Histologie : synthèse
Introduction générale :
I. Les microscopes :
1. Deux types de microscopes :
Le microscope photonique Le microscope électronique
• Faisceau de photons • Faisceau d’électrons
• Lentilles de verre • Electro-aimants
• Pouvoir de résolution: 0,2 m • Pouvoir de résolution : 0,2 nm
• Cellules, mitochondries, bactéries. • Organites, protéines, petites molécules
• Matériel mort ou vivant • Matériel mort
• Matériel fixé ou pas, coloré ou pas • Matériel fixé et coloré (métaux lourds)
Les microscopes possèdent différents zooms :
• 4x vue d’ensemble
• 10x populations de cellules, délimitations entre les cellules
• 40x observation des cellules en détail
2. Les 3 étapes pour l’étude histologique :
Il y a 3 étapes à respecter pour qu’une étude histologique soit possible.
• Conserver l’organe : on le dissèque/prélève et on le fixe.
• Amincir la coupe : on l’enrobe et la coupe. Il existe différentes techniques :
o La paraffine, qui déshydrate la coupe. Elle se fait à 60°C et les coupes font alors 5mm
d’épaisseur.
o La glace, qui est une technique rapide qui donne des coupes de 10 µm.
o La résine, qui déshydrate complètement la coupe et qui donne des coupes de entre 1 et
0.1 µm
o Le frottis, qui permet d’individualiser des cellules.
• Contraster la coupe : on la colore. Il existe également différentes techniques.
o L’hématoxyline-éosine (HE) : l’hématoxyline, acidophile (basique) colore les noyaux,
les ribosomes, le RER et tous les autres constituants acides en bleu-violet tandis que
l’éosine, basophile (acide) colore le cytoplasme et les substances basiques en rouge
rose.
o Le trichrome de Masson : il met en évidence le tissu conjonctif. Il colore les noyaux
en bleu, le collagène en bleu-vert et le cytoplasme (la kératine et autres composants
cellulaires) en rouge.
o Le PAS (Periodic acid-Schiff) : il colore le mucus, les cellules calciformes, les lames
basales et le glycogène en rouge foncé.
o Les techniques immunohistochimiques : elles consistent en la détection d’un antigène
par un/des anticorps dans un tissu ou une cellule. On utilise donc le principe de la
réaction immunitaire qui consiste en l’affinité entre un anticorps primaire et un
antigène présent dans les tissus. Cet anticorps primaire sera ensuite mis en évidence
grâce à un anticorps secondaire qui vient s’y fixer amplification du signal. Ces
anticorps secondaires peuvent ensuite se fixer à des molécules fluorescentes.
1
, Chapitre 1 : Les composants cellulaires :
Le noyau : on observe de la chromatine plus dense en périphérie.
Les pores nucléaires : A ces endroits, la membrane intérieure et la membrane extérieure du noyau
sont continues avec le RER. Ils servent au passage de l’ARNm.
Le nucléole : C’est la partie du noyau où se trouve de l’ADN nu. C’est dans ce type d’ADN que se
trouvent les gènes. Il a deux rôles principaux : créer de l’ARNr et assembler les sous unités du
ribosome.
La membrane plasmique : elle limite la cellule et permet le transport de molécule du milieu intra- au
milieu extra-cellulaire.
Les mitochondries : Ce sont des organites à 2 membranes : membrane interne et externe. Elles sont
présentes dans toutes les cellules eucaryotes (y compris les cellules végétales). Ce sont elles qui
s’occupent de la respiration cellulaire et elles interviennent dans le processus de mort cellulaire
contrôlée : l’apoptose.
Le cytosol : c’est comme la solution cellulaire se trouvant en dehors des organites et des inclusions.
L’appareil de Golgi : il est associé au courant sécrétoire (sert à la formation de certains
polysaccharides, dans la modification de certaines molécules (surtout des protéines) et dans le tri de
molécules vers les lysosomes, la vacuole et l’exterieur de la cellule) ainsi que dans la glycosydation.
Le RER : il sert à la synthèse de certaines protéines et oligosaccharides. Les protéines formées sortent
de la cellule ou vont vers les membranes + début de la glycosydation.
