H2: DNA REPLICATIE
Bacterie E. Coli bevat een circulair DNA molecule van 4,5 miljoen basenparen
Diploïde mensencel: 6,6 miljard basenparen
Replicatie = kopiëren van DNA; moet zeer snel en correct verlopen
2.1 REPLICATIE IS SEMI-CONSERVATIEF
O.b.v. de sequentie (basenvolgorde) van 1 streng kan de sequentie v/d andere streng
voorspeld worden (complementair)
3 mogelijkheden om DNA te repliceren:
- Semi-conservatieve replicatie = 1 streng wordt doorgegeven (half-behoudend)
Watson en Crick: tijdens de replicatie gaan de 2 strengen uit elkaar en wordt er
een nieuwe 2de complementaire streng gemaakt o.b.v. de sequentie v/d
oorspronkelijke streng dochtercellen krijgen DNA waarvan 1 streng afkomstig is
v/h DNA v/d moedercel en 1 streng nieuw aangemaakt wordt
Meselson & Stahl : densiteitscentrifugatie
1) E. Coli (14N)
2) E. Coli (15N) zitten lager door hogere densiteit
3) E. Coli 15N 14N (tss. DNA met 14N en 15N)
, 4) “ 2x (na 2 generaties): DNA komt voor in 2 ≠ densiteiten replicatie = semi-
conservatief
1 2 3 4
14
N DNA enkel 14
N
15
N DNA 50/50
2.2 DE DNA POLYMERASEN
enzymes die DNA maken met dNTPs als substraat
DNA pol:
- Substraat = dNTPs
- 5’ 3’ pol: 5’ uiteinde v/h dNTP wordt verbonden met de 3’OH v/d DNA keten
- 3’ OH nodig
- Proofreading (=nalezen) fouten reduceren
3’ 5’ exo (langs buitenkant)
Structuur dNTPs (de base rechtsboven in de structuur kan A, G, C of T zijn)
Bacterie E. Coli bevat een circulair DNA molecule van 4,5 miljoen basenparen
Diploïde mensencel: 6,6 miljard basenparen
Replicatie = kopiëren van DNA; moet zeer snel en correct verlopen
2.1 REPLICATIE IS SEMI-CONSERVATIEF
O.b.v. de sequentie (basenvolgorde) van 1 streng kan de sequentie v/d andere streng
voorspeld worden (complementair)
3 mogelijkheden om DNA te repliceren:
- Semi-conservatieve replicatie = 1 streng wordt doorgegeven (half-behoudend)
Watson en Crick: tijdens de replicatie gaan de 2 strengen uit elkaar en wordt er
een nieuwe 2de complementaire streng gemaakt o.b.v. de sequentie v/d
oorspronkelijke streng dochtercellen krijgen DNA waarvan 1 streng afkomstig is
v/h DNA v/d moedercel en 1 streng nieuw aangemaakt wordt
Meselson & Stahl : densiteitscentrifugatie
1) E. Coli (14N)
2) E. Coli (15N) zitten lager door hogere densiteit
3) E. Coli 15N 14N (tss. DNA met 14N en 15N)
, 4) “ 2x (na 2 generaties): DNA komt voor in 2 ≠ densiteiten replicatie = semi-
conservatief
1 2 3 4
14
N DNA enkel 14
N
15
N DNA 50/50
2.2 DE DNA POLYMERASEN
enzymes die DNA maken met dNTPs als substraat
DNA pol:
- Substraat = dNTPs
- 5’ 3’ pol: 5’ uiteinde v/h dNTP wordt verbonden met de 3’OH v/d DNA keten
- 3’ OH nodig
- Proofreading (=nalezen) fouten reduceren
3’ 5’ exo (langs buitenkant)
Structuur dNTPs (de base rechtsboven in de structuur kan A, G, C of T zijn)