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Samenvatting Biochemie (2019) met oefenvragen antwoorden huiswerkopgaven

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9
Pages
69
Publié le
08-12-2019
Écrit en
2019/2020

Samenvatting Biochemie gegeven in het jaar 2019, hierin komen de volgende onderwerpen aan bod: (polaire en apolaire) structuurformules aminozuren, zwitterion, denaturatie eiwitten, eiwit isolatie en zuivering, uitgewerkte Eiwit kwantificatie methoden: 1. UV methoden 2. Biureet methode 3. Lowry methode 4. Bradford methode 5. Andere commerciële methoden; Verder komt Eiwit electroferese, Isoelectric Focusing (IEF) , Natieve PAGE, SDS PAGE, 2D eiwit electroforese aan bod en de verschillen tussen deze 5 technieken. Verder komt nog eiwit precipitatie en hydrofobe interacties aan bod, zoals: • (Ammonium sulphate) Precipitatie • Eiwit titratie curves • Ion-Exchange Chromatography (IEC) • Hydrophobic Interaction Chromatography (HIC) • Gel Filtration Chromatography • Affinity Chromatography Ook wordt er uitleg gegeven over de verschillende eiwit isolaties die uitgevoerd kunnen worden, zoals: 1. Ion-exchange chromatography (IEC) 2. Hydrophobic interaction chromatography (HIC) 3. Gel filtration chromatography 4. Affinity chromatography Verder wordt nog het principe van de Elutie methode. Ook wordt de Western blot, de dot blotting en electro blotting uitgelegd. Last but not least, zijn er nog 51 oefenvragen aan het einde van de samenvatting die je kunt oefenen voor de toets! En zijn de huiswerkopgaven de antwoorden hiervan ook vermeld aan het einde van de samenvatting (tip: handig voor het tentamen!)

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8 décembre 2019
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Biochemie Samenvatting

Les 1
Eiwitten
• Meer dan 50% van de droge massa van de meeste cellen bestaat uit eiwit
• Eiwitten hebben een grote variatie aan (ruimtelijke) structuur ➔ grote verscheidenheid in
functies




Eiwitten zijn polypeptides
• Eiwitten zijn (onvertakte) polymeren gebouwd uit een set van 20 amino zuren
• Amino zuren zijn organische moleculen met een carboxyl en amino groep
• Amino zuren verschillen in hun eigenschappen door de verschillende zij-ketens➔ R groep




1

, • Peptide = kort aminozuur polymeer
• 2 amino zuren - dipeptide
• 3 amino zuren - tripeptide
• 12-20 amino zuren - oligopeptide
• Veel amino zuren – polypeptide
• Een eiwit bestaat uit 1 of meer polypeptiden

De 20 fundamentele amino zuren → Structuurformules herkennen !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!




Aminozuren zijn te karakteriseren op
• Synthese route
• Hydrofobiciteit
• Grootte
• Lading
• Voorkeur voor secondaire structuur
• Speciale kenmerken
→ Cysteine: vormen Cysteine bruggen
→ Proline: star / helix turn
→ Glycine: flexibel

Aminozuur synthese
• Verdeeld in structureel verwante families die meerdere biosynthese stappen delen



2

,Aminozuur als zwitterion
• Zwitterion = verbinding met zowel een positieve lading als een negatieve lading op
hetzelfde molecuul
• Aminozuren zijn ionische verbindingen
• In oplossing ladingsopbouw afhankelijk van de pH




3

, Aa 2 of meer ioniseerbare groepen → lading afh van pH
R-groep bepaald de netto lading van een eiwit
Zwitterion = dipolair ion → Kan + en – lading hebben; kan H+ opnemen en afstaan
Kation = + geladen
Anion = - geladen




Dissociatie curve van glycine (meest eenvoudige aa R=H)




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