Immunologie
Inleiding
Antigen (Ag) Antilichaam (AL)
Zorgt voor herkenning Immunoglobuline (Ig)
lichaamsvreemde stof
Antistof
Virussen, bacteriën
Antibody (Ab)
Specifiek
Polyklonale Ab
Monoklonale Ab
Binding, Ag-Ab complex
Gemaakt door B-cellen
Plasmacellen
Parathoop v AL reageert met eptoop van ag. Dit is een polyklonaal anti-serum
Polyklonale antilichamen: te gelijk van structuur om te
fractioneren
Monoklonale antilichamen: isolatie van plasmacellen uit het
proefdier + fusie met myelomacellen tot hybridoma-cellen
productie van 1 antilichaam gericht tegen 1 epitoop (= 1
antigene deteminant)
1
, Hybridoomtechnologie = het proces om monoklonale antilichamen te produceren:
Start met muis die ag heeft binnengekregen en reageert erop. De b-cellen w
plasmacellen, ze gaan de milt eruit halen en daaruit die plasmacellen extraheren.
De plasmacellen werden eruit gehaald en reageren met myelomacellen
(woekerende plasmacellen, vorm van kankercel)
We laten ze fusioneren tot een hybridomacel. Deze kunnen we onderscheiden v
andere omdat we een specifiek medium gebruiken. (HAT)
Dit kweken we op in HAT medium en de cellen dat interessant zijn voor ons zullen
we een cultuur gaan opzetten van deze waarin wij geïnteresseerd zijn
C kan op 2 manieren bouwstenen vr DNA, RNA aanmaken: =novo synthese /
Salvage pathway
5 essentiële stappen:
1) Immunisatie
2) Isolatie plasmacel
3) Onsterfelijk maken v plasmacellen
4) Selecteren
5) Produceren
dUMP = deoxy uridine monophosphate
dTMP = deoxy thymidine monophosphate
TK = thymidine kinase
HGPRT = hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase
Antifolaat: blokkeert de normale weg (novo synthese) (ofwel thymidine en hypoxanthine uit medium2halen)
Inleiding
Antigen (Ag) Antilichaam (AL)
Zorgt voor herkenning Immunoglobuline (Ig)
lichaamsvreemde stof
Antistof
Virussen, bacteriën
Antibody (Ab)
Specifiek
Polyklonale Ab
Monoklonale Ab
Binding, Ag-Ab complex
Gemaakt door B-cellen
Plasmacellen
Parathoop v AL reageert met eptoop van ag. Dit is een polyklonaal anti-serum
Polyklonale antilichamen: te gelijk van structuur om te
fractioneren
Monoklonale antilichamen: isolatie van plasmacellen uit het
proefdier + fusie met myelomacellen tot hybridoma-cellen
productie van 1 antilichaam gericht tegen 1 epitoop (= 1
antigene deteminant)
1
, Hybridoomtechnologie = het proces om monoklonale antilichamen te produceren:
Start met muis die ag heeft binnengekregen en reageert erop. De b-cellen w
plasmacellen, ze gaan de milt eruit halen en daaruit die plasmacellen extraheren.
De plasmacellen werden eruit gehaald en reageren met myelomacellen
(woekerende plasmacellen, vorm van kankercel)
We laten ze fusioneren tot een hybridomacel. Deze kunnen we onderscheiden v
andere omdat we een specifiek medium gebruiken. (HAT)
Dit kweken we op in HAT medium en de cellen dat interessant zijn voor ons zullen
we een cultuur gaan opzetten van deze waarin wij geïnteresseerd zijn
C kan op 2 manieren bouwstenen vr DNA, RNA aanmaken: =novo synthese /
Salvage pathway
5 essentiële stappen:
1) Immunisatie
2) Isolatie plasmacel
3) Onsterfelijk maken v plasmacellen
4) Selecteren
5) Produceren
dUMP = deoxy uridine monophosphate
dTMP = deoxy thymidine monophosphate
TK = thymidine kinase
HGPRT = hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase
Antifolaat: blokkeert de normale weg (novo synthese) (ofwel thymidine en hypoxanthine uit medium2halen)