Samenvatting microbiologie practica
Arbeidstechnieken
Kleuren van MO opslag kleurstof in/op celwand:
- Cellen en bijzondere morfologische kenmerken duidelijk zichtbaar maken
Inwerking beïnvloedt door:
- Tijd: hoe langer, hoe intenser
- Concentratie: hoe hoger, hoe intenser
- Temp: hoe hoger, hoe intenser
warm kleuren: brug van Malassez
- Beitsmiddelen:
echte: vormen intermediaire brug tssn substraat en kleurstof (vb. jood)
onechte: verhogen natuurlijke kleurbaarheid (vb. fenol)
- Ontkleuringsmiddelen: ethanol, aceton, water, …
echte/vaste kleuring: spoelmiddel wast kleurstof niet weg
losse kleuring: spoelmiddel wast kleurstof weg
Fixeren: omdat levende cellen moeilijk te kleuren zijn:
- Cellen snel doden
- Cellen aan objectglas laten kleven
- Preparaat goed kleurbaar maken
Droge warmte inwerking chemische stof ( vermengen fixeermiddel en kleuring)
Bereiden kleurstofoplossing: verzadigde oplossing = 5g poeder opgelost in 95ml ethanol 96%
Sterilisatie: hete lucht/stoom/filtratie/bestraling, gasinwerking/inwerking chemische stoffen
- Resistente sporenvormers: 1 uur bij 160°C
- Materialen met geringe dikte: 2 uur bij 160°C of 1 uur bij 170°C
- Flamberen van entnaalden: 10-15 sec
- Afbranden met alcohol dood geen sporenvormers
- Vochtige sterilisatie: bij vloeistoffen, voedingsbodems: 15-20 min bij 120°C en 1atm
De lichtmicroscoop
Optisch gedeelte = oculairen + objectieven + condensor + diafragma (licht centreren) + licht
Mechanische gedeelte = voet + tubus + revolver + objecttafel
Totale vergroting = oculair X objectief (vb. 10X100X)
Virussen: 40 – 80 nm
Bacteriën: 2-3 µm
Gistcellen: 7 µm
Eukaryote cellen: 7-100 µm
Condensor: concentreert stralen
door lichtbreking
Iris-diafragma: opening
lichtbron wijzigen
Blauwfilter: verandert
kunstlicht in daglicht
Arbeidstechnieken
Kleuren van MO opslag kleurstof in/op celwand:
- Cellen en bijzondere morfologische kenmerken duidelijk zichtbaar maken
Inwerking beïnvloedt door:
- Tijd: hoe langer, hoe intenser
- Concentratie: hoe hoger, hoe intenser
- Temp: hoe hoger, hoe intenser
warm kleuren: brug van Malassez
- Beitsmiddelen:
echte: vormen intermediaire brug tssn substraat en kleurstof (vb. jood)
onechte: verhogen natuurlijke kleurbaarheid (vb. fenol)
- Ontkleuringsmiddelen: ethanol, aceton, water, …
echte/vaste kleuring: spoelmiddel wast kleurstof niet weg
losse kleuring: spoelmiddel wast kleurstof weg
Fixeren: omdat levende cellen moeilijk te kleuren zijn:
- Cellen snel doden
- Cellen aan objectglas laten kleven
- Preparaat goed kleurbaar maken
Droge warmte inwerking chemische stof ( vermengen fixeermiddel en kleuring)
Bereiden kleurstofoplossing: verzadigde oplossing = 5g poeder opgelost in 95ml ethanol 96%
Sterilisatie: hete lucht/stoom/filtratie/bestraling, gasinwerking/inwerking chemische stoffen
- Resistente sporenvormers: 1 uur bij 160°C
- Materialen met geringe dikte: 2 uur bij 160°C of 1 uur bij 170°C
- Flamberen van entnaalden: 10-15 sec
- Afbranden met alcohol dood geen sporenvormers
- Vochtige sterilisatie: bij vloeistoffen, voedingsbodems: 15-20 min bij 120°C en 1atm
De lichtmicroscoop
Optisch gedeelte = oculairen + objectieven + condensor + diafragma (licht centreren) + licht
Mechanische gedeelte = voet + tubus + revolver + objecttafel
Totale vergroting = oculair X objectief (vb. 10X100X)
Virussen: 40 – 80 nm
Bacteriën: 2-3 µm
Gistcellen: 7 µm
Eukaryote cellen: 7-100 µm
Condensor: concentreert stralen
door lichtbreking
Iris-diafragma: opening
lichtbron wijzigen
Blauwfilter: verandert
kunstlicht in daglicht
