Les 1: inleiding, staalafname en microscopie
Hoofdstuk 1. Medische microbiologie
- Commensalen= mee-eters geen last van bacterie op huid
- Transiënte flora= omgevingsorganismen in normale omstandigheden
geen schade
- Pathogenen= brengt schade aan mens
- VIRULENTIEFACTOR= maat/ graad van pathogeniciteit= hoeveel
bacteriën nodig om zelfde effect uit te lokken
- Opportunistische pathogenen= in normale omstandigheden niet
schadelijk, bij verzwakte afweer gedragen ze zich als pathogenen
Soorten pathogenen:
a. Virussen
b. Bacteriën AB
c. Fungi (gisten & schimmels)
d. Parasieten ééncelligen (protozoa) OF meercelligen (wormen)
BACTERIOLOGIE:
Kenmerken:
- Ééncellige orgenisme zonder celkern (= prokaryoot)
- Chromosomaal DNA
Extrachromosomaal DNA in plasmiden genetische info!
Conjugatie! = onderling plasmiden uitwisselen
- Overal aanwezig
Teken prokaryote cel
1
Student: Janne Weyers
Prof: Dr. M. Depypere en Dr. S. Ombelet
,Hoofdstuk 2. Pathologische specimens
Wat is een geschikt microbiologisch staal?
I. Pre-pre-analyse
Test aanvragen via aanvraagformulier
Info patiënt
Soort specimen en plaats afname, datum en uur
Gevraagde onderzoeken
Vermoedelijke diagnose/ klinische info
II. Pre-analyse
Staalafname en transport
Staalvereisten
Staal etikettering
Staal transport
Wissers, spuit, steriele recipiënten, voedingsbodems
III. Analyse
IV. Post-analyse
V. Post-post-analyse
Staal transport:
Wissers:
- Slijmvliezen en wonden
- Nadelen:
Weinig afgave materiaal NIEUW: flocked swab heeft
betere afgifte vd bacterie
Bacteriën sterven snel af op watten door uitdroging, oxidatie,…
- Met transportbodem in
= amies-transportbodem
Halfvast, geen voedende bestanddelen, thioglycolaat, houtskool
(toxische stoffen in katoen neutraliseren)
Voor delicate kiemen: Helicobacter pylori
- UTM (universeel transport medium)
Glass beads om viruspartikels vrij te maken
AB om bepaalde bact te inhiberen
Behoud 48u
Naald & spuit:
- Etter en vloeistoffen
- Beste voor puntievochten en gesloten etters
- Lucht uit spuit voor anaërobe bact
- Naald verwijderen + steriel kapje!
Steriele recipiënten:
- Vloeistoffen, weefselstukken, …
2
Student: Janne Weyers
Prof: Dr. M. Depypere en Dr. S. Ombelet
, - Lumbaal vocht in steriele buis!
- Faeces in potje met lepeltje
Voedingsbodems:
- Hemocultuurflessen
Bloed
Gewrichtsvochten
- Corneaschraapsel voor Acanthamoeba rechtstreeks op specifieke bodem
met E. coli
Transportomstandigheden:
Zo snel mogelijk
Leefbaarheid, overgroei voorkomen, klinische onbelangrijke aantallen
voorkomen, virussen: afbraak RNA voorkomen
In afwachting: koel bewaren (uitzonderingen!)
Neisseria meningitidis sterft bij kou
Soorten microbiologische stalen:
Bloed, punctievochten, cerebrospinaal vocht, weefselmateriaal, etter/ wondvocht/
klierpunctievocht, keel en neusspecimens, onderste luchtwegen, urine, faeces
1) HEMOCULTUUR
Bloed niet steriel= ernstige infectie!!
Steriel mogelijke afname, anders huidcommensalen in hemocultuurfles
Kritische factor van hoeveelheid afgenomen bloed:
4 flessen afnemen, 10 ml per fles
Kinderen hebben meer kiemen per ml
Afname VOOR toediening AB
Beste afnamemoment: begin koortsopstoot
Endocarditis (= ontsteking hartklep) afname op meerdere tijdstippen
patiënt kan snel sterven
Bij kinderen geen onderzoek op anaëroben = pediatrie fles=
aerobe fles
Aeroob/ anaeroob:
Zelfde matrix, maar anaeroob is onder vacuüm
+ resine korrels om AB te capteren zodat bacterie die aanwezig is nog
kan groeien
Technologie:
3
Student: Janne Weyers
Prof: Dr. M. Depypere en Dr. S. Ombelet
, Groei & chemie
Organsime groeit in media en produceerd CO2
CO2 productie= lagere pH sensor wordt geel = bacterie
aanwezig
Flessensor
Silicone met kleurstof (gevoelig voor wijziging pH)
Continu verandering in kleur
2) PUNCTIEVLEOISTOFFEN
In virtuele holten
Ontsteking vasodilatatie (verwijden) exsudaat (= vl die uit
vaatstelsel van organisme lekt)
Strikte asepsis!! Geen contaminatie
Inflammatie= ontsteking NIET hetzelfde als infectie
Inflammatie is een weefselreactie op een beschadiging
Een beschadiging KAN infectieus zijn, maar niet altijd zo
3) LUMBAAL VOCHT
Normaal steriel en helder, bevat geen cellen
Bacteriële meningitis= infectie hersenvliezen aanwezigheid van
bacteriën & talrijke WBC (daarom LV troebel bij infectie)
Strikte asepsis!!
2-3 ml afnemen
4) WEEFSELMATERIAAL
Biopsie
Vochtig transporteren soms met parels zetten bacteriën vrij uit
weefsel
Labo:
Homogenisatie
Op agar
Op bouillon
5) ETTER, WONDVOCHT, PUNCTIEVOCHT
a. Etter= pus= vormt zich door ontstekingsreactie, bestaat uit plasma,
fagocyten, m.m., celdebris
b. Abces= afgesloten etter-ophoping in diepte weefsel
Kan spontaan openbreken via fistel fistelopening
ontsmetten en etter opzuigen
Kan heelkundig w opengesneden steriel spuit en naald
Lucht uit spuit!! Anaëroben!
4
Student: Janne Weyers
Prof: Dr. M. Depypere en Dr. S. Ombelet