Scheidingstechnieken
Gaschromatografie:
Wat is chromatografie?
Chromatografie is een instrumentele techniek die gebruikt wordt om componenten uit een
mengsel te scheiden en vervolgens te identificeren en kwantificeren op basis van hun fysische en
chemische eigenschappen.
Gekenmerkt door: mobiele en stationaire fase
➔ Interacties van componenten van het mengsel met deze fasen zorgt dat scheiding optreedt
Gaschromatografie (GC) en vloeistofchromatografie (HPLC) → meest gebruikte vormen
Gaschromatografie:
= techniek die gebruikt wordt om vluchtige organische stoffen te analyseren
➔ Mobiele fase altijd gasvormig (ook wel draaggas genoemd)
➔ Stationaire fase bestaat uit dunne laag vloeistof die vast zit op dragermateriaal
Componenten worden gescheiden obv van verschil in
polariteit en verschil in vluchtigheid (kookpunt)
Draaggas is bij GC enkel nodig om componenten te
laten bewegen doorheen de kolom
Componenten gaan interactie aan met stationaire fase
Doordat GC scheiding in een verwarmde oven
plaatsvindt zullen componenten meer of minder snel
verdampen en hun weg doorgeen de kolom afleggen
➔ Relatief laag kookpunt zal sneller de kolom verlaten
De tijd die een component nodig heeft om de kolom te verlaten = de retentietijd
BLOKSCHEMA GC:
, Dragergas:
Mobiele fase bij GC is steeds inert gas (He, N2, H2)
Keuze van dragergas hangt af van:
- De detector
- De noodzakelijke efficiëntie van de scheiding
- Veiligheid in gebruik van milieu (vb He = schaars en duur gas)
Het gebruikte dragergas dient hoge zuiverheid te hebben zodanig dat de stationaire fase niet wordt
aangetast
De uitgangsdruk naar het instrument (psi of bar) is belangrijk voor goede scheiding. Instellen gebeurt
aan de gasfles met de ontspanner.
Het debiet van het dragergas (flow) wordt uitgedrukt in mL/min en wordt ingesteld op het toetsel.
Optimale debiet kan bepaald worden dmv Van Deemter curve
Injectiezone:
De ingang van de kolom s afgesloten van de omgeveing door de inlet (=injectiezone). Bij elk type
injectie wordt er gebruik gemaakt van injectiespuit.
HOE MANUEEL INJECTEREN?
Injecteren een staalvolume in de orde van enkele microliters. Door klein volume is het belang om dit
correct te doen om variaties op het staalvolume te beperken
• Zuig eerst 1 à 2 microliter lucht op, vervolgens 1 microliter staal, gevolgd door opnieuw
enkele microliters lucht.
• Let erop dat je de naald goed spoelt met aceton voor-én na de injectie. Op die manier kan je
contaminatie van de oplossing waaruit je injecteert vermijden.
• Wanneer je injecteert plaats je de naald voorzichting in de injectiezone en vervolgens
beweeg je de plunjer van de spuit in een vlotte beweging naar beneden.
OPBOUW INJECTIEZONE:
De kolom is steeds afgesloten door een rubberen septum, die wordt doorgeprikt door de
injectienaald zodat het staal in de injectiezone en vervolgens in de kolom terecht komt.
Type injectiezone: split/splitless-injector
Dit type injector kan gebruikt worden in 2 modi:
• split: slechts een deel van het geïnjecteerde staal bereikt de kolom. Het grootste deel wordt
afgevoerd zodat de kolom niet overladen wordt.
• splitless: het volledige geïnjecteerde staal bereikt de kolom.
Chromatografische kolom:
Capillaire kolommen zijn meest gebruikt → heeft hoge scheidingsefficiëntie en korte retentietijden
(=kortere analysetijden)
Capillaire kolom bestaat uit drager materiaal waarop de stationaire fase uitgesmeerd is als dunne
film (=vloeistof)
Gaschromatografie:
Wat is chromatografie?
