Het Michaelis-Menten model van enzymkinetiek.
Een Michaelis-Menten model is een hyperbool waarin de reactiesnelheid van een enzym tegen
de substraat concentratie wordt uitgezet. Hiermee kan de maximale snelheid berekend worden.
Om deze te meten moet de reactie aan een aantal voorwaarden voldoen:
• De enzymreactie is irreversibel, het product bindt niet aan het enzym.
• Substraat concentratie moet veel groter zijn dan de enzymconcentratie.
• Er is nog geen teruggaande reactie
De reactiesnelheid die berekend wordt is de omzetting van enzymsubstraatcomplex naar
product. Deze omzetting vindt plaats met de reactieconstante Kcat, dit is hoeveelheid moleculen
substraat die het enzym per tijdseenheid omzet (turnover number).
Als er een hele overmaat aan substraat aanwezig is zijn alle enzymen op een gegeven moment
verzadigd met substraat. De concentratie van het enzymsubstraatcomplex is dan gelijk aan de
concentratie enzymen. Onder deze omstandigheden zou de maximale snelheid bereikt worden:
V0 = Vmax = Kcat [ET]. Door deze formule om te schrijven krijg je de Michaelis-Menten vergelijking:
Vmax [S ]
v0 =
K M + [S ]
Km is de Michaelis Mente constante (k2/k1). Dit zegt iets over hoe snel het enzymsubstraat
complex gevormd wordt, dus of het enzym makkelijk of moeilijk zijn substraat kan binden.
• Km groot = weinig ES.
• Km klein = veel ES.
De Km geeft ook de substraatconcentratie waarbij de reactiesnelheid de helft is van de maximale
snelheid. (Km is dus niet de helft van de snelheid maar de substraat concentratie bij ½ max
snelheid).
Een Michaelis-Menten grafiek en een Lineweaver-Burk plot tekenen, hieruit de
KM en Vmax afleiden.
Een manier om de Michaelis-Menten vergelijking
te lineariseren is door 1/[S] uit te zetten op de x-as
tegen 1/V0 op de y-as in een zogenaamde
Lineweaver-Burk plot. De formule van deze lijn is:
Deze formule kun je zien als y = ax + b.
Aan de hand van een Lineweaver-Burk plot kan de Km en Vmax van een enzym berekend worden.
Het snijpunt met de y-as geeft 1/Vmax en het snijpunt met de x-as geeft -1/km. Hieruit kun je met
de formule de Vmax en Km berekenen.
Een Michaelis-Menten model is een hyperbool waarin de reactiesnelheid van een enzym tegen
de substraat concentratie wordt uitgezet. Hiermee kan de maximale snelheid berekend worden.
Om deze te meten moet de reactie aan een aantal voorwaarden voldoen:
• De enzymreactie is irreversibel, het product bindt niet aan het enzym.
• Substraat concentratie moet veel groter zijn dan de enzymconcentratie.
• Er is nog geen teruggaande reactie
De reactiesnelheid die berekend wordt is de omzetting van enzymsubstraatcomplex naar
product. Deze omzetting vindt plaats met de reactieconstante Kcat, dit is hoeveelheid moleculen
substraat die het enzym per tijdseenheid omzet (turnover number).
Als er een hele overmaat aan substraat aanwezig is zijn alle enzymen op een gegeven moment
verzadigd met substraat. De concentratie van het enzymsubstraatcomplex is dan gelijk aan de
concentratie enzymen. Onder deze omstandigheden zou de maximale snelheid bereikt worden:
V0 = Vmax = Kcat [ET]. Door deze formule om te schrijven krijg je de Michaelis-Menten vergelijking:
Vmax [S ]
v0 =
K M + [S ]
Km is de Michaelis Mente constante (k2/k1). Dit zegt iets over hoe snel het enzymsubstraat
complex gevormd wordt, dus of het enzym makkelijk of moeilijk zijn substraat kan binden.
• Km groot = weinig ES.
• Km klein = veel ES.
De Km geeft ook de substraatconcentratie waarbij de reactiesnelheid de helft is van de maximale
snelheid. (Km is dus niet de helft van de snelheid maar de substraat concentratie bij ½ max
snelheid).
Een Michaelis-Menten grafiek en een Lineweaver-Burk plot tekenen, hieruit de
KM en Vmax afleiden.
Een manier om de Michaelis-Menten vergelijking
te lineariseren is door 1/[S] uit te zetten op de x-as
tegen 1/V0 op de y-as in een zogenaamde
Lineweaver-Burk plot. De formule van deze lijn is:
Deze formule kun je zien als y = ax + b.
Aan de hand van een Lineweaver-Burk plot kan de Km en Vmax van een enzym berekend worden.
Het snijpunt met de y-as geeft 1/Vmax en het snijpunt met de x-as geeft -1/km. Hieruit kun je met
de formule de Vmax en Km berekenen.
