Methoden in het biofarmaceutisch onderzoek: algemene
1. Inleiding analyse
Het analytisch proces bestaat uit:
a. Vraagstelling:
Algemene vragen omzetten in specifieke vragen
b. Gepaste analytische procedures selecteren:
- Zoeken in chemische literatuur
- Nieuwe procedures bedenken
c. Staalname:
Procedure om representatief homogeen monster voor analyse te
bekomen. Stel dat we met een heterogeen monster zitten:
- We nemen monsters op willekeurige plaatsen (at
random) OF
- Als er verschillende regios zijn in het materiaal (bv 10% tomaat, 20% bananen, 70% kiwi)
dan worden monsters genomen die in verhouding staan met de hoeveelheid waarin de
stoffen voorkomen
De staalname moet bij juiste temperatuur bewaard blijven, kijken hoe stabiel het blijft in
functie van de tijd. Je moet opname van vocht, degradatie, contaminatie vermijden en
controleer ook de interactie met de recipiënt.
d. Staalvoorbereiding:
Het staal in een vorm brengen die geschikt is voor analyse. Dit door:
- Filtreren
- Oplossen
- Solid-phase-extraction
- Interferentie
- Maskeren
e. Analyse:
- Fysicochemische:
o Kleur-, neerslagreacties
o pH-meting
o smelt-, kookpunt
o titraties
OF
, - Instrumentele:
o Spectrofotometrie
o Massaspectrometrie
o Scheidingstechnieken:
▪ Chromatografie (dunnelaag, vloeistof, gas) > is zoals silicagel met
stationaire en mobiele fase.
▪ Capillaire elektroforese
f. Interpreteren van resultaten, rapporteren:
Metingen herhalen, standaardafwijking bepalen, betrouwbaarheid nagaan.
g. Conclusies trekken
2. Metingen
Vroeger was er geen standaardisatie = chaos. Tijdens de Franse revolutie = eerste hervorming. In
1875 > Meter Convention (Parijs) (17 naties). 1948 > Systeme International (SI)
QUANTITY UNIT QUANTITY UNIT
Length Meter [m] Mass Kilogram [kg]
Time Second [s] Electric current Ampere [A]
Temperature Kelvin [K] Luminous intensity Candela [cd]
Amount of substance Mole [mol] Plane angle Radian [rad]
Solid angle Steradian [sr]
Afgeleide SI eenheden
QUANTITY UNIT QUANTITY UNIT
Frequency Hertz [Hz] Force Newton [N]
Pressure Pascal [Pa] [N/m2] Energy, work, quantity Joule [J] [N . m]
of heat
Power, radiant flux Watt [W] [J/s] Quantity of electricity, Coulomb [C]
electric charge
Electric potential, Volt [V] [W/A] Electric resistance Ohm [Ω] [V/A]
potential difference,
electromotive force
Electric capacitance Farad [F] [C/V]
Kilogram = het enige prototype dat geijkt wordt op een voorwerp, verliest telkens een beetje
gewicht. Is dus niet ideaal. Sinds 20/05/2019 is er een nieuwe definitie op basis van de constante van
Planck. In bijna elk land is er een Nationaal Metrologisch Instituut. In België: Metrologische dienst
Opdracht = standaard eenheden onderhouden en verspreiden
Tera T Giga G 109
1012
Mega M 106 Kilo k 103
Hector h 102 Deca da 101
Deci d Centi c
10-1 10-2
Milli m Micro y
10-3 10-6
Nano n Pico p
10-9 10-12
Femto f
10-15
,ZIE EXTRA PAPIER VOOR DE CONVERSIE VAN EENHEDEN !!!!!!!!!!!!!!
