Labo biotech – Vragen test 2 (2019)
V1A Wat gebeurt er tijdens de “semi-dry blotting” en waarom wordt er een blotting
uitgevoerd?
Elektroforetisch transfer van eiwitten naar een vaste drager. Een voorbeeld van een vaste
drager is het Nylon membraan. Dit membraan is positief geladen. Eiwitten zijn dan op hun
beurt negatief geladen dus elueren zo van de gel door de elektrische stroom naar het
membraan.
Deze blotting wordt uitgevoerd omdat het na semi-dry blotting meer toegankelijk is voor
verschillende detectietechnieken en we zo het resultaat makkelijk kunnen bewaren.
V1B Geef een schematische voorstelling van de blotopstelling en motiveer uitvoerig
waarom de blotopstelling moet gemaakt worden zoals voorgesteld.
De eiwitten die op de gel zitten zijn negatief geladen, de Kathode is ook negatief geladen en
versterkt zo de elektrische stroom. Het membraan is positief geladen en zit vlak bij de
positieve anode. Zo gebeurt er een transfer van de gel naar het membraan. Het blotting
papier zorgt dan weer voor een uniforme flow van de buffer door de gel.
De buffer zorgt voor effectieve elutie van de proteïnen uit de gelmatrix en zo binden de
proteïne effectief aan het membraan
V1A Wat gebeurt er tijdens de “semi-dry blotting” en waarom wordt er een blotting
uitgevoerd?
Elektroforetisch transfer van eiwitten naar een vaste drager. Een voorbeeld van een vaste
drager is het Nylon membraan. Dit membraan is positief geladen. Eiwitten zijn dan op hun
beurt negatief geladen dus elueren zo van de gel door de elektrische stroom naar het
membraan.
Deze blotting wordt uitgevoerd omdat het na semi-dry blotting meer toegankelijk is voor
verschillende detectietechnieken en we zo het resultaat makkelijk kunnen bewaren.
V1B Geef een schematische voorstelling van de blotopstelling en motiveer uitvoerig
waarom de blotopstelling moet gemaakt worden zoals voorgesteld.
De eiwitten die op de gel zitten zijn negatief geladen, de Kathode is ook negatief geladen en
versterkt zo de elektrische stroom. Het membraan is positief geladen en zit vlak bij de
positieve anode. Zo gebeurt er een transfer van de gel naar het membraan. Het blotting
papier zorgt dan weer voor een uniforme flow van de buffer door de gel.
De buffer zorgt voor effectieve elutie van de proteïnen uit de gelmatrix en zo binden de
proteïne effectief aan het membraan
