CARRERA: BIOQUÍMICA
Biología Molecular
y Genética
Apunte de estudio
Trabajos Prácticos de Laboratorio
TP1 · Extracción de ADN
TP2 · Electroforesis de ADN en gel de agarosa
TP3 · PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa
Pasos · Reactivos · El porqué de cada uno
Lenguaje simple, analogías, cálculos y parcial 2024 resuelto.
Apunte de: ______________________________
,Cómo usar este apunte
Este apunte está hecho para estudiar desde cero. Cada técnica se explica con la misma lógica: qué pasa en
cada paso, qué reactivo entra y por qué entra. Si entendés el porqué de cada reactivo, no hace falta
memorizar listas: se deduce.
EN PALABRAS SIMPLES
Una explicación con una comparación de la vida cotidiana, para que el concepto se entienda antes de meterse
en los nombres difíciles.
OJO
Errores típicos o trampas que suelen aparecer en los parciales.
PARA RECORDAR
La idea clave que tenés que poder decir con tus palabras.
DATO EXTRA (no figura en tu apunte)
Información estándar de la materia que complementa tu apunte (por ejemplo valores de referencia). Confirmá
con tu cátedra que coincida con lo que enseñan.
CONSIGNA DEL PARCIAL
Pregunta de un parcial anterior (curso 2024), transcripta para que practiques.
MODELO DE RESPUESTA
Cómo se resuelve, paso a paso, con un modelo de respuesta que podés usar como guía.
Cada TP tiene tres partes: la teoría explicada, una ampliación con los cálculos y criterios que se usan para
resolver problemas, y el parcial 2024 resuelto, pregunta por pregunta.
Truco de estudio: primero leé los recuadros celestes; después las tablas de reactivos; al final contestá las
preguntas de autoevaluación sin mirar las respuestas.
Bioquímica · Biología Molecular y Genética · Apunte de laboratorio pág. 2
,Índice
TP1 · Extracción de ADN 5
¿Para qué sirve? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5
El mapa completo: 8 pasos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Paso 1 · Toma de muestra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Paso 2 · Disrupción celular y lisis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Paso 3 · Purificación . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6
Paso 4 · Precipitación del ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
Pasos 5 a 8 · Lavado, secado, rehidratación y almacenamiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Método alternativo: sangre seca en papel FTA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Los 8 protocolos según el tipo de muestra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Tabla resumen: todos los reactivos del TP1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9
Ampliación: qué contaminantes hay y qué paso elimina a cada uno . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Ampliación: bioseguridad en el laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Parcial 2024 resuelto · Bloque A (extracción y purificación) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
Autoevaluación TP1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14
TP2 · Electroforesis de ADN en gel de agarosa 15
¿Qué es y cómo funciona? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
Los 5 pasos de la corrida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
¿Qué factores afectan la migración del ADN? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Ampliación: los cálculos que aparecen en electroforesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Ampliación: cómo leer un gel paso a paso . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
Parcial 2024 resuelto · Bloque B (electroforesis) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
Autoevaluación TP2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
TP3 · PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa 23
¿Qué es la PCR? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Fundamentos que tenés que tener claros . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Los ingredientes: la master mix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
La enzima: Taq polimerasa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
El ciclado en el termociclador . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
¿Cuánto ADN obtengo? Crecimiento exponencial . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
Diseño de cebadores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
Tipos de PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
Áreas de trabajo: cómo evitar contaminar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
¿Y si algo sale mal? Guía rápida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
Bioquímica · Biología Molecular y Genética · Apunte de laboratorio pág. 3
, Ampliación: cálculo de volúmenes y master mix (paso a paso) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
Ampliación: rangos habituales de cada reactivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Ampliación: cómo elegir la temperatura de hibridación . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Ampliación: cómo diseñar cebadores a partir de una secuencia (método de 5 pasos) . . . . . . . . . . . . . 29
Parcial 2024 resuelto · Bloque C (PCR) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
Autoevaluación TP3 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
Repaso final 34
Hoja de repaso: lo que tenés que saber de memoria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
Glosario express . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
Bioquímica · Biología Molecular y Genética · Apunte de laboratorio pág. 4
Biología Molecular
y Genética
Apunte de estudio
Trabajos Prácticos de Laboratorio
TP1 · Extracción de ADN
TP2 · Electroforesis de ADN en gel de agarosa
TP3 · PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa
Pasos · Reactivos · El porqué de cada uno
Lenguaje simple, analogías, cálculos y parcial 2024 resuelto.