Elektroliet = een substantie die in oplossing dissocieert in ionen
- Sterk elektroliet = grotendeels gedissocieerd (= zoals een sterk zuur)
- Zwak elektroliet = grootste deel is niet gedissocieerd
Mv x V v = Mn x V n
0x H2O Anhydrisch 2x H2O Dihydraat
3x H2O Trihydraat 4x H2O Tertahydraat
5x H2O Pentahydraat 6x H2O Hexahydraat
7x H2O Heptahydraat 8x H2O Octahydraat
9x H2O Nonahydraat 10x H2O Decahydraat
Fe2+ = FERRO-ionen Fe3+ = FERRI-ionen
<< 100% overmaat betekent 2x de stoechiometrische hoeveelheid >>
3. Instrumentarium
Jezelf beschermen door
- Veiligheidsbril met zijschermpjes, geen contactlenzen (stoffen kunnen tussen lens en oog
blijven zitten)
- Labojas, moet brandwerend zijn
- Mondmasker, bij manipulatie van gevaarlijke poeders
- Handschoenen, van latex
- Geen losse haren
- Niet eten of drinken
- Organische solvent, geconcentreerde zuren en ammonia in de
zuurkast Sinds 2011; H(azard) en P(recautionary) zinnen
GHS-statements = wijze van indeling, kenmerking en etikettering van chemische stoffen
HXYY:
- H = hazard = gevaar
- X = gevarenklasse: 2 = fysische gevaren, 3 = gezondheidsgevaren, 4 = milieugevaren
- YY: 200 – 210 = explosiviteit, 220 – 230 = brandbaarheidsgevaar, 300 – 310 = acute
giftigheid
PXYY:
- P = precaution = voorzorg
- X = veiligheidsaanbevelingen: 1 = algemeen, 2 = preventie, 3 = reactie, 4 = opslag, 5 =
verwijdering
, - YY = nummer van zin binnen een bepaalde groep
GHS01 – GHS04 = fysische gevaren
Oxideren = brandbevorderend
= ontvlambaar
GHS05 – GHS08 =
gezondheidsgevaren
GHS09 = milieugevaar
AFVAL SORTEREN
Categorie Omschrijving Kleurcode
1 Zure anorganische vloeistoffen Wit
2 Basische anorganische vloeistoffen Zwart
3 Niet-gehalogeneerde organische vloeistoffen Rood
4 Gehalogeneerde organische vloeistoffen Groen
5 Bijzondere vloeistoffen (zeer giftig, carcinogene Oranje
stoffen, afvaloliën, …)
Laboboek:
- Naam experiment
- Datum
- Waarnemingen
- Afgewogen massa
- Berekeningen en wat hiervoor nodig is
- Alles beknopt weergeven + in engels want meerdere mensen zullen hiermee werken, dus
ook duidelijk
- Geen losse papieren
Balansen:
Microbalans Analytische balans Bovenweger
Weegcapaciteit 2 – 20 g 100 – 200 g 1000 – 6000 g
Gevoeligheid 0,1 – 1 yg 0,01 – 0,1 mg 0,01 – 0,1 g
1. Inleiding analyse
Het analytisch proces bestaat uit:
a. Vraagstelling:
Algemene vragen omzetten in specifieke vragen
b. Gepaste analytische procedures selecteren:
- Zoeken in chemische literatuur
- Nieuwe procedures bedenken
c. Staalname:
Procedure om representatief homogeen monster voor analyse te
bekomen. Stel dat we met een heterogeen monster zitten:
- We nemen monsters op willekeurige plaatsen (at
random) OF
- Als er verschillende regios zijn in het materiaal (bv 10% tomaat, 20% bananen, 70% kiwi)
dan worden monsters genomen die in verhouding staan met de hoeveelheid waarin de
stoffen voorkomen
De staalname moet bij juiste temperatuur bewaard blijven, kijken hoe stabiel het blijft in
functie van de tijd. Je moet opname van vocht, degradatie, contaminatie vermijden en
controleer ook de interactie met de recipiënt.
d. Staalvoorbereiding:
Het staal in een vorm brengen die geschikt is voor analyse. Dit door:
- Filtreren
- Oplossen
- Solid-phase-extraction
- Interferentie
- Maskeren
e. Analyse:
- Fysicochemische:
o Kleur-, neerslagreacties
o pH-meting
o smelt-, kookpunt
o titraties
OF
, - Instrumentele:
o Spectrofotometrie
o Massaspectrometrie
o Scheidingstechnieken:
▪ Chromatografie (dunnelaag, vloeistof, gas) > is zoals silicagel met
stationaire en mobiele fase.
▪ Capillaire elektroforese
f. Interpreteren van resultaten, rapporteren:
Metingen herhalen, standaardafwijking bepalen, betrouwbaarheid nagaan.
