• Transductie : horizontale DNA-transfer via mechanisme van virusinfectie
• Gentransfer in vitro (celculturen) en in vivo (gentherapie toepassingen)
• Insertie van een transgen of omwisseling van virale sequenties voor een transgen
• Insertie door ligatie of homologe recombinatie
• Helper-onafhankelijk : kan zich autonoom repliceren + propageren
• Helper-afhankelijk : virale elementen moeten in trans voorzien worden
→ co-infectie met helpervirus ; helperplasmide voorzien of een ‘complementaire cellijn’ (ook ‘packaging’ cellijn)
• Vaak gewenst : afwezigheid van virale coderende sequenties → enkel amplicons
overhouden (cis-elementen)
voordelen : niet-cytotoxisch en grotere inserten mogelijk
• Keuze virale vector :
- afhankelijk van de te transformeren gastheer
- type expressie (stabiel - transiënt)
- hoeveelheid te verpakken DNA
- adenovirus - retrovirus - beperkte verpakkingscapaciteit (icosaëdrale hoofdjes)
- baculovirus - staafvormig - minder strikt
KEUZE VAN VIRALE VECTOREN (1)
Adenovirus
Voordeel:
- Zelf soortspecificiteit als celspecificiteit kiezen
- Niet geenvelopeerd virus met spike proteinen op 6 hoek. Deze spike proteines zijn belangrijk voor de
gastheer specificiteit. Deze spikeproteinen kunnen uitgewisseld worden. Bepalen soort- en cel
specificiteit
6.17
114
• Gentransfer in vitro (celculturen) en in vivo (gentherapie toepassingen)
• Insertie van een transgen of omwisseling van virale sequenties voor een transgen
• Insertie door ligatie of homologe recombinatie
• Helper-onafhankelijk : kan zich autonoom repliceren + propageren
• Helper-afhankelijk : virale elementen moeten in trans voorzien worden
→ co-infectie met helpervirus ; helperplasmide voorzien of een ‘complementaire cellijn’ (ook ‘packaging’ cellijn)
• Vaak gewenst : afwezigheid van virale coderende sequenties → enkel amplicons
overhouden (cis-elementen)
voordelen : niet-cytotoxisch en grotere inserten mogelijk
• Keuze virale vector :
- afhankelijk van de te transformeren gastheer
- type expressie (stabiel - transiënt)
- hoeveelheid te verpakken DNA
- adenovirus - retrovirus - beperkte verpakkingscapaciteit (icosaëdrale hoofdjes)
- baculovirus - staafvormig - minder strikt
KEUZE VAN VIRALE VECTOREN (1)
Adenovirus
Voordeel:
- Zelf soortspecificiteit als celspecificiteit kiezen
- Niet geenvelopeerd virus met spike proteinen op 6 hoek. Deze spike proteines zijn belangrijk voor de
gastheer specificiteit. Deze spikeproteinen kunnen uitgewisseld worden. Bepalen soort- en cel
specificiteit
6.17
114
