MBE Meetrapport Michaelis Menten Kinetiek
Leerjaar 2 Biologie en Medisch Laboratoriumonderzoek MBE
Doel Michaelis Menten Kinetiek
Het Michaelis-Menten model geeft een wiskundige beschrijving van de kinetiek van een
enzymatische reactie. Via dit model kan worden afgeleid of een inhibitor competitief of niet-
competitief remt.
In deze proef zal worden bepaald wat voor soort werking de remmer kojinezuur heeft op het enzym
tyrosinase. Dit kan worden bepaald door middel van de omzetting van L-DOPA naar dopaquinone die
specifiek wordt uitgevoerd door tyrosinase. Dit is namelijk een maat voor de activiteit van het
tyrosinase enzym.
Het is van belang dat er aan de hand van het Michaelis-Menten model ook een Linewaever-Burk plot
wordt gemaakt. Dit is de afgeleide van het Michaelis-Menten model. Bij een hoge
substraatconcentratie nadert de reactiesnelheid het maximum en gedraagt zich dan asymptotisch in
het Michaelis-Menten model. Om een duidelijker beeld te krijgen, wordt deze uitgewerkt naar de
afgeleide.
Verwachting Michaelis Menten Kinetiek en Lineweaver-Burk plot
De verwachtingen van de resultaten staan weergeven in afbeelding 1 en afbeelding 2. De werking
van de remmer kojinezuur wordt onderzocht met deze proef. Het is dus niet bekend of de remmer
competitief of niet-competitief is. De activiteit van een competitieve remmer en een niet-
competitieve is daarom beide weergeven in de verwachtingen. Na het uitvoeren van de proef kan er
een conclusie worden getrokken om welke remmer het gaat aan de hand van de verwachtingen.
Met behulp van resultaten kunnen er later 2 waarden worden berekend waarmee een conclusie kan
worden getrokken over de werking van de remmer. Deze waarden zijn de Vmax en de Km. De Vmax
is de maximale omzettingssnelheid van het enzym. De Km is de waarde waarbij de
substraatconcentratie de helft van de Vmax heeft bereikt.
Bij een competitieve remmer is de Vmax gelijk aan het normale enzym (zonder remmer), maar is de
Km hoger. Bij een niet-competitieve remmer is de Km gelijk aan het normale enzym (zonder
remmer), maar is de Vmax lager. Dit geldt voor het Michaelis-Menten model.
In de Linewaever-Burk plot kruisen de trendlijnen van het normale enzym en het enzym met de
remmer elkaar in de y-as, als er sprake is van een niet-competitieve remmer. Als er een snijpunt op
de x-as is, is er sprake van een competitieve remmer. Aan de hand van deze waarden kan worden
bepaald wat voor remmer kojinezuur is.
Legenda voor afbeelding 1 en afbeelding 2:
Blauw: normale enzym activiteit
Oranje: competitieve inhibitor
Groen: niet-competitieve inhibitor
, Chart Title
Delta A/min
Concentratie L-DOPA (µl)
Afbeelding 1: Michaelis-Menten model verwachting
Afbeelding 2: Linewaever-Burk plot verwachting
Leerjaar 2 Biologie en Medisch Laboratoriumonderzoek MBE
Doel Michaelis Menten Kinetiek
Het Michaelis-Menten model geeft een wiskundige beschrijving van de kinetiek van een
enzymatische reactie. Via dit model kan worden afgeleid of een inhibitor competitief of niet-
competitief remt.
In deze proef zal worden bepaald wat voor soort werking de remmer kojinezuur heeft op het enzym
tyrosinase. Dit kan worden bepaald door middel van de omzetting van L-DOPA naar dopaquinone die
specifiek wordt uitgevoerd door tyrosinase. Dit is namelijk een maat voor de activiteit van het
tyrosinase enzym.
Het is van belang dat er aan de hand van het Michaelis-Menten model ook een Linewaever-Burk plot
wordt gemaakt. Dit is de afgeleide van het Michaelis-Menten model. Bij een hoge
substraatconcentratie nadert de reactiesnelheid het maximum en gedraagt zich dan asymptotisch in
het Michaelis-Menten model. Om een duidelijker beeld te krijgen, wordt deze uitgewerkt naar de
afgeleide.
Verwachting Michaelis Menten Kinetiek en Lineweaver-Burk plot
De verwachtingen van de resultaten staan weergeven in afbeelding 1 en afbeelding 2. De werking
van de remmer kojinezuur wordt onderzocht met deze proef. Het is dus niet bekend of de remmer
competitief of niet-competitief is. De activiteit van een competitieve remmer en een niet-
competitieve is daarom beide weergeven in de verwachtingen. Na het uitvoeren van de proef kan er
een conclusie worden getrokken om welke remmer het gaat aan de hand van de verwachtingen.
Met behulp van resultaten kunnen er later 2 waarden worden berekend waarmee een conclusie kan
worden getrokken over de werking van de remmer. Deze waarden zijn de Vmax en de Km. De Vmax
is de maximale omzettingssnelheid van het enzym. De Km is de waarde waarbij de
substraatconcentratie de helft van de Vmax heeft bereikt.
Bij een competitieve remmer is de Vmax gelijk aan het normale enzym (zonder remmer), maar is de
Km hoger. Bij een niet-competitieve remmer is de Km gelijk aan het normale enzym (zonder
remmer), maar is de Vmax lager. Dit geldt voor het Michaelis-Menten model.
In de Linewaever-Burk plot kruisen de trendlijnen van het normale enzym en het enzym met de
remmer elkaar in de y-as, als er sprake is van een niet-competitieve remmer. Als er een snijpunt op
de x-as is, is er sprake van een competitieve remmer. Aan de hand van deze waarden kan worden
bepaald wat voor remmer kojinezuur is.
Legenda voor afbeelding 1 en afbeelding 2:
Blauw: normale enzym activiteit
Oranje: competitieve inhibitor
Groen: niet-competitieve inhibitor
, Chart Title
Delta A/min
Concentratie L-DOPA (µl)
Afbeelding 1: Michaelis-Menten model verwachting
Afbeelding 2: Linewaever-Burk plot verwachting
