[Typ hier]
Yilska Smet 1BLTC 24/04/2020
Labo farmaceutische analyse Fotometrische bepaling van Riboflavine Docent: T.Warnez
Nr:22
Fotometrische bepaling van Riboflavine
1. Doel
De concentratie van riboflavine bepalen in 2 onbekenden en het gehalte aan riboflavine in een
gelule, met behulp van fotometrie.
2. Principe
Riboflavine wordt afgewogen en opgelost in gedestilleerd water, met behulp van ultrasoon bad.
Hieruit wordt een verdunningsreeks gemaakt, waarvan de concentraties gekend zijn. De absorbantie
van de oplossingen worden gemeten en uitgezet in een kalibratielijn. A wordt gemeten en via lineaire
regressie wordt de concentratie van een onbekende oplossing bepaald.
In water opgeloste riboflavine heeft een absorptiemaximum bij 446nm.
3. Benodigde reagentia
Stockoplossing riboflavine
M = 376,4 g/mol
60,0 mg aanlengen met gedestilleerd water tot 1000 ml
mtheorie = 60,0 mg 0,0600 g
mpraktisch = 0,0587 g
concentratie praktisch
0,0587 g mol
m =0,000156
cpr =
V∗M
=¿
(
1,000 l∗376,4
g
mol ) l
58,7 0 mg
cpr = =58,70 mg /l
1,000 l
opm: Geen aluminiumfolie in het ultrasoon bad plaatsen
4. Onbekende
O1 en O2
, [Typ hier]
Breng twee droge erlenmeyers (O1 en O2) met telkens 50,00 ml stockoplossing en dien deze in bij de
docent. Pipetteer 50,00 ml van de teruggekregen oplossing in een maatkolf van 100,0 ml en leng aan
met gedestilleerd water. Bereken de concentratie in mg/l rekening houdend met de verdunning.
O3
De docent geeft een gelule riboflavine ( die ongeveer de dagelijkse aanbevolen hoeveelheid bevat)
De dagelijks aanbevolen hoeveelheid bedraagt 1,6 mg . Los de gelule op in een maatkolf van 100,0 ml
en leng aan tot 100,0 ml.
Meet de absorbantie van deze drie onbekenden samen met de verdunningsreeks.
1,6 mg
Concentratie theoretisch : = 16 mg/l
0,1000l
Dit valt mooi tussen de hoogste en laagste concentratie die we gebruiken om de kalibratielijn op te
stellen. We moeten O3 dus niet verdunnen.
5. Resultaten + verwerking
Concentratie van de maatkolven
Stockoplossing = 58,7 0 mg/l
10,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 1 tot 3: =5,870 mg/l
100,0 ml
20,00 ml∗58,70mg /l
Maatkolf 4: =11,74 mg/l
100,0 ml
30,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 5 en 6: =17,61 mg /l
100,0 ml
40,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 7: =¿ 23,48 mg/l
100,0 ml
50,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 8 tot 10: =29,35 mg /l
100,0 ml
Maatkolf O1:
Y= 0,03950x + 0,0155
Absorbantie = 0,858
0,858−0,0155
=x
0,03950
X = 21,3 mg/l
Verdunningsfactor = 2
21,3 mg/l *2 = 42,7 mg/l
Yilska Smet 1BLTC 24/04/2020
Labo farmaceutische analyse Fotometrische bepaling van Riboflavine Docent: T.Warnez
Nr:22
Fotometrische bepaling van Riboflavine
1. Doel
De concentratie van riboflavine bepalen in 2 onbekenden en het gehalte aan riboflavine in een
gelule, met behulp van fotometrie.
2. Principe
Riboflavine wordt afgewogen en opgelost in gedestilleerd water, met behulp van ultrasoon bad.
Hieruit wordt een verdunningsreeks gemaakt, waarvan de concentraties gekend zijn. De absorbantie
van de oplossingen worden gemeten en uitgezet in een kalibratielijn. A wordt gemeten en via lineaire
regressie wordt de concentratie van een onbekende oplossing bepaald.
In water opgeloste riboflavine heeft een absorptiemaximum bij 446nm.
3. Benodigde reagentia
Stockoplossing riboflavine
M = 376,4 g/mol
60,0 mg aanlengen met gedestilleerd water tot 1000 ml
mtheorie = 60,0 mg 0,0600 g
mpraktisch = 0,0587 g
concentratie praktisch
0,0587 g mol
m =0,000156
cpr =
V∗M
=¿
(
1,000 l∗376,4
g
mol ) l
58,7 0 mg
cpr = =58,70 mg /l
1,000 l
opm: Geen aluminiumfolie in het ultrasoon bad plaatsen
4. Onbekende
O1 en O2
, [Typ hier]
Breng twee droge erlenmeyers (O1 en O2) met telkens 50,00 ml stockoplossing en dien deze in bij de
docent. Pipetteer 50,00 ml van de teruggekregen oplossing in een maatkolf van 100,0 ml en leng aan
met gedestilleerd water. Bereken de concentratie in mg/l rekening houdend met de verdunning.
O3
De docent geeft een gelule riboflavine ( die ongeveer de dagelijkse aanbevolen hoeveelheid bevat)
De dagelijks aanbevolen hoeveelheid bedraagt 1,6 mg . Los de gelule op in een maatkolf van 100,0 ml
en leng aan tot 100,0 ml.
Meet de absorbantie van deze drie onbekenden samen met de verdunningsreeks.
1,6 mg
Concentratie theoretisch : = 16 mg/l
0,1000l
Dit valt mooi tussen de hoogste en laagste concentratie die we gebruiken om de kalibratielijn op te
stellen. We moeten O3 dus niet verdunnen.
5. Resultaten + verwerking
Concentratie van de maatkolven
Stockoplossing = 58,7 0 mg/l
10,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 1 tot 3: =5,870 mg/l
100,0 ml
20,00 ml∗58,70mg /l
Maatkolf 4: =11,74 mg/l
100,0 ml
30,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 5 en 6: =17,61 mg /l
100,0 ml
40,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 7: =¿ 23,48 mg/l
100,0 ml
50,00 ml∗58,70 mg/l
Maatkolf 8 tot 10: =29,35 mg /l
100,0 ml
Maatkolf O1:
Y= 0,03950x + 0,0155
Absorbantie = 0,858
0,858−0,0155
=x
0,03950
X = 21,3 mg/l
Verdunningsfactor = 2
21,3 mg/l *2 = 42,7 mg/l
