Chapter 1: Basics Of Light Microscopy
à Leg de golfeigenschappen van licht uit (reflectie, refractie, diffractie)
à Oefening met de lenzenformule en vergroting
à Verklaar de term resolutie
Chapter 2: Fluorescence Microscopy
à Leg fluorescentie uit met het Jabolenski diagram
Chapter 3: Imaging Cellular Dynamics
à Omschrijf kort de verschillende technieken die gebruik maken van
fotobleaching en geef de verschillen (FRAP, iFRAP, FLIP, FLIM, FRET, FCS)
Chapter 4: High-throughput Microscopy
à Verklaar screening en profiling en geef enkele toepassingen
à Geef de voordelen van genome-wide studies
à Geef enkele toepassingen van high-throughput microscopy
à Leg uit: RGB-marking / Lifetime unmixing / Toponomics + toepassing
Chapter 5: Super-Resolution
à Geef enkele klassieke technieken die de resolutie verbeteren en superresolutie
technieken en geef het verschil aan tussen beide soorten technieken
Chapter 6: Deep Tissue Imaging
à Geef het principe van MPE + voor- en nadelen
à Bespreek LSFM
Chapter 7: Molecular-Scale Imaging
à Geef de electron-specimen interacties eventueel met verduidelijkende tekening
à Bespreek TEM
à Bespreek SEM
à Bespreek AFM
Chapter 8: Image Acquisition & Analysis
à Bespreek de werking van een PMT
à Leg uit: CCD image sensor werking
Examenvragen 2016-2017
, Deel van Winnok (op 25 punten)
A. Korte vragen:
1. Wat is/bepaalt de PSF (point spread function) bij een confocale microscoop? (1
punt)
2. Infinity corrected objectief? Wat zijn de voordelen? (2 ptn)
3. Wanneer ontstaat alliancing? (1 punt)
4. Waarvoor dienen backscattered en secundaire elektronen bij SEM. Wat kan men
hiermee waarnemen? (2 ptn)
5. Vul aan. Indien je bij een fluorescentie microscoop een hoge NA zal dit zorgen voor
een :
a. Grotere...
b. Hogere...
c. Maar een kleinere…
B. Open vragen :
1) A. Hij geeft een grafiek van FCS met curve a en curve b. Wat is het verschil van b
tegenover a? Welke conclusies kun je hieruit halen? Verklaar. (6 ptn) B. Welk
alternatief ken je nog hiervoor? Bespreek.
2) Hij gaf die foto van hoofdstuk 8 (zie slide optics vs digitization). Je moet die
horizontale en verticale termen aanvullen. En bij elke term een vb geven hoe men
dat kan aanpassen. (4 ptn)
C. MCQ :
1. Aan welke eigenschappen moeten donor en acceptor niet voldoen om FRET te
ondergaan?
A. Ze moeten op een afstand kleiner dan 10 nm van elkaar bevinden
B. Er moet een overlap zijn tussen donor emissiespectrum en acceptor
absorptiespectrum
C. Ze moeten juist georiënteerd zijn tov elkaar
D. Donor geeft zijn fluorescentie over aan acceptor ofzoiets
E. Iets me lifetime verkort van donor...
2. Van welke factor kan men niet met zekerheid zeggen dat het de
beeldvormingsdiepte (penetratie diepte) zal doen toenemen?
A. Blockface
B. Light sheet microscopy
C. Rode label gebruiken
D. Multi photon
E. Chemische klaring
3. Men wil een GFP gekoppeld proteine lokaliseren in de tijd. Met welke techniek kan
men de resolutie verbeteren met zo minimaal mogelijk foto-toxyciteit?
A. Merker kleur vervangen door rood (cherry iets)