Chromatografie is een instrumentele techniek die gebruikt wordt om componenten uit een
mengsel te scheiden en vervolgens te identificeren en kwantificeren op basis van hun fysische en
chemische eigenschappen.
Gekenmerkt door: mobiele en stationaire fase
➔ Interacties van componenten van het mengsel met deze fasen zorgt dat scheiding optreedt
Gaschromatografie (GC) en vloeistofchromatografie (HPLC) → meest gebruikte vormen
Gaschromatografie:
= techniek die gebruikt wordt om vluchtige organische stoffen te analyseren
➔ Mobiele fase altijd gasvormig (ook wel draaggas genoemd)
➔ Stationaire fase bestaat uit dunne laag vloeistof die vast zit op dragermateriaal
Componenten worden gescheiden obv van verschil in
polariteit en verschil in vluchtigheid (kookpunt)
Draaggas is bij GC enkel nodig om componenten te
laten bewegen doorheen de kolom
Componenten gaan interactie aan met stationaire fase
Doordat GC scheiding in een verwarmde oven
plaatsvindt zullen componenten meer of minder snel
verdampen en hun weg doorgeen de kolom afleggen
➔ Relatief laag kookpunt zal sneller de kolom verlaten
De tijd die een component nodig heeft om de kolom te verlaten = de retentietijd
BLOKSCHEMA GC:
, Dragergas:
Mobiele fase bij GC is steeds inert gas (He, N2, H2)
Keuze van dragergas hangt af van:
- De detector
- De noodzakelijke efficiëntie van de scheiding
- Veiligheid in gebruik van milieu (vb He = schaars en duur gas)
Het gebruikte dragergas dient hoge zuiverheid te hebben zodanig dat de stationaire fase niet wordt
aangetast
De uitgangsdruk naar het instrument (psi of bar) is belangrijk voor goede scheiding. Instellen gebeurt
aan de gasfles met de ontspanner.
Het debiet van het dragergas (flow) wordt uitgedrukt in mL/min en wordt ingesteld op het toetsel.
Optimale debiet kan bepaald worden dmv Van Deemter curve
Injectiezone:
De ingang van de kolom s afgesloten van de omgeveing door de inlet (=injectiezone). Bij elk type
injectie wordt er gebruik gemaakt van injectiespuit.
HOE MANUEEL INJECTEREN?
Injecteren een staalvolume in de orde van enkele microliters. Door klein volume is het belang om dit
correct te doen om variaties op het staalvolume te beperken
• Zuig eerst 1 à 2 microliter lucht op, vervolgens 1 microliter staal, gevolgd door opnieuw
enkele microliters lucht.
• Let erop dat je de naald goed spoelt met aceton voor-én na de injectie. Op die manier kan je
contaminatie van de oplossing waaruit je injecteert vermijden.
• Wanneer je injecteert plaats je de naald voorzichting in de injectiezone en vervolgens
beweeg je de plunjer van de spuit in een vlotte beweging naar beneden.
OPBOUW INJECTIEZONE:
De kolom is steeds afgesloten door een rubberen septum, die wordt doorgeprikt door de
injectienaald zodat het staal in de injectiezone en vervolgens in de kolom terecht komt.
Type injectiezone: split/splitless-injector
Dit type injector kan gebruikt worden in 2 modi:
• split: slechts een deel van het geïnjecteerde staal bereikt de kolom. Het grootste deel wordt
afgevoerd zodat de kolom niet overladen wordt.
• splitless: het volledige geïnjecteerde staal bereikt de kolom.
Chromatografische kolom:
Capillaire kolommen zijn meest gebruikt → heeft hoge scheidingsefficiëntie en korte retentietijden
(=kortere analysetijden)
Capillaire kolom bestaat uit drager materiaal waarop de stationaire fase uitgesmeerd is als dunne
film (=vloeistof)