Le REL : il fabrique les lipides (phospholipides des membranes) et détoxifie des molécules. C’est
également un site de réserve de Ca++, qui aide lors de contractions.
Les peroxysomes : C’est un organite présent uniquement chez les eucaryotes. Ils servent à détoxifier
les molécules toxiques hydrophiles qui entrent dans la cellule, l’alcool par exemple.
Les lysosomes : les lysosomes primaires contiennent tout ce qu’il faut pour digérer (hydrolases acides)
mais n’ont aucun contenu à digérer. Leur contenu est constant tandis que les lysosomes secondaires
contiennent et des hydrolases acides et des polymères en train d’être hydrolysés. Leur contenu est
variable. Ils pratiquent soit l’hétérophagie soit autophagie.
Les ribosomes : ce sont des inclusions actives présentes dans toutes les cellules en très grand nombre.
C’est le lieu où se rassemblent et où se disposent correctement les molécules nécessaires à la synthèse
des protéines.
Les filaments intermédiaires : permettent à la cellule de résister aux tensions mécaniques et confère
de la solidité à la cellule.
Vue d’une cellule animale en microscopie optique :
2
,Vue d’une cellule animale en microscopie électronique :
Membrane plasmique – noyau (avec
euchromatine = ADN déroulée,
transcription en cours)
Réticulum endoplasmique (rugueux)
Mitochondrie
Peroxysome
Lysosome
I. Le cytosquelette :
Le cytosquelette est un réseau intracellulaire de filaments d’actine, de microtubules et de filaments
intermédiaires qui permet aux cellules eucaryotes
• une organisation de ses éléments intracellulaires,
• une protection vis-à-vis des tensions mécaniques
• de modifier sa forme et de se mouvoir.
1. Les filaments d’actine :
Ce sont des filaments que l’on retrouve dans toutes les cellules animales,
formés de la protéine actine. Elle se retrouve en grande densité en
périphérie de la cellule. Ils mesurent à peu près 7nm de diamètre et ont
une configuration en double hélice.
A) Dans les cellules différenciées à un pôle de la cellule, les
filaments d’actine structurent ce pôle (microvillosités, etc.)
B) Les filaments d’actine permettent le changement de forme d’une cellule, l’actine en
périphérie est alors associée à la myosine.
C) L’actine peut se déplacer dans le front de migration pour accrocher la cellule à d’autres. Un
déplacement sera alors possible grâce à la (dé-)polymérisation.
D) L’actine intervient également lors de la cytocinèse (division des deux cellules filles).
3
, o Structure et fonctionnement :
On distingue bien lorsque l’on parle du polymère
d’actine, du filament (actine F) et du monomère, de la
protéine-même (actine G).
L’actine est polarisée avec un pôle positif et un pôle
négatif.
A) L’actine en périphérie, associée à la myosine, permet des mouvements vésiculaires en plus
des changements de forme de la cellule. En effet, la myosine-1 est une protéine contractile qui
peut progresser le long du filament d’actine et fixer une vésicule, qu’elle transporte.
B) Un second type de myosine (la myosine-2) sait changer de conformation grâce à un apport
d’ATP. Elle peut alors glisser le long du filament d’actine et initier une contraction
cellulaire, qui peut mener à une contraction musculaire.
C) Enfin, si la myosine-1 accroche le filament d’actine à la membrane, cette association peut
permettre des changements de forme cellulaire.
2. Les filaments intermédiaires :
Les filaments intermédiaires sont des sortes de cables de 10nm de diamètre qui
rejoignent la membrane au niveau des desmosomes (qui sont des structures
protéiques qui permettent la jonction entre deux cellules voisines et ainsi un
réseau dans le tissu) et qui permettent à la cellule de résister aux tensions
mécaniques grâce à leur force de tension importante.
Les filaments intermédiaires sont donc très abondants dans les cellules comme
les neurone et leur axone, les cellules épihéliales, etc.
Ils sont formé d’une protéine différente que l’actine, qui fait partie de la
famille1 de la kératine.
1
Une famille de protéines reprend les protéines qui présentent une séquence d’a.a légèrement différente mais
avec une structure commune qui leur permet de s’assembler en polymères.
