probable que enfermedad en el hombre y que puede suponer un peligro
cause una enfermedad en el hombre. para los trabajadores, siendo poco probable que se propague
a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o
Agente biológico del grupo 3: aquél tratamiento eficaz. Por ejemplo, Helicobacter pylori.
que puede causar una enfermedad
grave en el hombre y presenta un serio Agente biológico del grupo 4: aquél que, causando una
peligro para los trabajadores, con riesgo enfermedad grave en el hombre, supone un serio peligro para
de que se propague a la colectividad y los trabajadores, con muchas probabilidades de que se
existiendo generalmente una profilaxis propague a la colectividad, y sin que exista generalmente una
o tratamiento eficaz. Por ejemplo, profilaxis o un tratamiento eficaz. Por ejemplo, Nairovirus de
Bacillus anthracis, Brucella abortus… la fiebre hemorrágica, Ebolavirus…
Por tanto, los laboratorios se clasifican atendiendo a los distintos niveles de bioseguridad
Las designaciones del nivel de bioseguridad se basan en una combinación de las características del diseño, la
construcción, los medios de contención, el equipo, y las prácticas y procedimientos de operación que se vayan
a realizar. Todos estos requisitos son necesarios para trabajar con agentes patógenos de los distintos grupos
de riesgo.
¿Cómo se evalúa el riesgo de un cultivo para establecer su clasificación?: se analizan
varios parámetros como las propiedades intrínsecas del cultivo, las propiedades adquiridas como resultado de
la modificación genética, las propiedades adquiridas como resultado de un infección con agentes patógenos, y
las condiciones de trabajo.
Propiedades intrínsecas del cultivo:
1. El tipo de cél. o tejido de procedencia
2. Tipo de cultivo
3. La fuente (especie origen de las cél.)
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