Apunte de: ______________________________
,Cómo usar este apunte
Este apunte está hecho para estudiar desde cero. Cada técnica se explica con la misma lógica: qué pasa en
cada paso, qué reactivo entra y por qué entra. Si entendés el porqué de cada reactivo, no hace falta
memorizar listas: se deduce.
EN PALABRAS SIMPLES
Una explicación con una comparación de la vida cotidiana, para que el concepto se entienda antes de meterse
en los nombres difíciles.
OJO
Errores típicos o trampas que suelen aparecer en los parciales.
PARA RECORDAR
La idea clave que tenés que poder decir con tus palabras.
DATO EXTRA (no figura en tu apunte)
Información estándar de la materia que complementa tu apunte (por ejemplo valores de referencia). Confirmá
con tu cátedra que coincida con lo que enseñan.
CONSIGNA DEL PARCIAL
Pregunta de un parcial anterior (curso 2024), transcripta para que practiques.
MODELO DE RESPUESTA
Cómo se resuelve, paso a paso, con un modelo de respuesta que podés usar como guía.
Cada TP tiene tres partes: la teoría explicada, una ampliación con los cálculos y criterios que se usan para
resolver problemas, y el parcial 2024 resuelto, pregunta por pregunta.
Truco de estudio: primero leé los recuadros celestes; después las tablas de reactivos; al final contestá las
preguntas de autoevaluación sin mirar las respuestas.
Bioquímica · Biología Molecular y Genética · Apunte de laboratorio pág. 2
,Índice
TP1 · Extracción de ADN 5
¿Para qué sirve? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5
El mapa completo: 8 pasos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Paso 1 · Toma de muestra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Paso 2 · Disrupción celular y lisis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
Paso 3 · Purificación . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6
Paso 4 · Precipitación del ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
Pasos 5 a 8 · Lavado, secado, rehidratación y almacenamiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Método alternativo: sangre seca en papel FTA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Los 8 protocolos según el tipo de muestra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
Tabla resumen: todos los reactivos del TP1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9
Ampliación: qué contaminantes hay y qué paso elimina a cada uno . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Ampliación: bioseguridad en el laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
Parcial 2024 resuelto · Bloque A (extracción y purificación) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
Autoevaluación TP1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14
TP2 · Electroforesis de ADN en gel de agarosa 15
¿Qué es y cómo funciona? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
Los 5 pasos de la corrida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
¿Qué factores afectan la migración del ADN? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Ampliación: los cálculos que aparecen en electroforesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Ampliación: cómo leer un gel paso a paso . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
Parcial 2024 resuelto · Bloque B (electroforesis) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
Autoevaluación TP2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
TP3 · PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa 23
¿Qué es la PCR? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Fundamentos que tenés que tener claros . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Los ingredientes: la master mix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
La enzima: Taq polimerasa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
El ciclado en el termociclador . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
¿Cuánto ADN obtengo? Crecimiento exponencial . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
Diseño de cebadores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
Tipos de PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
Áreas de trabajo: cómo evitar contaminar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
¿Y si algo sale mal? Guía rápida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
Bioquímica · Biología Molecular y Genética · Apunte de laboratorio pág. 3
, Ampliación: cálculo de volúmenes y master mix (paso a paso) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
Ampliación: rangos habituales de cada reactivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Ampliación: cómo elegir la temperatura de hibridación . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
Ampliación: cómo diseñar cebadores a partir de una secuencia (método de 5 pasos) . . . . . . . . . . . . . 29
Parcial 2024 resuelto · Bloque C (PCR) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
Autoevaluación TP3 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
Repaso final 34
Hoja de repaso: lo que tenés que saber de memoria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
Glosario express . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
Bioquímica · Biología Molecular y Genética · Apunte de laboratorio pág. 4
