Biologie Gentechnik Klasse 12
Gentechnik
PCR-Methode (Polymerase Chain Reaction)
• DNA-Fragmente vervielfältigen
“Zutaten”
o DNA-Fragment
o Nukleotide
o Hitzestabile DNA-Polymerase
o Primer
o Puffer Lösung
Schritt 1: Denaturierung
• Erhitzen (94-96°C)
• H-Brücken zwischen DNA-Doppelstrang nicht hitzeresistent
Schritt 2: Primer Hybridisierung
• Schnelles Abkühlen (50-65°C)
• Primer binden komplementär an Einzelstränge
Schritt 3: Polymerisieren
• Erhitzen auf ca. 72°C
• DNA-Polymerase setzt beim Primer an und kopiert die Einzelstränge
Schritt 1-3 wird wiederholt, bis das DNA-Fragment in genügender Konzentration
vorhanden ist
Gel-Elektrophorese
Ablauf
• DNA-Proben werden in Geltaschen bei
der Kathode gegeben
• Ein elektrisches Feld wird erzeugt
• DNA leicht negativ geladen daher wird
es durch das Gel in Richtung der
Anode wandern
• Leichte DNA-Fragmente wandern
weiter als schwere
• Nach bestimmter Zeit wird der Strom
abgestellt
• Bandenmuster ist entstanden
• Zum vergleich benutzt man einen
Marker, dessen Bandenmuster genau
definiert ist
1
Silke Redecker
Gentechnik
PCR-Methode (Polymerase Chain Reaction)
• DNA-Fragmente vervielfältigen
“Zutaten”
o DNA-Fragment
o Nukleotide
o Hitzestabile DNA-Polymerase
o Primer
o Puffer Lösung
Schritt 1: Denaturierung
• Erhitzen (94-96°C)
• H-Brücken zwischen DNA-Doppelstrang nicht hitzeresistent
Schritt 2: Primer Hybridisierung
• Schnelles Abkühlen (50-65°C)
• Primer binden komplementär an Einzelstränge
Schritt 3: Polymerisieren
• Erhitzen auf ca. 72°C
• DNA-Polymerase setzt beim Primer an und kopiert die Einzelstränge
Schritt 1-3 wird wiederholt, bis das DNA-Fragment in genügender Konzentration
vorhanden ist
Gel-Elektrophorese
Ablauf
• DNA-Proben werden in Geltaschen bei
der Kathode gegeben
• Ein elektrisches Feld wird erzeugt
• DNA leicht negativ geladen daher wird
es durch das Gel in Richtung der
Anode wandern
• Leichte DNA-Fragmente wandern
weiter als schwere
• Nach bestimmter Zeit wird der Strom
abgestellt
• Bandenmuster ist entstanden
• Zum vergleich benutzt man einen
Marker, dessen Bandenmuster genau
definiert ist
1
Silke Redecker
