De eiwit- en koolhydraat concentraties van het
onbekende monster n.10 zijn gelijk aan de
concentraties van cola.
Naam: Martijn van de Velde
Studentnummer: s1126165
Klas: LM1J1
Datum: 26-01-2021
Thema: BTBCH
Module: B02BCO
Docent: Hatice Dogan
, Onderzoeksvraag/doel
Het doel van dit onderzoek is het bepalen van de koolhydraat- en eiwitconcentratie van een
onbekend monster in g/100ml (deze is bewerkt door de NVWA) met behulp van DNS en BCA
reagens. De deelvragen zijn: Wat is de betrouwbaarheid van de techniek DNS en wat is de
betrouwbaarheid van de techniek BCA. Het
Hypothese
In de Modulewijzer van BCO1 staat een tabel met de concentraties eiwit en koolhydraten van
de onbekende monsters. Uit deze tabel blijkt dat dat de eiwit concentratie van het monster
tussen de 0 en 13,7 g/100ml zal liggen. Ook blijkt dat de koolhydraat concentratie tussen de
0 en 24 g/100ml zal liggen. Daarom verwacht ik dat de concentraties eiwitten en
koolhydraten van het onbekende monster tussen deze waardes zal liggen. ‘’Uit een
onderzoek van Abdul Aala Najmus Saqib en Philip John Whitney 2 blijkt dat het DNS reagens
toepasbaar is op verschillende soorten koolhydraten de onderzoeken zijn in triplo gedaan
met een standaardafwijking < 0,05 wat betekend dat de techniek betrouwbaar is’’. ‘’In de
bijsluiter van het BCA reagens3 staat dat de getoetste variatiecoëfficiënt van BCA 14,7% is dit
betekend dat ook de BCA techniek betrouwbaar is’’.
Proefopzet
De koolhydraat- en de eiwitconcentraties worden bepaald met behulp van DNS en BCA. 3,5-
dinitrosaliculzuur (DNS). DNS reageert met reducerende koolhydraten waardoor de kleur
veranderd. Met behulp van BCA kunnen eiwitten Cu 2+ reduceren tot Cu1+ hierdoor vind
kleurverandering plaats4. Van het onbekende monster worden monsters met verschillende
concentraties gemaakt. Naast deze monsters word er ook nog een glucose en een BSA
verdunningsreeks geïncubeerd met DNS of BCA reagens. Hierdoor kan de absorptie gemeten
worden m.b.v. een ELISA reader. Om de absorptie van de reagentia zonder koolhydraten en
eiwitten te meten worden er nog blanco’s meegenomen van de verdunde reagentia. Aan de
hand van de ijklijnen van de glucose en de BSA kunnen de concentratie koolhydraten en
eiwitten berekend worden.
2
onbekende monster n.10 zijn gelijk aan de
concentraties van cola.
Naam: Martijn van de Velde
Studentnummer: s1126165
Klas: LM1J1
Datum: 26-01-2021
Thema: BTBCH
Module: B02BCO
Docent: Hatice Dogan
, Onderzoeksvraag/doel
Het doel van dit onderzoek is het bepalen van de koolhydraat- en eiwitconcentratie van een
onbekend monster in g/100ml (deze is bewerkt door de NVWA) met behulp van DNS en BCA
reagens. De deelvragen zijn: Wat is de betrouwbaarheid van de techniek DNS en wat is de
betrouwbaarheid van de techniek BCA. Het
Hypothese
In de Modulewijzer van BCO1 staat een tabel met de concentraties eiwit en koolhydraten van
de onbekende monsters. Uit deze tabel blijkt dat dat de eiwit concentratie van het monster
tussen de 0 en 13,7 g/100ml zal liggen. Ook blijkt dat de koolhydraat concentratie tussen de
0 en 24 g/100ml zal liggen. Daarom verwacht ik dat de concentraties eiwitten en
koolhydraten van het onbekende monster tussen deze waardes zal liggen. ‘’Uit een
onderzoek van Abdul Aala Najmus Saqib en Philip John Whitney 2 blijkt dat het DNS reagens
toepasbaar is op verschillende soorten koolhydraten de onderzoeken zijn in triplo gedaan
met een standaardafwijking < 0,05 wat betekend dat de techniek betrouwbaar is’’. ‘’In de
bijsluiter van het BCA reagens3 staat dat de getoetste variatiecoëfficiënt van BCA 14,7% is dit
betekend dat ook de BCA techniek betrouwbaar is’’.
Proefopzet
De koolhydraat- en de eiwitconcentraties worden bepaald met behulp van DNS en BCA. 3,5-
dinitrosaliculzuur (DNS). DNS reageert met reducerende koolhydraten waardoor de kleur
veranderd. Met behulp van BCA kunnen eiwitten Cu 2+ reduceren tot Cu1+ hierdoor vind
kleurverandering plaats4. Van het onbekende monster worden monsters met verschillende
concentraties gemaakt. Naast deze monsters word er ook nog een glucose en een BSA
verdunningsreeks geïncubeerd met DNS of BCA reagens. Hierdoor kan de absorptie gemeten
worden m.b.v. een ELISA reader. Om de absorptie van de reagentia zonder koolhydraten en
eiwitten te meten worden er nog blanco’s meegenomen van de verdunde reagentia. Aan de
hand van de ijklijnen van de glucose en de BSA kunnen de concentratie koolhydraten en
eiwitten berekend worden.
2
