Analyseplan
Inleiding van dit Voorbeeld analyseplan
Analyseplan voor de gehaltebepaling van
riboflavinecapsules
Inleiding
Capsules moeten voldoen aan de Uniformity of Content-eis volgens
de Europese Farmacopee (AV ≤ 15). Riboflavine bevat een aniline-,
carbonzuur- en sulfonamidegroep, wat invloed heeft op de
oplosbaarheid en het UV/Vis-absorptiespectrum. Het is slecht
oplosbaar in water, maar lost beter op in zure of basische
omstandigheden, waarbij het absorptiemaxima vertoont afhankelijk
van de pH.
Doel van de analyse
Het doel is om te bepalen of de riboflavinecapsules de juiste
hoeveelheid werkzame stof bevatten en of de verdeling homogeen
is. UV/Vis-spectrofotometrie wordt gebruikt om het gehalte te
kwantificeren.
1. Waarom is gehaltebepaling nodig?
• Om te controleren of de capsules de juiste hoeveelheid
riboflavine bevatten.
• Om te waarborgen dat de capsules uniform zijn samengesteld
– nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid stel je vast met de
standaarddeviatie.
• Om te voldoen aan de eisen van de Europese Farmacopee.
2. Welke meetcontrolecriteria stel ik in en waarom?
• Juistheid: Vergelijken van de meetwaarden met
standaardoplossingen.
• Precisie: Minstens drie herhaalde metingen per monster.
• Specificiteit: Meting bij meerdere pH-waarden om te bepalen
of hulpstoffen invloed hebben.
, 3. Welk oplosmiddel kies ik en waarom?
Riboflavine is slecht oplosbaar in water, maar heeft verschillende
absorptiemaxima afhankelijk van de pH:
Je hebt NaOH daar deprotoneert het en is de oplosbaarheid beter
Gezien de hoge extinctiecoëfficiënt bij 235 en 274 nm in zuur wordt
0,1 M NaOH als oplosmiddel gekozen voor een stabiele en
reproduceerbare meting.
4. Storende stoffen aanwezig? Zo ja, hoe ga je
daarmee om?
Microkristallijne cellulose en andere hulpstoffen absorberen niet
significant in het UV-bereik, dus ze hebben geen invloed.
Microkristallijn cellulose stoort niet, bij storende componenten
gebruik je HPLC.
5. Hoe ga je verdunnen? Welke maatkolven en
pipetten gebruik je?
• 4 Capsules worden geopend en de inhoud wordt opgelost in 50
mL 0,1 M NaOH.
Bij imide is je base geen base maar een zuur
• Een verdere verdunning wordt gemaakt met een 10 mL
maatkolf en een micropipet om een geschikte concentratie te
verkrijgen.
6. Met welke golflengte ga je meten?
De absorptie wordt gemeten bij 446 nm (A = 410a) in zuur, omdat
dit een goede extinctiecoëfficiënt biedt en weinig interferentie
verwacht wordt.
7. Blanco nodig voor baseline? Zo ja, wat neem je als
blanco?
Ja, de blanco is 0,1 M NaOH, zodat achtergrondabsorptie wordt
gecorrigeerd.
8. Hoeveel UV/Vis-metingen per monster/standaard?
• twee herhaalde metingen als daarvoor tijd is .
Inleiding van dit Voorbeeld analyseplan
Analyseplan voor de gehaltebepaling van
riboflavinecapsules
Inleiding
Capsules moeten voldoen aan de Uniformity of Content-eis volgens
de Europese Farmacopee (AV ≤ 15). Riboflavine bevat een aniline-,
carbonzuur- en sulfonamidegroep, wat invloed heeft op de
oplosbaarheid en het UV/Vis-absorptiespectrum. Het is slecht
oplosbaar in water, maar lost beter op in zure of basische
omstandigheden, waarbij het absorptiemaxima vertoont afhankelijk
van de pH.
Doel van de analyse
Het doel is om te bepalen of de riboflavinecapsules de juiste
hoeveelheid werkzame stof bevatten en of de verdeling homogeen
is. UV/Vis-spectrofotometrie wordt gebruikt om het gehalte te
kwantificeren.
1. Waarom is gehaltebepaling nodig?
• Om te controleren of de capsules de juiste hoeveelheid
riboflavine bevatten.
• Om te waarborgen dat de capsules uniform zijn samengesteld
– nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid stel je vast met de
standaarddeviatie.
• Om te voldoen aan de eisen van de Europese Farmacopee.
2. Welke meetcontrolecriteria stel ik in en waarom?
• Juistheid: Vergelijken van de meetwaarden met
standaardoplossingen.
• Precisie: Minstens drie herhaalde metingen per monster.
• Specificiteit: Meting bij meerdere pH-waarden om te bepalen
of hulpstoffen invloed hebben.
, 3. Welk oplosmiddel kies ik en waarom?
Riboflavine is slecht oplosbaar in water, maar heeft verschillende
absorptiemaxima afhankelijk van de pH:
Je hebt NaOH daar deprotoneert het en is de oplosbaarheid beter
Gezien de hoge extinctiecoëfficiënt bij 235 en 274 nm in zuur wordt
0,1 M NaOH als oplosmiddel gekozen voor een stabiele en
reproduceerbare meting.
4. Storende stoffen aanwezig? Zo ja, hoe ga je
daarmee om?
Microkristallijne cellulose en andere hulpstoffen absorberen niet
significant in het UV-bereik, dus ze hebben geen invloed.
Microkristallijn cellulose stoort niet, bij storende componenten
gebruik je HPLC.
5. Hoe ga je verdunnen? Welke maatkolven en
pipetten gebruik je?
• 4 Capsules worden geopend en de inhoud wordt opgelost in 50
mL 0,1 M NaOH.
Bij imide is je base geen base maar een zuur
• Een verdere verdunning wordt gemaakt met een 10 mL
maatkolf en een micropipet om een geschikte concentratie te
verkrijgen.
6. Met welke golflengte ga je meten?
De absorptie wordt gemeten bij 446 nm (A = 410a) in zuur, omdat
dit een goede extinctiecoëfficiënt biedt en weinig interferentie
verwacht wordt.
7. Blanco nodig voor baseline? Zo ja, wat neem je als
blanco?
Ja, de blanco is 0,1 M NaOH, zodat achtergrondabsorptie wordt
gecorrigeerd.
8. Hoeveel UV/Vis-metingen per monster/standaard?
• twee herhaalde metingen als daarvoor tijd is .
