INSTRUMENTELE
ANALYSE
2023-2024
,DEEL 1 : Chromatografie Lowie Boels
1. Theoretische begrippen
1.1 Inleiding
Geen analytische methode is volledig specifiek
Meest gebruikte manier om stoffen te scheiden = CHROMATOGRAFIE
o Experiment uitgevonden door mikhail tswett russische wetenschapper
Scheiding van plantenextract in zijn
verschillende kleuren
Geel = carotenen
Groen = chlorofylen
o Nobelprijs gewonnen door Martin en Synge in 1952
1.2 Algemene beschrijving van chromatografie
Alle methode maken gebruik van een stationaire fase (SF) en een mobiele / loop fase (MF)
Scheiding gebeurt op basis van migratiesnelheid van de verschillende moleculen
Indeling van de chromatografische methodes
o Meest gebruikte indeling is op basis van de type MF en SF
GC de mobiele fase is
een gas
LC de mobiele fase is
een vloeistof
, DEEL 1 : Chromatografie Lowie Boels
1.3 Adsorptie vs verdelingschromatografie
1. Adsorptie
= door grondlegger Mikhail Tswett uitgevonden
Chromatografie betekent letterlijk ‘Kleuren schrijven’
Experiment
o Bereiden van extracten uit gedroogde bladeren in petroliumether
o Maken van kolom met calciumcarbonaat poeder
o Aanbrengen van extracten
o Doorspoelen met petroliumether
o Verschillende kleurstoffen bewogen aan een verschillend tempo
doorheen de kolom waardoor er scheiding van de componenten
ontstond
Als we een mengels (comp. A en comp. B) scheiden door
kolomchromatografie spreken we over ELUTIECHROMATOGRAFIE
o De opgeloste stoffen worden door de kolom gedreven / geëlueerd
Adsorptiekracht hangt af van:
o Aard van bestandsdelen
o Aard van oppervlak
o Aard van eluens
o De temperatuur
Retentietijd = tijd dat stoffen verblijven in de kolom
1.4 Verdelingschromatografie
Steunt op de verdeling van één of meerdere
Twee fasen verdeling en extractie
o Scheiding door dichtheid (bv n-butanol en water)
Deze stoffen lossen niet op in elkaar er ontstaan laagjes in de
scheitrechter
o De mate waarin de opgeloste stof zich over 2 niet-mengbare vloeistoffen
verdeelt wordt uitgedrukt door een verdelingscoëfficitent K
K = I2(org) / I2(H2O)
ANALYSE
2023-2024
,DEEL 1 : Chromatografie Lowie Boels
1. Theoretische begrippen
1.1 Inleiding
Geen analytische methode is volledig specifiek
Meest gebruikte manier om stoffen te scheiden = CHROMATOGRAFIE
o Experiment uitgevonden door mikhail tswett russische wetenschapper
Scheiding van plantenextract in zijn
verschillende kleuren
Geel = carotenen
Groen = chlorofylen
o Nobelprijs gewonnen door Martin en Synge in 1952
1.2 Algemene beschrijving van chromatografie
Alle methode maken gebruik van een stationaire fase (SF) en een mobiele / loop fase (MF)
Scheiding gebeurt op basis van migratiesnelheid van de verschillende moleculen
Indeling van de chromatografische methodes
o Meest gebruikte indeling is op basis van de type MF en SF
GC de mobiele fase is
een gas
LC de mobiele fase is
een vloeistof
, DEEL 1 : Chromatografie Lowie Boels
1.3 Adsorptie vs verdelingschromatografie
1. Adsorptie
= door grondlegger Mikhail Tswett uitgevonden
Chromatografie betekent letterlijk ‘Kleuren schrijven’
Experiment
o Bereiden van extracten uit gedroogde bladeren in petroliumether
o Maken van kolom met calciumcarbonaat poeder
o Aanbrengen van extracten
o Doorspoelen met petroliumether
o Verschillende kleurstoffen bewogen aan een verschillend tempo
doorheen de kolom waardoor er scheiding van de componenten
ontstond
Als we een mengels (comp. A en comp. B) scheiden door
kolomchromatografie spreken we over ELUTIECHROMATOGRAFIE
o De opgeloste stoffen worden door de kolom gedreven / geëlueerd
Adsorptiekracht hangt af van:
o Aard van bestandsdelen
o Aard van oppervlak
o Aard van eluens
o De temperatuur
Retentietijd = tijd dat stoffen verblijven in de kolom
1.4 Verdelingschromatografie
Steunt op de verdeling van één of meerdere
Twee fasen verdeling en extractie
o Scheiding door dichtheid (bv n-butanol en water)
Deze stoffen lossen niet op in elkaar er ontstaan laagjes in de
scheitrechter
o De mate waarin de opgeloste stof zich over 2 niet-mengbare vloeistoffen
verdeelt wordt uitgedrukt door een verdelingscoëfficitent K
K = I2(org) / I2(H2O)