Voorbereiding Chemie practicum 3
Scheidingstechtnieken
Dunlaagchromatografie
= analysetechniek voor het scheiden en analyseren van componenten in een mengsel op
basis van verschil in affiniteit in stationaire fase of mobiele fase, welke in tegenstroom langs
elkaar bewegen
Stel:
Te scheiden mengsel in vaste fase. Elke component in dit mengsel heeft een affiniteit voor
elke fase. Deze zal in wisselwerking tussen beide fase meer of minder snel met in
tegenstroom bewegende fase meegesleurd worden. Zo worden de componenten uit het
mengsel van elkaar gescheiden. Deze kunnen nu kwalitatief en kwantitatief bepaald.
Voordelen:
• Weinig mengsel nodig
• Goed te onderscheiden
• Scheidingsvermogen groot
Soorten:
• Gas-chromatografie
• Vloeistof – chromatografie
• Papier – chromatografie
• Dunlaag – chromatografie
Dunlaagchromatografie
Verschillende componenten karakteriseren op een chormatogram door hun Rf -waarde
Identificatie van werkende bestanddelen in pijnstillende tabletten
Welk van deze 4 verbindingen zijn aanwezig in PERDOLAN?
Stationaire of vaste fase = silica op aluminiumplaatje
Mobiele of beweegbare fase = organisch solvent (bodempje in chromotografietankje)
onmiddellijk deksel plaatsen, atmosfeer in de tank kan nu verzadigen met dampen
• Loopvloeistof:
o Butylacetaat
o Chloroform
o Mierenzuuroplossing
1. Voorbereiding chromotografieplaatje, zacht drukken met potlood:
• Lijn met gelijke kruisjes (5x)
o 4x bekende, 1x onbekend: PERDOLAN
2. Met capilairtje een kleine hoeveelheid vloeistof opzuigen en
overbrengen op het chormotografieplaatje (loodrecht), doe dit voor
alle componenten. Let op dat de vlekjes niet te groot worden (niet overlappen!)
, Het solvent verdampt, maar de vaste stoffen blijven achter op het
plaatje, enkel zichtbaar met UV-lamp.
3. Plaatje in de tank, meteen weer afsluiten. Spotjes moeten boven het niveau van de
loopvloeistof komen
• Componenten met een hoge affiniteit voor de mobiele fase zullen mee omhoog
migreren met de mobiele fase
• Componenten met een hoge affiniteit voor de vaste fase blijven onderaan op de
vaste fase zitten
Laat de vloeistof oplopen tot 1cm van de bovenzijde van het plaatje (duurt even).
4. Neem het plaatje uit de tank en duid onmiddellijk aan met potlood tot waarde
vloeistof gelopen is (snel doen anders verdampt het solvent!)
5. Houdt het plaatje opnieuw onder de UV-lamp. Alle vlekjes zijn omhooggetrokken. Bij
de onbekende zijn er meerder vlekjes aanwezig, dit omdat het meerdere
componenten heeft. Omcirkel alle vlekjes en bereken voor iedere cirkel de R f waarde
(ook voor alle in PERDOLAN)
Rf = specifieke waarde van een
bepaalde stof afhankelijk van de
gebruikte loopvloeistof
6. Vergelijk nu de Rf - waarde van de componenten aanwezig in PERDOLAN met de Rf -
waarde van de bekende componenten en concludeer welke bekende componenten
aanwezig zijn in PERDOLAN.
Scheidingstechtnieken
Dunlaagchromatografie
= analysetechniek voor het scheiden en analyseren van componenten in een mengsel op
basis van verschil in affiniteit in stationaire fase of mobiele fase, welke in tegenstroom langs
elkaar bewegen
Stel:
Te scheiden mengsel in vaste fase. Elke component in dit mengsel heeft een affiniteit voor
elke fase. Deze zal in wisselwerking tussen beide fase meer of minder snel met in
tegenstroom bewegende fase meegesleurd worden. Zo worden de componenten uit het
mengsel van elkaar gescheiden. Deze kunnen nu kwalitatief en kwantitatief bepaald.
Voordelen:
• Weinig mengsel nodig
• Goed te onderscheiden
• Scheidingsvermogen groot
Soorten:
• Gas-chromatografie
• Vloeistof – chromatografie
• Papier – chromatografie
• Dunlaag – chromatografie
Dunlaagchromatografie
Verschillende componenten karakteriseren op een chormatogram door hun Rf -waarde
Identificatie van werkende bestanddelen in pijnstillende tabletten
Welk van deze 4 verbindingen zijn aanwezig in PERDOLAN?
Stationaire of vaste fase = silica op aluminiumplaatje
Mobiele of beweegbare fase = organisch solvent (bodempje in chromotografietankje)
onmiddellijk deksel plaatsen, atmosfeer in de tank kan nu verzadigen met dampen
• Loopvloeistof:
o Butylacetaat
o Chloroform
o Mierenzuuroplossing
1. Voorbereiding chromotografieplaatje, zacht drukken met potlood:
• Lijn met gelijke kruisjes (5x)
o 4x bekende, 1x onbekend: PERDOLAN
2. Met capilairtje een kleine hoeveelheid vloeistof opzuigen en
overbrengen op het chormotografieplaatje (loodrecht), doe dit voor
alle componenten. Let op dat de vlekjes niet te groot worden (niet overlappen!)
, Het solvent verdampt, maar de vaste stoffen blijven achter op het
plaatje, enkel zichtbaar met UV-lamp.
3. Plaatje in de tank, meteen weer afsluiten. Spotjes moeten boven het niveau van de
loopvloeistof komen
• Componenten met een hoge affiniteit voor de mobiele fase zullen mee omhoog
migreren met de mobiele fase
• Componenten met een hoge affiniteit voor de vaste fase blijven onderaan op de
vaste fase zitten
Laat de vloeistof oplopen tot 1cm van de bovenzijde van het plaatje (duurt even).
4. Neem het plaatje uit de tank en duid onmiddellijk aan met potlood tot waarde
vloeistof gelopen is (snel doen anders verdampt het solvent!)
5. Houdt het plaatje opnieuw onder de UV-lamp. Alle vlekjes zijn omhooggetrokken. Bij
de onbekende zijn er meerder vlekjes aanwezig, dit omdat het meerdere
componenten heeft. Omcirkel alle vlekjes en bereken voor iedere cirkel de R f waarde
(ook voor alle in PERDOLAN)
Rf = specifieke waarde van een
bepaalde stof afhankelijk van de
gebruikte loopvloeistof
6. Vergelijk nu de Rf - waarde van de componenten aanwezig in PERDOLAN met de Rf -
waarde van de bekende componenten en concludeer welke bekende componenten
aanwezig zijn in PERDOLAN.
