Vragen inleiding chromatografie
Les 1:
1. Schrijf minstens 4 verschillende retentiemechanisme op.
2. Teken een blokschema van een low pressure gradient HPLC opstelling en benoem elk
onderdeel.
3. Geef het verschil aan tussen een low en high pressure gradient
4. Waarom moeten de elutievloeistoffen worden ontgast?
5. Hoe kunnen elutievloeistoffen worden ontgast?
6. Wat wordt bedoeld met dood volume?
7. Wat is een nadeel van dood volume?
8. Wat is de functie van een voorkolom?
9. Hoe kan de levensduur van een kolom worden verlengd?
10. Wat is het gevolg als je je monster in de LC injectiekraan brengt terwijl de kraan in de
inject stand staat?
11. Wat is een voordeel van een DAD t.o.v. een UV/VIS detector?
Extra opgave.
We willen graag de concentratie caffeine bepalen in thee bladeren. Hoe zal je dit in de praktijk
uitvoeren? Welke gegevens dan nodig?
a. Wel gehalte kun je verwachten in theebladeren? (GOOGLEN!)
b. Wat is de molaire extinctiecoefficient van caffeine?
c. Wat is absorptiemaximum van caffeine?
d. Bij welke golflengte ga je meten?
e. Welke concentratie caffeine geeft een extinctie van 0,7 bij een cuvetweglengte van 1 cm?
f. Stel je wilt een standaardreeks maken van 5 caffeine oplossingen die een extinctie geeft
tussen 0,1 en 0,7. Hoeveel caffeine ga je afwegen en in welke volume oplossen?
g. Hoeveel gram theebladeren ga je gebruiken voor een extractie met 25 ml vloeistof om een
verwachte extinctie van 0,4 te krijgen?
h. Stel de ruis is 0,0002 AU. Wat is dan de detectielimiet?
1
, Les 2
1. Teken een blokschema van een GC en benoem elk onderdeel.
2. Teken een splitinjector & leg alle onderdelen uit.
3. Leg aan de hand van de getekende splitinjector uit wat bedoeld wordt met een splitratio
van 1:25
4. Teken een FID en leg uit hoe deze componenten detecteert.
5. Wat is de detectiegrens van een FID?
6. Wat is het verschil tussen een WCOT en SCOT?
7. Schrijf minstens drie verschillen tussen een gepakte en een capillaire kolom op.
8. Hoe voer je een hot needle injectie uit?
9. Welke temperatuur wordt de injector ingesteld?
10. Waarom is de oventemperatuur lager dan bp van de te scheiden componenten?
11. Bereken wat de minimale concentratie in een oplossing moet zijn in m% om bij een FID
waarbij de piek 3 seconde breed is en je 1 uL injecteert (Uit de tabel kun je halen dat de
detectiegrens ca 2 pg/sec is.)
12. Kun je methylesters van vetzuren beter scheiden op een apolaire of polaire kolom? Licht
toe.
2
Les 1:
1. Schrijf minstens 4 verschillende retentiemechanisme op.
2. Teken een blokschema van een low pressure gradient HPLC opstelling en benoem elk
onderdeel.
3. Geef het verschil aan tussen een low en high pressure gradient
4. Waarom moeten de elutievloeistoffen worden ontgast?
5. Hoe kunnen elutievloeistoffen worden ontgast?
6. Wat wordt bedoeld met dood volume?
7. Wat is een nadeel van dood volume?
8. Wat is de functie van een voorkolom?
9. Hoe kan de levensduur van een kolom worden verlengd?
10. Wat is het gevolg als je je monster in de LC injectiekraan brengt terwijl de kraan in de
inject stand staat?
11. Wat is een voordeel van een DAD t.o.v. een UV/VIS detector?
Extra opgave.
We willen graag de concentratie caffeine bepalen in thee bladeren. Hoe zal je dit in de praktijk
uitvoeren? Welke gegevens dan nodig?
a. Wel gehalte kun je verwachten in theebladeren? (GOOGLEN!)
b. Wat is de molaire extinctiecoefficient van caffeine?
c. Wat is absorptiemaximum van caffeine?
d. Bij welke golflengte ga je meten?
e. Welke concentratie caffeine geeft een extinctie van 0,7 bij een cuvetweglengte van 1 cm?
f. Stel je wilt een standaardreeks maken van 5 caffeine oplossingen die een extinctie geeft
tussen 0,1 en 0,7. Hoeveel caffeine ga je afwegen en in welke volume oplossen?
g. Hoeveel gram theebladeren ga je gebruiken voor een extractie met 25 ml vloeistof om een
verwachte extinctie van 0,4 te krijgen?
h. Stel de ruis is 0,0002 AU. Wat is dan de detectielimiet?
1
, Les 2
1. Teken een blokschema van een GC en benoem elk onderdeel.
2. Teken een splitinjector & leg alle onderdelen uit.
3. Leg aan de hand van de getekende splitinjector uit wat bedoeld wordt met een splitratio
van 1:25
4. Teken een FID en leg uit hoe deze componenten detecteert.
5. Wat is de detectiegrens van een FID?
6. Wat is het verschil tussen een WCOT en SCOT?
7. Schrijf minstens drie verschillen tussen een gepakte en een capillaire kolom op.
8. Hoe voer je een hot needle injectie uit?
9. Welke temperatuur wordt de injector ingesteld?
10. Waarom is de oventemperatuur lager dan bp van de te scheiden componenten?
11. Bereken wat de minimale concentratie in een oplossing moet zijn in m% om bij een FID
waarbij de piek 3 seconde breed is en je 1 uL injecteert (Uit de tabel kun je halen dat de
detectiegrens ca 2 pg/sec is.)
12. Kun je methylesters van vetzuren beter scheiden op een apolaire of polaire kolom? Licht
toe.
2
