ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE
(ESPECTROS DE ABSORCIÓN)
Daniela Guerra Ariza, Michel Tobías Orozco, Andrea Zuleta Araujo, Harold Toledo Oliveros, Luisa Martínez Cadena
Universidad popular del cesar
Valledupar, Cesar
RESUMEN permitan una determinación cualitativa y cuantitativa
de estas. Uno de los métodos más accesibles y de gran
Esta practica se basó en la obtención de la utilidad a nivel industrial es la espectrofotometría
absorbancia en dos soluciones conocidas y en visible (UV- vis).
determinar las concentraciones, examinar las La Espectrofotometría es una de las técnicas
curvas espectrales de absorción y obtener la experimentales más utilizadas para la detección
longitud de onda de máxima absorción del específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión,
dicromato de potasio y el permanganato de potasio, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta
se manejó un espectrofotómetro que nos permitió naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc.) y estado
conocer las concentraciones de nuestros analitos y el de agregación (sólido, líquido, gas). Los fundamentos
espectro de absorbancia para cada uno de ellos. físico-químicos de la espectrofotometría son
De lo cual se pudo analizar que la absorbancia es relativamente sencillos.
inversamente proporcional al aumento de la En la práctica Se analizaron dos soluciones:
longitud de onda y también nos indica que en el Permanganato de potasio (KMnO4) y Dicromato de
momento de que se aumenta la longitud de onda, el Potasio (K2Cr2O7) donde se estudiaron la absorción de
paso de la luz que permite este compuesto es mayor luz ultravioleta y visible desde 360nm. Todo esto con el
ya que en cuanto sea mayor la transmitancia, menor fin de examinar las curvas espectrales de absorción de
será el efecto de aislamiento térmico de la muestra KMnO4 y K2Cr2O7 y así mismo, obtener la longitud
que atraviesa un cuerpo en determinada cantidad de de onda de máxima absorción. Por medio de un
tiempo de la longitud de onda. espectrofotómetro, se mide primero la absorbancia del
disolvente (conocido como blanco) y al que se le asigna
Logrando concluir que El comportamiento de la el valor de cero mediante el ajuste del mando. De forma
absorbancia ocurre de manera creciente y que, la intensidad incidente y transmitida sean iguales
decreciente, ya que mientras más luz se absorbe, (Io=It) y, por lo tanto, la absorbancia es cero. A
más absorbancia absorbe el cuerpo. continuación, se pone en la celda la cubeta con la
Las curvas que observamos se caracterizan por muestra y se lee la absorbancia de las soluciones.1
aumentos y disminuciones a medida que cambian
tanto la longitud de onda como sus valores de II. MARCO TEORICO
transmitancia y absorbancia.
La espectroscopia ultravioleta-visible es un tipo de
espectroscopia de absorción en la que se ilumina una
I. INTRODUCCION muestra con rayos electromagnetismo de varias
longitudes de onda en el rango ultravioleta (UV) y
El análisis a nivel bioquímico y físico- químico de visible (VIS). Según la sustancia, la muestra absorbe
diversas moléculas requieren de técnicas analíticas que parcialmente los rayos de luz ultravioleta o visible. El
, resto de la luz, es decir, luz transmitida, se registra Materiales-reactivos
como una función de la longitud de onda mediante un
detector adecuado. El detector produce entonces el • Espectrofotómetro UV-VIS
espectro UV-VIS único de la muestra (también • Celdas porta muestras
conocido como el “espectro de absorción” )2 .
• Balones aforados 100 o 250 ml
¿QUE SON LA ABSORBANCIA Y LA • Pipeta 10ml
TRANSMITANCIA? • Agua destilada
Cuando la luz incide en un objeto, este puede • 𝐾𝑀𝑛𝑂4
absorberla, normalmente porque la longitud de onda de • 𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7
la luz absorbida corresponde a una excitación
electrónica en el objeto. El resto de la luz se transmite, Metodología
es decir, atraviesa el objeto.
1. Ajuste de las condiciones del espectrofotómetro
En un espectrofotómetro, la transmitancia se mide
diciendo el espectro de intensidad de la luz transmitida se conectó el equipo, luego se procedió a colocarlo
a través de una muestra (I0) por el espectro de a calentar, se esperó un tiempo máximo de 20 a 30
intensidad de la luz transmitida a través del blanco minutos y por último esperamos que las lámparas
(I).2 se alinearan.
