Enzymkinetiek
Initiële snelheid enzymatische reactie
Na enkele milliseconden is het enzym-substraatcomplex al gevormd
o Omzetting substraat naar product verloopt echter niet lineair met de tijd
Hoe langer de reactie aan de gang is, hoe trager de reactie zal verlopen
→ onmiddellijke snelheden bepalen
Snelheid van productvorming = rico van raaklijn aan de curve
o Daalt met de tijd door verschillende zaken
Enzym verliest activiteit bij de temperatuur en
pH van de reactie
Beduidende terugvorming van substraat uit
product bij hoge productconcentraties
Enzyme wordt geïnhibeerd door gevormde
producten
o Effecten uitsluiten door initiële snelheid van enzymatische reactie te gebruiken
Snelheid geëxtrapoleerd naar het tijdstip ≈ 0
Tijdsverloop enzymatische reactie
Steady state: vorming enzym-substraat complex = afbraak enzyme-substraat complex
o Voor steady state wordt het complex gevormd, bij steady state blijft deze constant
Verschillende effectoren van snelheid
Snelheid van enzymreactie is afhankelijk van verschillende zaken
o Enzymconcentratie
o Substraatconcentratie
o Productconcentratie
Effect van enzym concentratie
Snelheid enzymatische reactie is evenredig met enzymconcentratie → V =k [ E ]
o Hoe meer enzyme aanwezig, hoe sneller de reactie verloopt
o Verloopt lineair, indien niet: beperkingen in detectiemethode of gebruik van
onzuivere enzympreparaten
,
Initiële snelheid enzymatische reactie
Na enkele milliseconden is het enzym-substraatcomplex al gevormd
o Omzetting substraat naar product verloopt echter niet lineair met de tijd
Hoe langer de reactie aan de gang is, hoe trager de reactie zal verlopen
→ onmiddellijke snelheden bepalen
Snelheid van productvorming = rico van raaklijn aan de curve
o Daalt met de tijd door verschillende zaken
Enzym verliest activiteit bij de temperatuur en
pH van de reactie
Beduidende terugvorming van substraat uit
product bij hoge productconcentraties
Enzyme wordt geïnhibeerd door gevormde
producten
o Effecten uitsluiten door initiële snelheid van enzymatische reactie te gebruiken
Snelheid geëxtrapoleerd naar het tijdstip ≈ 0
Tijdsverloop enzymatische reactie
Steady state: vorming enzym-substraat complex = afbraak enzyme-substraat complex
o Voor steady state wordt het complex gevormd, bij steady state blijft deze constant
Verschillende effectoren van snelheid
Snelheid van enzymreactie is afhankelijk van verschillende zaken
o Enzymconcentratie
o Substraatconcentratie
o Productconcentratie
Effect van enzym concentratie
Snelheid enzymatische reactie is evenredig met enzymconcentratie → V =k [ E ]
o Hoe meer enzyme aanwezig, hoe sneller de reactie verloopt
o Verloopt lineair, indien niet: beperkingen in detectiemethode of gebruik van
onzuivere enzympreparaten
,