Primair artikel 6, Tau pathologie
Senescent cellen spelen een prominente rol in progressie van ziektes.
PS19 is een Tau afhankelijk neurodegeneratief muismodel (brengt hoge levels humaan mutant Tau
tot expressie). Dit resulteert in een pathologisch beeld met NFT aggregatie (tauopathy). Bij 6
maanden oud krijgt de muis al Tau tangles in zijn brein.
Figuur 1
A. Kwantitatieve PCR gedaan voor p16 expressie. Deze is veel hoger in de PS19 muis dan in
wildtype muizen. Dit is zowel in de hippocampus als in de cortex zo, maar in de cortex treedt
dit later op en is het minder heftig.
P16 is een cell cycle inhibitor protein en is dus een marker voor senescent cells. In PS19 heb je
dus veel P16 positieve cellen en daarmee veel senescent cells. In de extended data zie je ook
dat andere markers omhoog gaan, maar ze gebruiken voor de makkelijkheid ff p16.
B. PS19 muizen gekruisd met INK-ATTAC muizen → om cellen die P16 tot expressie brengen te
elimineren. INK ATTAC muizen hebben de P16 promotor voor caspase-FKBP gezet en zodra
deze muizen P16 tot expressie brengen wordt die dit fusie eiwit dus tot expressie gebracht
en pas als AP toegevoegd wordt, krijg je dimerisatie en wordt caspase actief → apoptose.
C. Je ziet dat het verwijderen van de senescent cellen die P16 tot expressie brengen ervoor
zorgt dat de p16 expressie ongeveer gelijk wordt aan de wildtype muizen (zowel cortex als
hippocampus). Als je AP niet toevoegt, zie je dit niet.
D. Ze wouden kijken welke cellen senescent werden dus een staining gedaan om op zoek te
gaan naar X-Gal kristallen. In alle gevallen vonden ze deze in microglia en astrocyten, maar
niet in neuronen. Bij de ATTAC muizen zonder AP zie je veel meer cellen die deze kristallen
bevatten dan normaal. Senescence komt dus met name voor in astrocyten en microglia (in
PS19 muizen.) Beta-galactosidase is een senescent marker en die kristallen zijn het gevolg
hiervan ofzoiets dergelijks dus het komt erop neer dat ze senescent cellen aankleuren.
Figuur 2
A. De controle heeft wss helemaal geen Tau omdat ze hier humaan Tau aankleuren en de
ATTAC muis heeft dat niet. Wanneer je bij de PS19-ATTAC muizen geen AP toevoegt zie je
veel totaal Tau en ook veel gefosforileerd Tau. Als de senescente cellen weggehaald worden
door toevoeging van AP, zie je nog steeds veel Tau (wantja PS19 muis), maar het wordt niet
meer zoveel gefosforileerd. Als je de senescente cellen elimineert, heb je dus veel minder
gefosforileerd Tau. Wss worden de neuronen dan ook niet meer ziek en dit kan de pathologie
dus redden (zien we verderop.)
B. Ze hebben de cortex gestaind voor phospho-Tau modificaties (bruine kleur). Bij de PS19 muis
waar geen AP is toegevoegd zie je meer P-Tau positieve cellen dan bij de rest. Je ziet bij de
Senescent cellen spelen een prominente rol in progressie van ziektes.
PS19 is een Tau afhankelijk neurodegeneratief muismodel (brengt hoge levels humaan mutant Tau
tot expressie). Dit resulteert in een pathologisch beeld met NFT aggregatie (tauopathy). Bij 6
maanden oud krijgt de muis al Tau tangles in zijn brein.
Figuur 1
A. Kwantitatieve PCR gedaan voor p16 expressie. Deze is veel hoger in de PS19 muis dan in
wildtype muizen. Dit is zowel in de hippocampus als in de cortex zo, maar in de cortex treedt
dit later op en is het minder heftig.
P16 is een cell cycle inhibitor protein en is dus een marker voor senescent cells. In PS19 heb je
dus veel P16 positieve cellen en daarmee veel senescent cells. In de extended data zie je ook
dat andere markers omhoog gaan, maar ze gebruiken voor de makkelijkheid ff p16.
B. PS19 muizen gekruisd met INK-ATTAC muizen → om cellen die P16 tot expressie brengen te
elimineren. INK ATTAC muizen hebben de P16 promotor voor caspase-FKBP gezet en zodra
deze muizen P16 tot expressie brengen wordt die dit fusie eiwit dus tot expressie gebracht
en pas als AP toegevoegd wordt, krijg je dimerisatie en wordt caspase actief → apoptose.
C. Je ziet dat het verwijderen van de senescent cellen die P16 tot expressie brengen ervoor
zorgt dat de p16 expressie ongeveer gelijk wordt aan de wildtype muizen (zowel cortex als
hippocampus). Als je AP niet toevoegt, zie je dit niet.
D. Ze wouden kijken welke cellen senescent werden dus een staining gedaan om op zoek te
gaan naar X-Gal kristallen. In alle gevallen vonden ze deze in microglia en astrocyten, maar
niet in neuronen. Bij de ATTAC muizen zonder AP zie je veel meer cellen die deze kristallen
bevatten dan normaal. Senescence komt dus met name voor in astrocyten en microglia (in
PS19 muizen.) Beta-galactosidase is een senescent marker en die kristallen zijn het gevolg
hiervan ofzoiets dergelijks dus het komt erop neer dat ze senescent cellen aankleuren.
Figuur 2
A. De controle heeft wss helemaal geen Tau omdat ze hier humaan Tau aankleuren en de
ATTAC muis heeft dat niet. Wanneer je bij de PS19-ATTAC muizen geen AP toevoegt zie je
veel totaal Tau en ook veel gefosforileerd Tau. Als de senescente cellen weggehaald worden
door toevoeging van AP, zie je nog steeds veel Tau (wantja PS19 muis), maar het wordt niet
meer zoveel gefosforileerd. Als je de senescente cellen elimineert, heb je dus veel minder
gefosforileerd Tau. Wss worden de neuronen dan ook niet meer ziek en dit kan de pathologie
dus redden (zien we verderop.)
B. Ze hebben de cortex gestaind voor phospho-Tau modificaties (bruine kleur). Bij de PS19 muis
waar geen AP is toegevoegd zie je meer P-Tau positieve cellen dan bij de rest. Je ziet bij de