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Introduction générale :
I. Les microscopes :
1. Deux types de microscopes :
Le microscope photonique Le microscope électronique
• Faisceau de photons • Faisceau d’électrons
• Lentilles de verre • Electro-aimants
• Pouvoir de résolution: 0,2 m • Pouvoir de résolution : 0,2 nm
• Cellules, mitochondries, bactéries. • Organites, protéines, petites molécules
• Matériel mort ou vivant • Matériel mort
• Matériel fixé ou pas, coloré ou pas • Matériel fixé et coloré (métaux lourds)
Les microscopes possèdent différents zooms :
• 4x vue d’ensemble
• 10x populations de cellules, délimitations entre les cellules
• 40x observation des cellules en détail
2. Les 3 étapes pour l’étude histologique :
Il y a 3 étapes à respecter pour qu’une étude histologique soit possible.
• Conserver l’organe : on le dissèque/prélève et on le fixe.
• Amincir la coupe : on l’enrobe et la coupe. Il existe différentes techniques :
o La paraffine, qui déshydrate la coupe. Elle se fait à 60°C et les coupes font alors 5mm
d’épaisseur.
o La glace, qui est une technique rapide qui donne des coupes de 10 µm.
o La résine, qui déshydrate complètement la coupe et qui donne des coupes de entre 1 et
0.1 µm
o Le frottis, qui permet d’individualiser des cellules.
• Contraster la coupe : on la colore. Il existe également différentes techniques.
o L’hématoxyline-éosine (HE) : l’hématoxyline, acidophile (basique) colore les noyaux,
les ribosomes, le RER et tous les autres constituants acides en bleu-violet tandis que
l’éosine, basophile (acide) colore le cytoplasme et les substances basiques en rouge
rose.
o Le trichrome de Masson : il met en évidence le tissu conjonctif. Il colore les noyaux
en bleu, le collagène en bleu-vert et le cytoplasme (la kératine et autres composants
cellulaires) en rouge.
o Le PAS (Periodic acid-Schiff) : il colore le mucus, les cellules calciformes, les lames
basales et le glycogène en rouge foncé.
o Les techniques immunohistochimiques : elles consistent en la détection d’un antigène
par un/des anticorps dans un tissu ou une cellule. On utilise donc le principe de la
réaction immunitaire qui consiste en l’affinité entre un anticorps primaire et un
antigène présent dans les tissus. Cet anticorps primaire sera ensuite mis en évidence
grâce à un anticorps secondaire qui vient s’y fixer amplification du signal. Ces
anticorps secondaires peuvent ensuite se fixer à des molécules fluorescentes.
1
, Chapitre 1 : Les composants cellulaires :
Le noyau : on observe de la chromatine plus dense en périphérie.
Les pores nucléaires : A ces endroits, la membrane intérieure et la membrane extérieure du noyau
sont continues avec le RER. Ils servent au passage de l’ARNm.
Le nucléole : C’est la partie du noyau où se trouve de l’ADN nu. C’est dans ce type d’ADN que se
trouvent les gènes. Il a deux rôles principaux : créer de l’ARNr et assembler les sous unités du
ribosome.
La membrane plasmique : elle limite la cellule et permet le transport de molécule du milieu intra- au
milieu extra-cellulaire.
Les mitochondries : Ce sont des organites à 2 membranes : membrane interne et externe. Elles sont
présentes dans toutes les cellules eucaryotes (y compris les cellules végétales). Ce sont elles qui
s’occupent de la respiration cellulaire et elles interviennent dans le processus de mort cellulaire
contrôlée : l’apoptose.
Le cytosol : c’est comme la solution cellulaire se trouvant en dehors des organites et des inclusions.
L’appareil de Golgi : il est associé au courant sécrétoire (sert à la formation de certains
polysaccharides, dans la modification de certaines molécules (surtout des protéines) et dans le tri de
molécules vers les lysosomes, la vacuole et l’exterieur de la cellule) ainsi que dans la glycosydation.
Le RER : il sert à la synthèse de certaines protéines et oligosaccharides. Les protéines formées sortent
de la cellule ou vont vers les membranes + début de la glycosydation.
