SAMENVATTING HOOFDSTUK 7: CELL STRUCTURE AND
FUNCTION
Concept 7.1
3 aspecten zijn belangrijk bij microscopie:
● Vergroting
○ Ratio tussen de echte grootte en die van het beeld
● Resolutie (oplossend vermogen)
○ Scherpte
○ Minimum afstand tussen 2 punten die los van elkaar gezien kunnen worden
● Contrast
○ Zichtbare verschillen in helderheid tussen verschillende structuren
Verschillende microscopen:
Licht microscopie
● Brightfield (helderveld) microscoop
○ Ongekleurd / gekleurd
● Fase contrast
○ Verschillen in dichtheid → verschillen in contrast
● Differentieel interferentie contrast (Nomarski)
○ 3D weergave
● Fluorescentie microscoop
○ Met gebruik van fluorescente markers
● Confocale microscoop
○ Gebruik van laser ipv lamp
○ Optische coupe (plakje)
● Deconvolutie
○ Meerdere optische coupes maken
○ Digitaal uit-focus licht verwijderen
● Super-resolutie microscoop
○ Individuele fluorescente moleculen weergeven
Elektronenmicroscopie (cellen gaan dood)
● Scanning EM
○ Oppervlakte weergeven
● Transmissie EM
○ Coupe
1
, Cel fractionering: scheiden van onderdelen van de cel
Stappen:
1. Homogeniseren
2. Differentieel centrifugeren (steeds harder)
● Scheiden op basis van grootte:
○ Kernen
○ Mitochondria
○ Microsomen
○ Ribosomen
Gebruik: bijvoorbeeld onderzoeken of bepaalde eiwitten in een bepaald organel voorkomen
2
FUNCTION
Concept 7.1
3 aspecten zijn belangrijk bij microscopie:
● Vergroting
○ Ratio tussen de echte grootte en die van het beeld
● Resolutie (oplossend vermogen)
○ Scherpte
○ Minimum afstand tussen 2 punten die los van elkaar gezien kunnen worden
● Contrast
○ Zichtbare verschillen in helderheid tussen verschillende structuren
Verschillende microscopen:
Licht microscopie
● Brightfield (helderveld) microscoop
○ Ongekleurd / gekleurd
● Fase contrast
○ Verschillen in dichtheid → verschillen in contrast
● Differentieel interferentie contrast (Nomarski)
○ 3D weergave
● Fluorescentie microscoop
○ Met gebruik van fluorescente markers
● Confocale microscoop
○ Gebruik van laser ipv lamp
○ Optische coupe (plakje)
● Deconvolutie
○ Meerdere optische coupes maken
○ Digitaal uit-focus licht verwijderen
● Super-resolutie microscoop
○ Individuele fluorescente moleculen weergeven
Elektronenmicroscopie (cellen gaan dood)
● Scanning EM
○ Oppervlakte weergeven
● Transmissie EM
○ Coupe
1
, Cel fractionering: scheiden van onderdelen van de cel
Stappen:
1. Homogeniseren
2. Differentieel centrifugeren (steeds harder)
● Scheiden op basis van grootte:
○ Kernen
○ Mitochondria
○ Microsomen
○ Ribosomen
Gebruik: bijvoorbeeld onderzoeken of bepaalde eiwitten in een bepaald organel voorkomen
2