BIOTECHNOLOGIE
BIOTECHNOLOGIE
LAB
2FBT – AJ 2025-26
, BIOTECHNOLOGIE
Formules
Verdunningen
C1*V1=C2*V2
- C₁ = stockconcentratie
- V₁ = stockvolume
- C₂ = gewenste concentratie
- V₂ = eindvolume
DNA-concentratie
Nanofotometer:
A260 = DNA
1 OD260=50 µg/mL dsDNA → DNA = A260* 50 (*DF)
1 OD260=38 µg/mL ssDNA → DNA = A260* 38
1 OD260=40 µg/mL ssRNA → RNA = A260* 40
Totale opbrengst (µg) = [DNA] * Vtotaal
Massa1DNA template= (# bp* 650g/mol)/ 6,022*1023
Zuiverheid DNA
A280= eiwitten
A230= organische verbindingen en zouten
A260 / A280
Voor DNA: 1.8-2.0
Voor RNA: >2.0
A260 / A230
Voor DNA: 2.0-2.2
Voor RNA: 2.0-2.4
PCR
Tm = 4*(G+C)+2*(A+T)
Tm (>18nt)= 64,9+ 41*[(#GC-16,4)/ totaal # nt]
Ta= Tm- 3 tot 5°C
Mr primer= [(#A=313,22)+(#C* 298,18)+(#G*329,22)+ (#T*304,21)] + 18
BIOTECHNOLOGIE
LAB
2FBT – AJ 2025-26
, BIOTECHNOLOGIE
Formules
Verdunningen
C1*V1=C2*V2
- C₁ = stockconcentratie
- V₁ = stockvolume
- C₂ = gewenste concentratie
- V₂ = eindvolume
DNA-concentratie
Nanofotometer:
A260 = DNA
1 OD260=50 µg/mL dsDNA → DNA = A260* 50 (*DF)
1 OD260=38 µg/mL ssDNA → DNA = A260* 38
1 OD260=40 µg/mL ssRNA → RNA = A260* 40
Totale opbrengst (µg) = [DNA] * Vtotaal
Massa1DNA template= (# bp* 650g/mol)/ 6,022*1023
Zuiverheid DNA
A280= eiwitten
A230= organische verbindingen en zouten
A260 / A280
Voor DNA: 1.8-2.0
Voor RNA: >2.0
A260 / A230
Voor DNA: 2.0-2.2
Voor RNA: 2.0-2.4
PCR
Tm = 4*(G+C)+2*(A+T)
Tm (>18nt)= 64,9+ 41*[(#GC-16,4)/ totaal # nt]
Ta= Tm- 3 tot 5°C
Mr primer= [(#A=313,22)+(#C* 298,18)+(#G*329,22)+ (#T*304,21)] + 18