Le REL : il fabrique les lipides (phospholipides des membranes) et détoxifie des molécules. C’est
également un site de réserve de Ca++, qui aide lors de contractions.
Les peroxysomes : C’est un organite présent uniquement chez les eucaryotes. Ils servent à détoxifier
les molécules toxiques hydrophiles qui entrent dans la cellule, l’alcool par exemple.
Les lysosomes : les lysosomes primaires contiennent tout ce qu’il faut pour digérer (hydrolases acides)
mais n’ont aucun contenu à digérer. Leur contenu est constant tandis que les lysosomes secondaires
contiennent et des hydrolases acides et des polymères en train d’être hydrolysés. Leur contenu est
variable. Ils pratiquent soit l’hétérophagie soit autophagie.
Les ribosomes : ce sont des inclusions actives présentes dans toutes les cellules en très grand nombre.
C’est le lieu où se rassemblent et où se disposent correctement les molécules nécessaires à la synthèse
des protéines.
Les filaments intermédiaires : permettent à la cellule de résister aux tensions mécaniques et confère
de la solidité à la cellule.
Vue d’une cellule animale en microscopie optique :
2
,Vue d’une cellule animale en microscopie électronique :
Membrane plasmique – noyau (avec
euchromatine = ADN déroulée,
transcription en cours)
Réticulum endoplasmique (rugueux)
Mitochondrie
Peroxysome
Lysosome
I. Le cytosquelette :
Le cytosquelette est un réseau intracellulaire de filaments d’actine, de microtubules et de filaments
intermédiaires qui permet aux cellules eucaryotes
• une organisation de ses éléments intracellulaires,
• une protection vis-à-vis des tensions mécaniques
• de modifier sa forme et de se mouvoir.
1. Les filaments d’actine :
Ce sont des filaments que l’on retrouve dans toutes les cellules animales,
formés de la protéine actine. Elle se retrouve en grande densité en
périphérie de la cellule. Ils mesurent à peu près 7nm de diamètre et ont
une configuration en double hélice.
A) Dans les cellules différenciées à un pôle de la cellule, les
filaments d’actine structurent ce pôle (microvillosités, etc.)
B) Les filaments d’actine permettent le changement de forme d’une cellule, l’actine en
périphérie est alors associée à la myosine.
C) L’actine peut se déplacer dans le front de migration pour accrocher la cellule à d’autres. Un
déplacement sera alors possible grâce à la (dé-)polymérisation.
D) L’actine intervient également lors de la cytocinèse (division des deux cellules filles).
3
, o Structure et fonctionnement :
On distingue bien lorsque l’on parle du polymère
d’actine, du filament (actine F) et du monomère, de la
protéine-même (actine G).
L’actine est polarisée avec un pôle positif et un pôle
négatif.
A) L’actine en périphérie, associée à la myosine, permet des mouvements vésiculaires en plus
des changements de forme de la cellule. En effet, la myosine-1 est une protéine contractile qui
peut progresser le long du filament d’actine et fixer une vésicule, qu’elle transporte.
B) Un second type de myosine (la myosine-2) sait changer de conformation grâce à un apport
d’ATP. Elle peut alors glisser le long du filament d’actine et initier une contraction
cellulaire, qui peut mener à une contraction musculaire.
C) Enfin, si la myosine-1 accroche le filament d’actine à la membrane, cette association peut
permettre des changements de forme cellulaire.
2. Les filaments intermédiaires :
Les filaments intermédiaires sont des sortes de cables de 10nm de diamètre qui
rejoignent la membrane au niveau des desmosomes (qui sont des structures
protéiques qui permettent la jonction entre deux cellules voisines et ainsi un
réseau dans le tissu) et qui permettent à la cellule de résister aux tensions
mécaniques grâce à leur force de tension importante.
Les filaments intermédiaires sont donc très abondants dans les cellules comme
les neurone et leur axone, les cellules épihéliales, etc.
Ils sont formé d’une protéine différente que l’actine, qui fait partie de la
famille1 de la kératine.
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Une famille de protéines reprend les protéines qui présentent une séquence d’a.a légèrement différente mais
avec une structure commune qui leur permet de s’assembler en polymères.
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