B06CIE (Celbiologie en Immunochemie Experimenteren)
Leeruitkomsten:
De student kan:
* zelfstandig bufees en pl ssingen maken en bijbeh eende beeekeningen maken en uitleggen.
* immun l gische technieken (f occt meteie, ELISA, Westeen Bl t) c eeect uitv eeen en
expeeimentele pe blemen beh eende bij deze technieken pl ssen (te ublesh tng).
* appaeatuue beh eende bij f occt meteie, ELISA, Westeen Bl t p de juiste oijze bedienen.
* veekeegen data p de juiste maniee analcseeen en inteepeeteeen.
* een labj uenaal bijh uden v lgens de eichtlijnen in de BM-oijzee.
Inh ud van de m dule
Antlichamen kunnen o eden gebeuikt m speciieke kenmeeken van cellen aan te t nen en
cellen/oeefsels te tcpeeen. Bijv ebeeld, een antlichaam dat geeicht is tegen een speciiek epit p
zal alleen maae binden aan een cel als deze k het epit p bevat (zie iguue ). Een spieecel bevat
speciieke spieeeioiten, z als mc sine. Incubate van deze cel met een antlichaam, geeicht tegen
mc sine, zal bij een spieecel binden teeoijl deze niet zal binden aan een huidcel. D e het antlichaam
een label te geven die zichtbaae gemaakt kan o eden, bijv ebeeld met behulp van een
enzcmatsche eeacte f d e emissie van licht, kan o eden bepaald f het antlichaam is geb nden
f niet.
Fig. : Gebeuik van antlichamen m cellen te selecteeen/fen tcpeeen. Antlichamen kunnen binden
aan cellen die het epit p t t expeessie beengen dat zij heekennen. Wanneee het epit p niet
aanoezig is zullen de antlichamen niet binden. D e de antlichamen (veeschillende) labels te geven
kunnen de geb nden antlichamen o eden gedetecteeed en kan ee ndeescheid gemaakt o eden
tussen veeschillende cellen.
Het eesultaat van deegelijke kleueingen zegt iets vee de expeessie van eioiten en dus vee de aaed
en de espe ng van de cel. Z zijn ee tal van speciieke antlichamen die kunnen o eden gebeuikt m
eioiten aan te t nen en cellen te fen tcpeeen en m deze te is leeen, bijv ebeeld uit bl ed.
Veeschillende technieken binnen de immun l gie maken gebeuik van antlichamen m oeefsels en
cellen te tcpeeen en eioitpe ducte aan te t nen, oaae ndee f occt meteie, ELISA en Westeen Bl t
Alle vragen mét antwoorden van praktiken:
Peaktjk
- Welke van de beschikbaee antlichamen zullen aan oelke cellen binden? Stel p basis hieevan
een hcp these p v e dit expeeiment.
Antlichaam CD3-FITC zal binden aan T-cellen, antlichaam CD 9-PE zal binden aan B-cellen.
Dus, de B-cellen zullen een gele kleue keijgen d e PE en de T-cellen zullen een ge ene kleue
keijgen d e FITC.
2- Wat zijn FITC en PE v e labels en oat is hun extncte/emissie?
Het zijn fu eescente labels, FITC heef een extncte (abs ebante) van 488nm (≈490nm) en
een emissie (uitzenden van zichtbaae licht bij kaeakteeisteke g lfengte) van 520nm
(≈525nm). PE heef een extncte van 496nm & 546nm en een emissie van 578nm (≈580nm)
3- Je maakt een 0 ml FACS-bufee, beeekening?
Leeruitkomsten:
De student kan:
* zelfstandig bufees en pl ssingen maken en bijbeh eende beeekeningen maken en uitleggen.
* immun l gische technieken (f occt meteie, ELISA, Westeen Bl t) c eeect uitv eeen en
expeeimentele pe blemen beh eende bij deze technieken pl ssen (te ublesh tng).
* appaeatuue beh eende bij f occt meteie, ELISA, Westeen Bl t p de juiste oijze bedienen.
* veekeegen data p de juiste maniee analcseeen en inteepeeteeen.
* een labj uenaal bijh uden v lgens de eichtlijnen in de BM-oijzee.
Inh ud van de m dule
Antlichamen kunnen o eden gebeuikt m speciieke kenmeeken van cellen aan te t nen en
cellen/oeefsels te tcpeeen. Bijv ebeeld, een antlichaam dat geeicht is tegen een speciiek epit p
zal alleen maae binden aan een cel als deze k het epit p bevat (zie iguue ). Een spieecel bevat
speciieke spieeeioiten, z als mc sine. Incubate van deze cel met een antlichaam, geeicht tegen
mc sine, zal bij een spieecel binden teeoijl deze niet zal binden aan een huidcel. D e het antlichaam
een label te geven die zichtbaae gemaakt kan o eden, bijv ebeeld met behulp van een
enzcmatsche eeacte f d e emissie van licht, kan o eden bepaald f het antlichaam is geb nden
f niet.
Fig. : Gebeuik van antlichamen m cellen te selecteeen/fen tcpeeen. Antlichamen kunnen binden
aan cellen die het epit p t t expeessie beengen dat zij heekennen. Wanneee het epit p niet
aanoezig is zullen de antlichamen niet binden. D e de antlichamen (veeschillende) labels te geven
kunnen de geb nden antlichamen o eden gedetecteeed en kan ee ndeescheid gemaakt o eden
tussen veeschillende cellen.
Het eesultaat van deegelijke kleueingen zegt iets vee de expeessie van eioiten en dus vee de aaed
en de espe ng van de cel. Z zijn ee tal van speciieke antlichamen die kunnen o eden gebeuikt m
eioiten aan te t nen en cellen te fen tcpeeen en m deze te is leeen, bijv ebeeld uit bl ed.
Veeschillende technieken binnen de immun l gie maken gebeuik van antlichamen m oeefsels en
cellen te tcpeeen en eioitpe ducte aan te t nen, oaae ndee f occt meteie, ELISA en Westeen Bl t
Alle vragen mét antwoorden van praktiken:
Peaktjk
- Welke van de beschikbaee antlichamen zullen aan oelke cellen binden? Stel p basis hieevan
een hcp these p v e dit expeeiment.
Antlichaam CD3-FITC zal binden aan T-cellen, antlichaam CD 9-PE zal binden aan B-cellen.
Dus, de B-cellen zullen een gele kleue keijgen d e PE en de T-cellen zullen een ge ene kleue
keijgen d e FITC.
2- Wat zijn FITC en PE v e labels en oat is hun extncte/emissie?
Het zijn fu eescente labels, FITC heef een extncte (abs ebante) van 488nm (≈490nm) en
een emissie (uitzenden van zichtbaae licht bij kaeakteeisteke g lfengte) van 520nm
(≈525nm). PE heef een extncte van 496nm & 546nm en een emissie van 578nm (≈580nm)
3- Je maakt een 0 ml FACS-bufee, beeekening?
