10 januari 2020
Practicum katalase
Inleiding
a. Onderzoeksvraag:
Wat is de invloed van de pH op de enzymactiviteit?
b. Hypothese:
Bij een pH-waarde wat teveel afwijkt van het pH-neutraal van 7, zal de enzymactiviteit
verminderen.
c. Voorspelling:
Als de pH-waarde teveel afwijkt van het pH-neutraal 7, zal de ontleding van waterperoxide naar
water en zuurstof slecht/minder snel verlopen.
Werkplan
a. Materiaal:
- Aardappel
- Snijplank met mes
- Waterstofperoxide (H2O2) van 3%
- Twaalf reageerbuisjes in een reageerbuisrekje
- Verdeelpipet (uitlooppipet) van 10 mL met pipethulp
- Pasteurse pipetten 3 mL
- Geodriehoek of meetlint
- Bekerglas met gedestilleerd water
- Stopwatch
- Buffers: pH = 4; pH = 5; pH = 6,5; pH = 7; pH = 8; pH = 10
b. Methode:
• Nummer de twaalf gekregen reageerbuisjes.
• Je krijgt een stukje aardappel van de docent(en), waarna je deze tot achttien kleine stukjes moet
snijden zodat deze in de reageerbuisjes passen en niet vast komen te zitten aan de bodem. Doe
telkens drie kleine stukjes in elk van de reageerbuisjes 1 t/m 6.
• Voeg aan deze zes reageerbuizen 3 mL buffer toe met de pasteurse pipet. Je begint met het
toevoegen van de buffer met de laagste pH en je voegt in elk reageerbuisje een andere buffer
toe in een oplopende pH volgorde.
• Pipeteer nu waterstofperoxide in elk van de buizen 7 t/m 12. Dit doe je door 5 mL
waterstofperoxide met de verdeelpipet te pipeteren, waarna je de pipet tegen het glas van het
reageerbuisje aanhoudt en het water laat uitlopen.
• Voordat je begint met het gieten van 5 mL waterstofperoxide vanuit de buizen 7 t/m 12 aan
reageerbuisjes 1 t/m 6, moet je je stopwatch aan de hand houden en een schrift bij je hebben
om de resultaten te noteren. Je giet 5 mL waterstofperoxide toe aan reageerbuis nummer 1 en
wacht twintig seconden voordat je verder gaat met het gieten van de volgende 5 mL aan
reageerbuis nummer 2, zodat er tijd tussen het gieten ontstaat waardoor je de resultaten goed
kunt noteren. Je kunt immers niet waterstofperoxide aan alle zes reageerbuisjes in een keer
gieten en alle resultaten goed noteren in zo'n korte tijd. Om de twintig seconden giet je dus 5
mL waterstofperoxide vanuit de buizen 7 t/m 12 toe aan de reageerbuisjes 1 t/m 6, waarna je
het mengsel mengt. Houd de tijd bij en noteer je resultaten.
• Om de 2, 5, 10, 12, 15 en 20 minuten moet je van alle buisjes een voor een het schuim
opmeten. Hierbij moet je rekening houden dat je reageerbuis nummer 2 pas op 5:20 min moet
opmeten, reageerbuis nummer 3 op 5:40 min enzovoorts. Bij elk moment dat je de
reageerbuisjes moet opmeten, maak je ook even een foto van alle reageerbuisjes naast elkaar.
Noteer je opmetingen.