Con el portacelda vacío, giramos el botón de ajuste
La absorbancia (A), también conocida como “densidad al 0 % T hasta que la escala señale ese valor. Luego
óptica” (DO), es la cantidad de luz absorbida por el Colocamos en el portacelda una celda con el
objeto y puede expresarse de la siguiente manera: solvente utilizado como blanco de reactivos y
giramos el botón hasta que la escala marque 100%
T.
𝐴 = −log (𝑇)
Transmitancia (T):
2. Preparación de las soluciones
𝐼
𝑇= ✓ Se preparó una solución al 0.1 M de KMnO4 y
𝐼0
K2Cr2O7 En un recipiente de 100ml de
volumen y está queda como nuestra solución
madre
¿QUE ES LA LEY DE BEER-LAMBERT? ✓ Una vez que se obtuvo nuestra solución madre,
La ley de Beer-Lambert establece que la cantidad de realizamos otras diluciones en la cual se toma de
energía que absorbe una solución es proporcional al la solución madre 5ml, los cuales se llevaron a
paso de luz y a la concentración. En pocas palabras, una diluirse con agua destilada en un balón aforado
solución más concentrada absorbe más luz que una de 50ml en el caso del Permanganato de potasio
diluida. (KMnO4) y del Dicromato de potasio
(K2Cr2O7) y acá obtenemos nuestras
La fórmula matemática de la ley de Beer-Lambert es: disoluciones con una concentración de 0.05M
✓ Ya después de haber obtenido la disolución al
A = ϵ.d.c 0.05M de concentración pasamos a realizar una
Donde ϵ = absortividad molar, d = paso de luz y c = disolución, en el que tomamos 5 ml de la
concentración. disolución al 0.05M y la llevamos a diluirse en
un balón aforado de 50ml en el caso del
La absortividad molar es una constante física única de permanganato de potasio (KMnO4) y en el caso
la muestra que está relacionada con la capacidad de la del dicromato de potasio en un balón aforado de
muestra de absorber luz a una determinada longitud de 25ml.
onda. ϵ presenta la unidad como L·mol-1·cm-1.2
III. MONTAJE EXPERIMETAL
(ESPECTROS DE ABSORCIÓN)
Daniela Guerra Ariza, Michel Tobías Orozco, Andrea Zuleta Araujo, Harold Toledo Oliveros, Luisa Martínez Cadena
Universidad popular del cesar
Valledupar, Cesar
RESUMEN permitan una determinación cualitativa y cuantitativa
de estas. Uno de los métodos más accesibles y de gran
Esta practica se basó en la obtención de la utilidad a nivel industrial es la espectrofotometría
absorbancia en dos soluciones conocidas y en visible (UV- vis).
determinar las concentraciones, examinar las La Espectrofotometría es una de las técnicas
curvas espectrales de absorción y obtener la experimentales más utilizadas para la detección
longitud de onda de máxima absorción del específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión,
dicromato de potasio y el permanganato de potasio, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta
se manejó un espectrofotómetro que nos permitió naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc.) y estado
conocer las concentraciones de nuestros analitos y el de agregación (sólido, líquido, gas). Los fundamentos
espectro de absorbancia para cada uno de ellos. físico-químicos de la espectrofotometría son
De lo cual se pudo analizar que la absorbancia es relativamente sencillos.
inversamente proporcional al aumento de la En la práctica Se analizaron dos soluciones:
longitud de onda y también nos indica que en el Permanganato de potasio (KMnO4) y Dicromato de
momento de que se aumenta la longitud de onda, el Potasio (K2Cr2O7) donde se estudiaron la absorción de
paso de la luz que permite este compuesto es mayor luz ultravioleta y visible desde 360nm. Todo esto con el
ya que en cuanto sea mayor la transmitancia, menor fin de examinar las curvas espectrales de absorción de
será el efecto de aislamiento térmico de la muestra KMnO4 y K2Cr2O7 y así mismo, obtener la longitud
que atraviesa un cuerpo en determinada cantidad de de onda de máxima absorción. Por medio de un
tiempo de la longitud de onda. espectrofotómetro, se mide primero la absorbancia del
disolvente (conocido como blanco) y al que se le asigna
Logrando concluir que El comportamiento de la el valor de cero mediante el ajuste del mando. De forma
absorbancia ocurre de manera creciente y que, la intensidad incidente y transmitida sean iguales
decreciente, ya que mientras más luz se absorbe, (Io=It) y, por lo tanto, la absorbancia es cero. A
más absorbancia absorbe el cuerpo. continuación, se pone en la celda la cubeta con la
Las curvas que observamos se caracterizan por muestra y se lee la absorbancia de las soluciones.1
aumentos y disminuciones a medida que cambian
tanto la longitud de onda como sus valores de II. MARCO TEORICO
transmitancia y absorbancia.
