Histologie
1 – 1ste Bachelor Biomedische Wetenschappen 2025-
Deel 1: Microscopische
technieken
Afl ezen & berekenen
(…X) -> vergroting
(NA) -> numerieke aperatuur, het zegt iets over de globale
resolutie van de lens, hoe hoger de NA hoe beter de resolutie
Formule resolutie van microscoop:
R: resolutie
NA: numerieke apertuur van de
objectieflens
Formule Numerieke apertuur:
n: brekingsindex van het medium
µ: de halve tophoek van de apertuurkegel
Voorbereiding preparaten
Voor de kleuring van preparaten worden een tiental kleuringen gebruikt,
een veelvuldig gebruikte overzichtskleuring is de hematoxyline/ eosine-
kleuring (HE-kleuring). De HE-kleuring is een combinatie van 2
kleurstoffen:
- Hematoxyline; dit is een basische kleurstof die bekend staat voor
zijn affiniteit voor zuur materiaal in het weefsel, dit zal onder andere
de celkernen kleuren
- Eosine; dit is een zure kleurstof die zich zal binden aan basische
bestanddelen
, Histologie
2 – 1ste Bachelor Biomedische Wetenschappen 2025-
Veel gebruikte microscopische technieken als
aanvulling op de lichtmicroscopie met doorvallende
belichting
Fasecontrastmicroscoop
Het zet faseverschillen in licht om naar kunstmatige
helderheidsverschillen, waardoor transparante structuren zonder kleuring
zichtbaar worden. Dit maakt het mogelijk om de geometrische vorm &
fijne details van objecten, zoals levende cellen, duidelijk waar te nemen.
Dit is nuttig voor het bekijken van levende cellen, aangezien een aantal
kleurstoffen cytotoxische eigenschappen hebben & de cellen den
beschadigd kunnen worden.
Donkerveldmicroscoop
Het verlicht het object met een holle kegel van licht, zonder dat direct licht
in het objectief valt. Hierdoor blijft de achtergrond donker & worden alleen
verstrooide of afgebogen lichtstralen zichtbaar, wat zorgt voor een hoog
contrast.
Dit is nuttig voor het waarnemen van transparante structuren & levende
micro-organismen zonder kleuring. Voor zwakke verstrooiing worden
speciale condensoren & een sterke lichtbron gebruikt.
Polarisatiemicroscoop
Het maakt gebruikt van gekruiste polarisatoren om materialen met
repeterende structuren zichtbaar te maken. Normale biologische
preparaten blijven donker, maar structuren zoals skeletspiervezels of
kristallen lichten op door variaties in lichtdoorlating.
Deze techniek is voor nuttig in mineralogie & geologie voor het bestuderen
van kristallen, zowel kleurloos als gekleurd. In de biomedische wetenschap
heeft polarisatiemicroscopie een beperktere toepassing, bijvoorbeeld voor
het analyseren van spierweefsel.
Differentiaal-inferentie-contrast (DIC)
Het wordt net zo gebruikt als fasecontrast, maar is effectiever bij wat
dikkere preparaten & bij grotere brekingsindexverschillen in het preparaat.
Bij DIC maken we gebruik van principes uit de polarisatiemicroscopie voor
de contrastering van faseobjecten.
1 – 1ste Bachelor Biomedische Wetenschappen 2025-
Deel 1: Microscopische
technieken
Afl ezen & berekenen
(…X) -> vergroting
(NA) -> numerieke aperatuur, het zegt iets over de globale
resolutie van de lens, hoe hoger de NA hoe beter de resolutie
Formule resolutie van microscoop:
R: resolutie
NA: numerieke apertuur van de
objectieflens
Formule Numerieke apertuur:
n: brekingsindex van het medium
µ: de halve tophoek van de apertuurkegel
Voorbereiding preparaten
Voor de kleuring van preparaten worden een tiental kleuringen gebruikt,
een veelvuldig gebruikte overzichtskleuring is de hematoxyline/ eosine-
kleuring (HE-kleuring). De HE-kleuring is een combinatie van 2
kleurstoffen:
- Hematoxyline; dit is een basische kleurstof die bekend staat voor
zijn affiniteit voor zuur materiaal in het weefsel, dit zal onder andere
de celkernen kleuren
- Eosine; dit is een zure kleurstof die zich zal binden aan basische
bestanddelen
, Histologie
2 – 1ste Bachelor Biomedische Wetenschappen 2025-
Veel gebruikte microscopische technieken als
aanvulling op de lichtmicroscopie met doorvallende
belichting
Fasecontrastmicroscoop
Het zet faseverschillen in licht om naar kunstmatige
helderheidsverschillen, waardoor transparante structuren zonder kleuring
zichtbaar worden. Dit maakt het mogelijk om de geometrische vorm &
fijne details van objecten, zoals levende cellen, duidelijk waar te nemen.
Dit is nuttig voor het bekijken van levende cellen, aangezien een aantal
kleurstoffen cytotoxische eigenschappen hebben & de cellen den
beschadigd kunnen worden.
Donkerveldmicroscoop
Het verlicht het object met een holle kegel van licht, zonder dat direct licht
in het objectief valt. Hierdoor blijft de achtergrond donker & worden alleen
verstrooide of afgebogen lichtstralen zichtbaar, wat zorgt voor een hoog
contrast.
Dit is nuttig voor het waarnemen van transparante structuren & levende
micro-organismen zonder kleuring. Voor zwakke verstrooiing worden
speciale condensoren & een sterke lichtbron gebruikt.
Polarisatiemicroscoop
Het maakt gebruikt van gekruiste polarisatoren om materialen met
repeterende structuren zichtbaar te maken. Normale biologische
preparaten blijven donker, maar structuren zoals skeletspiervezels of
kristallen lichten op door variaties in lichtdoorlating.
Deze techniek is voor nuttig in mineralogie & geologie voor het bestuderen
van kristallen, zowel kleurloos als gekleurd. In de biomedische wetenschap
heeft polarisatiemicroscopie een beperktere toepassing, bijvoorbeeld voor
het analyseren van spierweefsel.
Differentiaal-inferentie-contrast (DIC)
Het wordt net zo gebruikt als fasecontrast, maar is effectiever bij wat
dikkere preparaten & bij grotere brekingsindexverschillen in het preparaat.
Bij DIC maken we gebruik van principes uit de polarisatiemicroscopie voor
de contrastering van faseobjecten.