g. Conclusies trekken
2. Metingen
Vroeger was er geen standaardisatie = chaos. Tijdens de Franse revolutie = eerste hervorming. In
1875 > Meter Convention (Parijs) (17 naties). 1948 > Systeme International (SI)
QUANTITY UNIT QUANTITY UNIT
Length Meter [m] Mass Kilogram [kg]
Time Second [s] Electric current Ampere [A]
Temperature Kelvin [K] Luminous intensity Candela [cd]
Amount of substance Mole [mol] Plane angle Radian [rad]
Solid angle Steradian [sr]
Afgeleide SI eenheden
QUANTITY UNIT QUANTITY UNIT
Frequency Hertz [Hz] Force Newton [N]
Pressure Pascal [Pa] [N/m2] Energy, work, quantity Joule [J] [N . m]
of heat
Power, radiant flux Watt [W] [J/s] Quantity of electricity, Coulomb [C]
electric charge
Electric potential, Volt [V] [W/A] Electric resistance Ohm [Ω] [V/A]
potential difference,
electromotive force
Electric capacitance Farad [F] [C/V]
Kilogram = het enige prototype dat geijkt wordt op een voorwerp, verliest telkens een beetje
gewicht. Is dus niet ideaal. Sinds 20/05/2019 is er een nieuwe definitie op basis van de constante van
Planck. In bijna elk land is er een Nationaal Metrologisch Instituut. In België: Metrologische dienst
Opdracht = standaard eenheden onderhouden en verspreiden
Tera T Giga G 109
1012
Mega M 106 Kilo k 103
Hector h 102 Deca da 101
Deci d Centi c
10-1 10-2
Milli m Micro y
10-3 10-6
Nano n Pico p
10-9 10-12
Femto f
10-15
,ZIE EXTRA PAPIER VOOR DE CONVERSIE VAN EENHEDEN !!!!!!!!!!!!!!
Elektroliet = een substantie die in oplossing dissocieert in ionen
- Sterk elektroliet = grotendeels gedissocieerd (= zoals een sterk zuur)
- Zwak elektroliet = grootste deel is niet gedissocieerd
Mv x V v = Mn x V n
0x H2O Anhydrisch 2x H2O Dihydraat
3x H2O Trihydraat 4x H2O Tertahydraat
5x H2O Pentahydraat 6x H2O Hexahydraat
7x H2O Heptahydraat 8x H2O Octahydraat
9x H2O Nonahydraat 10x H2O Decahydraat
Fe2+ = FERRO-ionen Fe3+ = FERRI-ionen
<< 100% overmaat betekent 2x de stoechiometrische hoeveelheid >>
3. Instrumentarium
Jezelf beschermen door
- Veiligheidsbril met zijschermpjes, geen contactlenzen (stoffen kunnen tussen lens en oog
blijven zitten)
- Labojas, moet brandwerend zijn
- Mondmasker, bij manipulatie van gevaarlijke poeders
- Handschoenen, van latex
- Geen losse haren
- Niet eten of drinken
- Organische solvent, geconcentreerde zuren en ammonia in de
zuurkast Sinds 2011; H(azard) en P(recautionary) zinnen
GHS-statements = wijze van indeling, kenmerking en etikettering van chemische stoffen
HXYY:
- H = hazard = gevaar
- X = gevarenklasse: 2 = fysische gevaren, 3 = gezondheidsgevaren, 4 = milieugevaren
- YY: 200 – 210 = explosiviteit, 220 – 230 = brandbaarheidsgevaar, 300 – 310 = acute
giftigheid
PXYY:
- P = precaution = voorzorg
- X = veiligheidsaanbevelingen: 1 = algemeen, 2 = preventie, 3 = reactie, 4 = opslag, 5 =
verwijdering
, - YY = nummer van zin binnen een bepaalde groep
GHS01 – GHS04 = fysische gevaren
Oxideren = brandbevorderend
= ontvlambaar
GHS05 – GHS08 =
gezondheidsgevaren
GHS09 = milieugevaar
AFVAL SORTEREN
Categorie Omschrijving Kleurcode
1 Zure anorganische vloeistoffen Wit
2 Basische anorganische vloeistoffen Zwart
3 Niet-gehalogeneerde organische vloeistoffen Rood
4 Gehalogeneerde organische vloeistoffen Groen
5 Bijzondere vloeistoffen (zeer giftig, carcinogene Oranje
stoffen, afvaloliën, …)
Laboboek:
- Naam experiment
- Datum
- Waarnemingen
- Afgewogen massa
- Berekeningen en wat hiervoor nodig is
- Alles beknopt weergeven + in engels want meerdere mensen zullen hiermee werken, dus
ook duidelijk
- Geen losse papieren
Balansen:
Microbalans Analytische balans Bovenweger
Weegcapaciteit 2 – 20 g 100 – 200 g 1000 – 6000 g
Gevoeligheid 0,1 – 1 yg 0,01 – 0,1 mg 0,01 – 0,1 g