La espectroscopia ultravioleta-visible es un tipo de
espectroscopia de absorción en la que se ilumina una
I. INTRODUCCION muestra con rayos electromagnetismo de varias
longitudes de onda en el rango ultravioleta (UV) y
El análisis a nivel bioquímico y físico- químico de visible (VIS). Según la sustancia, la muestra absorbe
diversas moléculas requieren de técnicas analíticas que parcialmente los rayos de luz ultravioleta o visible. El
, resto de la luz, es decir, luz transmitida, se registra Materiales-reactivos
como una función de la longitud de onda mediante un
detector adecuado. El detector produce entonces el • Espectrofotómetro UV-VIS
espectro UV-VIS único de la muestra (también • Celdas porta muestras
conocido como el “espectro de absorción” )2 .
• Balones aforados 100 o 250 ml
¿QUE SON LA ABSORBANCIA Y LA • Pipeta 10ml
TRANSMITANCIA? • Agua destilada
Cuando la luz incide en un objeto, este puede • 𝐾𝑀𝑛𝑂4
absorberla, normalmente porque la longitud de onda de • 𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7
la luz absorbida corresponde a una excitación
electrónica en el objeto. El resto de la luz se transmite, Metodología
es decir, atraviesa el objeto.
1. Ajuste de las condiciones del espectrofotómetro
En un espectrofotómetro, la transmitancia se mide
diciendo el espectro de intensidad de la luz transmitida se conectó el equipo, luego se procedió a colocarlo
a través de una muestra (I0) por el espectro de a calentar, se esperó un tiempo máximo de 20 a 30
intensidad de la luz transmitida a través del blanco minutos y por último esperamos que las lámparas
(I).2 se alinearan.
Con el portacelda vacío, giramos el botón de ajuste
La absorbancia (A), también conocida como “densidad al 0 % T hasta que la escala señale ese valor. Luego
óptica” (DO), es la cantidad de luz absorbida por el Colocamos en el portacelda una celda con el
objeto y puede expresarse de la siguiente manera: solvente utilizado como blanco de reactivos y
giramos el botón hasta que la escala marque 100%
T.
𝐴 = −log (𝑇)
Transmitancia (T):
2. Preparación de las soluciones
𝐼
𝑇= ✓ Se preparó una solución al 0.1 M de KMnO4 y
𝐼0
K2Cr2O7 En un recipiente de 100ml de
volumen y está queda como nuestra solución
madre
¿QUE ES LA LEY DE BEER-LAMBERT? ✓ Una vez que se obtuvo nuestra solución madre,
La ley de Beer-Lambert establece que la cantidad de realizamos otras diluciones en la cual se toma de
energía que absorbe una solución es proporcional al la solución madre 5ml, los cuales se llevaron a
paso de luz y a la concentración. En pocas palabras, una diluirse con agua destilada en un balón aforado
solución más concentrada absorbe más luz que una de 50ml en el caso del Permanganato de potasio
diluida. (KMnO4) y del Dicromato de potasio
(K2Cr2O7) y acá obtenemos nuestras
La fórmula matemática de la ley de Beer-Lambert es: disoluciones con una concentración de 0.05M
✓ Ya después de haber obtenido la disolución al
A = ϵ.d.c 0.05M de concentración pasamos a realizar una
Donde ϵ = absortividad molar, d = paso de luz y c = disolución, en el que tomamos 5 ml de la
concentración. disolución al 0.05M y la llevamos a diluirse en
un balón aforado de 50ml en el caso del
La absortividad molar es una constante física única de permanganato de potasio (KMnO4) y en el caso
la muestra que está relacionada con la capacidad de la del dicromato de potasio en un balón aforado de
muestra de absorber luz a una determinada longitud de 25ml.
onda. ϵ presenta la unidad como L·mol-1·cm-1.2
III. MONTAJE EXPERIMETAL
