Eleonoor Gholamalizad
Biomedische wetenschappen
MOLECULAIRE BIOLOGIE LES 1
(GEBRUIK CURSUS NIET POWERPOINTS)
LEVEN (wat is het?)
- Afgescheiden van hun omgeving
- Biomoleculen
- Bewegen
- Energie
- Groei (kernmerken doorgeven)
- Voorplanting
- Communicatie (ze kunnen prikkels interpreteren van andere soorten
of van hun omgeving)
Dit is allemaal aan de hand van biochemische reacties!
PROKARYOTEN IN HET LICHAAM:
De prokaryoten aanwezig in het lichaam is levensbelangrijk. Er zijn meer
prokaryoten aanwezig dan eukaryoten en ze hebben veel functies in het
lichaam:
ALKAPTONURIE:
Bij babies valt dat de urine die enige tijd aan de lucht is blootgesteld zwart
kleurt. à recessieve kenmerk.
, Eleonoor Gholamalizad
Biomedische wetenschappen
WELKE STOFFEN BEVATTEN GENETISCHE INFO:
Verschillende componenten van de cel te zuiveren à cel gehomogeniseerd
worden (verschillende componenten uit de cel in oplossing) door cel in
detergent te brengen of mechanisch te breken.
- Detergent zal celmembranen gedeeltelijk oplossen waardoor inhoud
van cel in oplossing vrijkomen.
- Mechanisch breken kan via gebruik van eenvoudige mixer of
sonicatie (hoge intensiteit ultrasoon geluid de celwanden zal
breken).
Na homogenisering: oplossing verdelen in fracties via differentiele
centrifugatie of densiteitscentrifugatie.
Centrifugatie: Als je homogenaat in profbuis zet, en laat het draaien zullen
de zwaarste componenten naar de tip van het buisje gaan (pellet).
- Differentiële centrifugatie: na homogenisering zal homogenaat door
een filter gegoten worden om grote brokstukken te verwijderen. à
gefiltreerde homogenaat om lage rotatiesnelheid gecentrifugeerd. à
grote celorganellen naar de bodem. Het supernatans (bovenste
deel) wordt overgebracht naar niewe centrifugebuis en opnieuw
gecentrifugeerd met hogere rotatiesnelheid. à stap herhalen met
hogere toerental.
- Densiteitscentrifugatie: hoge densiteit sucrose is beneden in begin.
Tijdens centrifugatie zullen de organellen naar bodem toe migreren
tot ze terecht komen in sucroseoplossing die in densiteit gelijk is aan
hun eigen densiteit.
Kan ook bekomen door homogene oplossingen van bvb CsCl lange
tijd bij hoge rotatiesnelheid te centrifugeren à CsCl naar bodem
drijven à concentratie-gradiënt ontstaat. à met deze methode kan
men zeer kleine verschillen in densiteit meten (vb verschil tussen
12C en 14C)
MOLECULAIRE BIOLOGIE LES 2
EXPERIMENT VAN GRIFFITH (Streptococcus pneumoniae):
Biomedische wetenschappen
MOLECULAIRE BIOLOGIE LES 1
(GEBRUIK CURSUS NIET POWERPOINTS)
LEVEN (wat is het?)
- Afgescheiden van hun omgeving
- Biomoleculen
- Bewegen
- Energie
- Groei (kernmerken doorgeven)
- Voorplanting
- Communicatie (ze kunnen prikkels interpreteren van andere soorten
of van hun omgeving)
Dit is allemaal aan de hand van biochemische reacties!
PROKARYOTEN IN HET LICHAAM:
De prokaryoten aanwezig in het lichaam is levensbelangrijk. Er zijn meer
prokaryoten aanwezig dan eukaryoten en ze hebben veel functies in het
lichaam:
ALKAPTONURIE:
Bij babies valt dat de urine die enige tijd aan de lucht is blootgesteld zwart
kleurt. à recessieve kenmerk.
, Eleonoor Gholamalizad
Biomedische wetenschappen
WELKE STOFFEN BEVATTEN GENETISCHE INFO:
Verschillende componenten van de cel te zuiveren à cel gehomogeniseerd
worden (verschillende componenten uit de cel in oplossing) door cel in
detergent te brengen of mechanisch te breken.
- Detergent zal celmembranen gedeeltelijk oplossen waardoor inhoud
van cel in oplossing vrijkomen.
- Mechanisch breken kan via gebruik van eenvoudige mixer of
sonicatie (hoge intensiteit ultrasoon geluid de celwanden zal
breken).
Na homogenisering: oplossing verdelen in fracties via differentiele
centrifugatie of densiteitscentrifugatie.
Centrifugatie: Als je homogenaat in profbuis zet, en laat het draaien zullen
de zwaarste componenten naar de tip van het buisje gaan (pellet).
- Differentiële centrifugatie: na homogenisering zal homogenaat door
een filter gegoten worden om grote brokstukken te verwijderen. à
gefiltreerde homogenaat om lage rotatiesnelheid gecentrifugeerd. à
grote celorganellen naar de bodem. Het supernatans (bovenste
deel) wordt overgebracht naar niewe centrifugebuis en opnieuw
gecentrifugeerd met hogere rotatiesnelheid. à stap herhalen met
hogere toerental.
- Densiteitscentrifugatie: hoge densiteit sucrose is beneden in begin.
Tijdens centrifugatie zullen de organellen naar bodem toe migreren
tot ze terecht komen in sucroseoplossing die in densiteit gelijk is aan
hun eigen densiteit.
Kan ook bekomen door homogene oplossingen van bvb CsCl lange
tijd bij hoge rotatiesnelheid te centrifugeren à CsCl naar bodem
drijven à concentratie-gradiënt ontstaat. à met deze methode kan
men zeer kleine verschillen in densiteit meten (vb verschil tussen
12C en 14C)
MOLECULAIRE BIOLOGIE LES 2
EXPERIMENT VAN GRIFFITH (Streptococcus pneumoniae):
