examenvragen algemene microbiologie

STRUCTUUR VAN ZUURVASTE BACTERIEN


Zuurvaste bacteriën zitten qua opbouw van de celwand tussen G+ en G–

 er is maar één celmembraan = G+
 er is een redelijk dunne PG-laag aanwezig = G–
 als antennes zien we lipoarabinomannanen (LAM)
 verbinden met het fosfolipidomembraan
 er is arabinogalactan aanwezig met daarop een
mycolinezuurlaag
 arbaninogalameren en galactosegalameren
 op de PG-laag zitten galactose-met daarop
arabinosemoleculen
 er is dus een galactan-laag en een
arabinanlaag
 hier op zitten langketen-
mycolinezuren(hoogMW)

ANTIBIOTICA EN ZUURVASTE BACTERIËN

Een longontsteking met Streptococchus pneumoniae (G+) snel behandeld met antibiotica voor een periode van 10-14
dagen.

Bij zuurvaste bacteriën (bv. Mycobacterium tuberculosis) duurt dit veel langer: waarom?

 behandeling duurt tegenwoordig 4 à 6 maanden
 de zuurvaste celwand laat veel moeilijker antibiotica binnen
 deze bacteriën werken traag " antibiotica werken vooral in op metabool actieve bacteriën
 zuurvaste kunnen zich ook organiseren in een granuloom " hier geraken heel moeilijk antibiotica binnen

ZUURVASTE KLEURING

De Ziehl-Neelsen kleuring zal de zuurvaste bacteriën kleuren

 carbolfuchsine kleurt zowel G+, G– als zuurvaste roos
 structuur niet kennen
 wel dat het + geladen is!!!
 Zal alle bacterien aankleuren
 een sterk zuur (HCl, pH < 1) ontkleurt G+ en G–, bij de zuurvaste zal de vetrijke celwand ervoor zorgen dat het
zuur niet kan inwerken op deze bacteriën (behoudt kleurstof)
 celwand wordt afgebroken
 zuurvaste
 carbolfushine blijft aanwezig
 als tegenkleuring wordt methyleenblauw gebruikt: deze geraakt niet in de zuurvaste want die zit al “vol” " in G+
en G– kan deze wel binnen (blauw)
 roos: zuurvast
 blauw: gram+ en gram-.




STRUCTUUR VAN EEN PEPTIDOGLYCAANLAAG + HOE WORDT DIE GEVORMD + ILLUSTREER MET TEKENING
EN VERSCHIL TUSSEN GRAM + EN GRAM

, - Peptidoglycaan of mureine
o Contains:
 N-acetylglucosamine (NAG) and N-acetylmuramic acid (NAM)
 Twee suikers die de backbone vormen
 We krijgen: NAM-NAG-NAM-NAG-NAM-NAG-...
 Cross-linked by tetrapeptides, with third amino acid:




- 4e AZ is altijd een D-alanine
- Rechtstreekse binding
- deze vertrekken altijd op NAM  NAG kan geen amidebinding vormen
o tweetetrapeptiden vormen een 3,4-peptidebindingen zo de crosslink
o aminozuur op plaats 3 van de ene bindt met die op plaats 4 van de andere
o het tetrapeptide bestaat uit
 L-alanine dat bindt met NAM
 D-glutaminezuur
 L-lysine (grampositief) en diaminopimelinezuur (gramnegatief)
 D-alanine

- Het tetrapeptide kan enkel op NAM binden, niet op NAG. OMDAT De carbonzuurfunctie (rood) ervoor zorgt dat
een amidebinding kan worden aangegaan met L-alanine
- bij proteïnen gaan aminozuren dezelfde binding aan tussen de carboxyterminus en de aminozuurterminus. !

De crosslink tussen de tetrapeptiden verschilt tussen de bacteriën (G+ en G–).

gramnegatief: bezitten en dotoxines die voor een shock kunnen zorgen; antibiotica kunnen in werken op grampositief, maar
niet op gramnegatief of omgekeerd, of op allebei: het is dus belangrijk om verschil te maken

Grampositief: er is een oligopeptidebrug aanwezig bij de crosslink

 deze bestaat bij bv. Staphylococcus aureus uit 5 glycinemoleculen
 L-lysine op plaats 3 wordt via 5 glycine moleculen verbonden met D-alanine

Gramnegatief: er is meestal geen oligopeptidebrug aanwezig  er is een directe verbinding tussen diaminopimelinezuur
(DAP) en D-alanine




CELWAND GRAM + VS GRAM –

o Gram +

,  Celmembraan is gelijk
 Peptidoglycaan is dikker
 Verbonden door L lysine
 Geen buitenste membraan
 Wel antennes in de vorm van techoïnezuren
o Gram –
 Celmembraan is gelijk
 Peptidoglycaan is dunner
 Verbonden door diaminopimelinezuur
 Ook nog een buitenste membraan waar antennes opzitten
 Met antennes = lipopolyschariden of LPs




WAT ZIJN LIPOPOLYSACCHARIDEN EN BIJ WELKE BACTERIË N KOMEN ZE VOOR?+STRUCTUUR WAT IS HUN
FUNCE? WELK EFFECT HEBBEN ZE OP DE MENS?(FUNC E BIJ DE MENS)


Het lipopolysaccharide (ook wel endotoxines) bestaat uit vier delen

- O- of somatisch antigen: het buitenste deel
o Bestaat typisch uit hexosesuikers (6C’s)
o De variatie is hier het grootst in vergelijking met de andere delen
o Belangrijk voor serologische classificatie
o Negatieve fosfaat groepen zullen belangrijk zijn
- Core oligosaccharide:
o Bestaat uit tientallen heptose-ofoctosesuikers (7C’s&8C’s)
o Hier zit ook variatie op tussen bacteriën, maar minder dan bij het O-antigen
o bv. KDO: keto-deoxyoctulosonaat " naam voor extra puntjes
o galactose, ramnose, …
- Glucosamine-pyrofosfaat polymeer:
o 2glucosamines waar fosfaat groepen aanhangen
- Korte-keten vetzuren
o Dezezijngebondenaandeglucosamines
o bv.C14:3-hydroxymyristinezuur

Glucosamine-pyrofosfaat + vetzuren vormen samen het lipid A gedeelte.
" als we dit binnenkrijgen intraveneus volgt een shock, orgaanfalen en uiteindelijk de dood " dit is toxisch voor zowel
mensen als dieren (wanneer het in de bloedbaan komt)

Bv: e coli in de darm = geen effect  in de bloedbaan  schok

Het lipopolysaccharide heeft een welbepaalde rol