Chapitre 5 : Gènes et génomes
eucaryote
La génétique moléculaire est essayer de voir les différentes façon d'appréhender les
gènes.
Gène : Unité fonctionnelle et physique élémentaire de l'hérédité qui transmet
l'information d'une génération à la suivante. Un fragment d'ADN, contitué d'une
région transcrite et d'une séquence régulatrice qui permet la transcription.
Quand on parle de l'expression d'un gène, si la séquence régulatrice n'est pas
présente, le gène ne pourra être exprimé.
Comment appréhender les gène ?
Structure moléculaire d'un gène, carte de restriction.
Distance entre gène adjacents, avec une carte génétique.
Associer des gènes à un groupe avec les groupe de liaison.
I- Structure moléculaire eucaryotes
1. Région codante et site de contrôle
2. Les gènes eucaryotes sont morcelés
Les exons sont les séquences que l'ont retrouve dans l'ARN messager conserve pour
donner des protéines.
,Les introns eux sont éliminés et ne se retrouve pas dans l'ARN messager.
3. Carte de restriction
Enzyme de restriction : Une enzyme de restriction est une protéine capable de
couper un fragment d'ADN au niveau d'une séquence de nucléotides caractéristique
appelée site de restriction. Chaque enzyme de restriction reconnaît ainsi un site
spécifique.
Les enzymes de restriction sont utilisées, ce sont des protéines avec une activité qui
va couper l'ADN à certain endroit. Nous allons retrouver des sites de coupure
identique et elles ciblent de 4 à 6 paires de base
a) Réalisation d'une carte de restriction
L'extraction des séquences d'ADN se réalise avec les enzymes puis nous allons
séparer les fragments par électrophorèse sur gel. On coule un gel acrylamide que
l'ont dépose dans des petits puits et on soumet ça a un courant électrique.
La vitesse de migration est inversement proportionnel au log(PM) marqueur de
contrôle.
Il existe deux techniques :
, La digestion partielle : ordonne des sites de coupure d'une enzyme et on
regarde comment les fragment s'agence les uns avec les autres.
Marquage des extrémités : avec un radiomarquage en 5' ou 3' puis on
reconstitue l'ADN.
D'une partie, on lie souvent l'ADN a des enzymes qui effectue des coupures, de
l'autre on fait un clivage avec une autre enzyme qui va couper à d'autres sites. On
dépose le tout sur un gel d'électrophorèse soumis à un champs électrique.
Pour connaitre la longueur des fragments, on analyse les résultats obtenus. Nous
prenons un scalpel, on coupe une bande de gel sur la bande A et on la soumet à
eucaryote
La génétique moléculaire est essayer de voir les différentes façon d'appréhender les
gènes.
Gène : Unité fonctionnelle et physique élémentaire de l'hérédité qui transmet
l'information d'une génération à la suivante. Un fragment d'ADN, contitué d'une
région transcrite et d'une séquence régulatrice qui permet la transcription.
Quand on parle de l'expression d'un gène, si la séquence régulatrice n'est pas
présente, le gène ne pourra être exprimé.
Comment appréhender les gène ?
Structure moléculaire d'un gène, carte de restriction.
Distance entre gène adjacents, avec une carte génétique.
Associer des gènes à un groupe avec les groupe de liaison.
I- Structure moléculaire eucaryotes
1. Région codante et site de contrôle
2. Les gènes eucaryotes sont morcelés
Les exons sont les séquences que l'ont retrouve dans l'ARN messager conserve pour
donner des protéines.
,Les introns eux sont éliminés et ne se retrouve pas dans l'ARN messager.
3. Carte de restriction
Enzyme de restriction : Une enzyme de restriction est une protéine capable de
couper un fragment d'ADN au niveau d'une séquence de nucléotides caractéristique
appelée site de restriction. Chaque enzyme de restriction reconnaît ainsi un site
spécifique.
Les enzymes de restriction sont utilisées, ce sont des protéines avec une activité qui
va couper l'ADN à certain endroit. Nous allons retrouver des sites de coupure
identique et elles ciblent de 4 à 6 paires de base
a) Réalisation d'une carte de restriction
L'extraction des séquences d'ADN se réalise avec les enzymes puis nous allons
séparer les fragments par électrophorèse sur gel. On coule un gel acrylamide que
l'ont dépose dans des petits puits et on soumet ça a un courant électrique.
La vitesse de migration est inversement proportionnel au log(PM) marqueur de
contrôle.
Il existe deux techniques :
, La digestion partielle : ordonne des sites de coupure d'une enzyme et on
regarde comment les fragment s'agence les uns avec les autres.
Marquage des extrémités : avec un radiomarquage en 5' ou 3' puis on
reconstitue l'ADN.
D'une partie, on lie souvent l'ADN a des enzymes qui effectue des coupures, de
l'autre on fait un clivage avec une autre enzyme qui va couper à d'autres sites. On
dépose le tout sur un gel d'électrophorèse soumis à un champs électrique.
Pour connaitre la longueur des fragments, on analyse les résultats obtenus. Nous
prenons un scalpel, on coupe une bande de gel sur la bande A et on la soumet à
