WC02
Werkcollege 2 van Cel tot Molecuul
Jaar 1 bachelor Diergeneeskunde, periode 1
, Buffers B 2 Werkcollege 2
WERKCOLLEGE 2: BUFFERS B
In het vorige werkcollege stond de bufferende werking van aminozuren
en eiwitten centraal. In dit werkcollege 2 gaan we kijken naar de ladings-
veranderingen die optreden in aminozuren en eiwitten als de pH
verandert.
Dat is belangrijk omdat eiwitten een karakteristiek iso-electrisch punt
(IEP) hebben, en dat is de pH waarbij de netto lading van het eiwit nul
is (dus evenveel positief als negatief geladen groepen).
Opgave 1
Hoe verandert de lading van alanine als functie van de pH? Noteer boven
de pH- schaal de totale lading van 100 moleculen alanine bij de
verschillende pH’s.
Lading 9
100 100 91 50 0 0 0 0 0 -9 -50 -91 -100
pH -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Opgave 2
Gegeven is een polypeptideketen die de volgende aminozuren bevat: 10
serines, 10 arginines, 8 alanines, 22 histidines, 2 cysteines, 27 aspartaat,
15 lysines, 2 tyrosines en 25 glutamines. De zijgroepen van de twee
cysteines vormen samen een zwavelbrug.
2a. Geef in onderstaande tabel aan hoeveel positieve of negatieve
lading elk van de groepen/aminozuren aan de lading van het eiwit
bijdraagt bij de volgende pHwaarden: pH = 1, pH = 4, pH = 6, pH = 8
en bereken vervolgens de totale netto lading van het eiwit bij de
verschillende pH-waarden. Als pK-waarde van de terminale COOH - en
NH3+ -groep kun je resp. 2 en 10 gebruiken. (Zie de tabel in opgave 2
van werkcollege 1, blz. 11). Zoals je ziet hebben we dit voor drie
aminozuren reeds gedaan.