BLOED 1: Bepaling van het erythrocytenaantal & leukocytaire formule
Organisatie:
• Deel 1: Erytrocyten (rode bloedcellen)
- Demo; Geen opdracht
• Deel 2: Leukocyten (witte bloedcellen)
- Demo; Opdracht a.d.h.v. filmpje
• Quotatie
- “Voorkennis bloed 1”: zowel deel 1 als 2 (ppt + cursus)
- Witte bloedcellen: resultaten ingeven in UFORA
- Deadline beiden = zie Ufora
Deel 1: Bepaling van het erythrocytenaantal
Principe en relevantie:
• Tellen v rode bloedcellen (RBC) in de telkamers van Bürker (= linkse foto)
• Hemocytometer: telkamers
- Verdund volbloed brengen in de middelste gleuven van apparaat
- Bekijk dit microscopisch
- Raster aangebracht in de gleuven
o => vierkanten met gekende oppervlak om telling te vergemakkelijken
o => volume kan berekend worden dankzij gekende diepte ( 0,1mm)
o => extrapolatie naar aantal rode bloedcellen per ml volbloed
• Standaard methode, geautomatiseerd (= adhv camera en algoritmen tellen)
• Automatische kwantificatie methoden bestaan
• (Manuele) telmethode ook relevant voor andere domeinen (bv. celculturen)
- Andere toepassingen bv. telling van kankercellen, …
, Monstername en verdunning:
• Bloed afname
- EDTA-coating antistolling
- Coating lost op bij toevoegen van bloed
- EDTA vormt complex met stollingsfactoren
• RBC tellen Verdunnen van volbloed (1/200)
- Niet met water verdunnen => niet meer isotoon!!
- Hayem oplossing
o NaCl isotoniseren
o HgCl2 bewaarmiddel (= geen bacteriële groei / schimmelgroei)
o Na2SO4 antiklontermiddel (= cellen zullen niet adderen aan elkaar)
Telkamers van Bürker vullen:
1) Dekglaasje aanbrengen op de telkamer
- Bevestiging dekglaasje dmv capillaire zuigkracht
o Zone nat maken ter hoogte van de blauwe pijlen
2) Druppel verdund volbloed aanbrengen
- Breng aan ter hoogt van de oranje aangeduide zones
- Verdund volbloed verdeelt zich via capillaire zuigkracht
Praktisch:
1) gecollecteerd volbloed
in EDTA-buisjes opgevangen
2) Volume hiervan nemen
en 200 x verdunnen met
Hayem oplossing
3) Lichtere kleur door
verdunning
4) Natmaken van
inkepingen zodat dekglaasje
op juiste positie + blijft zitten
5) Verdund volbloed in
telkamers aanbrengen, exact
volume onbelangrijk (=
correctie achteraf)
Organisatie:
• Deel 1: Erytrocyten (rode bloedcellen)
- Demo; Geen opdracht
• Deel 2: Leukocyten (witte bloedcellen)
- Demo; Opdracht a.d.h.v. filmpje
• Quotatie
- “Voorkennis bloed 1”: zowel deel 1 als 2 (ppt + cursus)
- Witte bloedcellen: resultaten ingeven in UFORA
- Deadline beiden = zie Ufora
Deel 1: Bepaling van het erythrocytenaantal
Principe en relevantie:
• Tellen v rode bloedcellen (RBC) in de telkamers van Bürker (= linkse foto)
• Hemocytometer: telkamers
- Verdund volbloed brengen in de middelste gleuven van apparaat
- Bekijk dit microscopisch
- Raster aangebracht in de gleuven
o => vierkanten met gekende oppervlak om telling te vergemakkelijken
o => volume kan berekend worden dankzij gekende diepte ( 0,1mm)
o => extrapolatie naar aantal rode bloedcellen per ml volbloed
• Standaard methode, geautomatiseerd (= adhv camera en algoritmen tellen)
• Automatische kwantificatie methoden bestaan
• (Manuele) telmethode ook relevant voor andere domeinen (bv. celculturen)
- Andere toepassingen bv. telling van kankercellen, …
, Monstername en verdunning:
• Bloed afname
- EDTA-coating antistolling
- Coating lost op bij toevoegen van bloed
- EDTA vormt complex met stollingsfactoren
• RBC tellen Verdunnen van volbloed (1/200)
- Niet met water verdunnen => niet meer isotoon!!
- Hayem oplossing
o NaCl isotoniseren
o HgCl2 bewaarmiddel (= geen bacteriële groei / schimmelgroei)
o Na2SO4 antiklontermiddel (= cellen zullen niet adderen aan elkaar)
Telkamers van Bürker vullen:
1) Dekglaasje aanbrengen op de telkamer
- Bevestiging dekglaasje dmv capillaire zuigkracht
o Zone nat maken ter hoogte van de blauwe pijlen
2) Druppel verdund volbloed aanbrengen
- Breng aan ter hoogt van de oranje aangeduide zones
- Verdund volbloed verdeelt zich via capillaire zuigkracht
Praktisch:
1) gecollecteerd volbloed
in EDTA-buisjes opgevangen
2) Volume hiervan nemen
en 200 x verdunnen met
Hayem oplossing
3) Lichtere kleur door
verdunning
4) Natmaken van
inkepingen zodat dekglaasje
op juiste positie + blijft zitten
5) Verdund volbloed in
telkamers aanbrengen, exact
volume onbelangrijk (=
correctie achteraf)
