Naam: Bregje Vanlanduyt Jaar: 2022-2023
Klas: 1BTLA
ELISA: antilichaamdetectie van humaan staal (serum)
1.Doel
Antilichamen tegen SARS-CoV-2 in een menselijk serum detecteren volgens:
het principe van ELISA.
2. Principe [1]
Figuur 1: principe ELISA [1]
1. Antigenen worden aan cupjes van een vaste drager geïncubeerd.
2. Het patiënte staal wordt toegevoegd aan de cupjes. Indien er primaire antilichamen
aanwezig zijn zullen deze binden aan de anigenen.
3. Toevoeging van een conjugaat: monoklonale antilichamen, gebonden aan een enzym
en gericht tegen de primaire antilichamen zullen binden.
4. Een substraat wordt toegevoegd: het enzym uit het conjugaat zal het substraat
omzetten naar een blauwe kleur
Tussen stap 1-3 worden de overtollige fracties telkens weggewassen.
, 3. Benodigdheden [1]
- Gele tubes: staal A → nr. 141
staal B → nr.151
- Groene tube: COVID-antigen
- Oranje tube: conjugaat → ani-humaan immunoglobuline gecjonjugeerd met
Horseradish Peroxidase
- Paarse tube: positieve controle
- Blauwe tube: negatieve controle
- Bruine tube: substraat
- Wasbuffer
- Strip met 12 cupjes
4. Gebruikte toestel
- Micropipet: L328-050
5. Referentiewaarden [1]
- Blauwe kleur: antilichamen aanwezig in serum → positief
- Geen kleurverandering: gaan antilichamen aanwezig in serum → negatief
6. Resultaten
Figuur 2: resultaten ELISA 141 151
7. Besluit
Zoals verwacht zijn de resultaten van de positieve en negatieve controle correct. Er is dus
geen contaminatie gebeurt. Verder zijn er ook geen stoffen vergeten toe te voegen aan de
wells. Je kan aan de kleurverandering bij je eerste drie cupjes duidelijk zien dat dit de
positieve resultaten zijn. Bij de cupjes 4 tot en met 6 zijn de negatieve cupjes duidelijk
kleurloos en dus effectief negatief
In de cupjes met staal A of nr. 141 is diezelfde kleurverandering zichtbaar, waardoor men
dus weet dat deze patiënt positief is. Dit wil dus zeggen dat deze patiënt antilichamen heeft
aangemaakt tegen SARS-CoV-2 door middel van besmetting of vaccinatie.
Klas: 1BTLA
ELISA: antilichaamdetectie van humaan staal (serum)
1.Doel
Antilichamen tegen SARS-CoV-2 in een menselijk serum detecteren volgens:
het principe van ELISA.
2. Principe [1]
Figuur 1: principe ELISA [1]
1. Antigenen worden aan cupjes van een vaste drager geïncubeerd.
2. Het patiënte staal wordt toegevoegd aan de cupjes. Indien er primaire antilichamen
aanwezig zijn zullen deze binden aan de anigenen.
3. Toevoeging van een conjugaat: monoklonale antilichamen, gebonden aan een enzym
en gericht tegen de primaire antilichamen zullen binden.
4. Een substraat wordt toegevoegd: het enzym uit het conjugaat zal het substraat
omzetten naar een blauwe kleur
Tussen stap 1-3 worden de overtollige fracties telkens weggewassen.
, 3. Benodigdheden [1]
- Gele tubes: staal A → nr. 141
staal B → nr.151
- Groene tube: COVID-antigen
- Oranje tube: conjugaat → ani-humaan immunoglobuline gecjonjugeerd met
Horseradish Peroxidase
- Paarse tube: positieve controle
- Blauwe tube: negatieve controle
- Bruine tube: substraat
- Wasbuffer
- Strip met 12 cupjes
4. Gebruikte toestel
- Micropipet: L328-050
5. Referentiewaarden [1]
- Blauwe kleur: antilichamen aanwezig in serum → positief
- Geen kleurverandering: gaan antilichamen aanwezig in serum → negatief
6. Resultaten
Figuur 2: resultaten ELISA 141 151
7. Besluit
Zoals verwacht zijn de resultaten van de positieve en negatieve controle correct. Er is dus
geen contaminatie gebeurt. Verder zijn er ook geen stoffen vergeten toe te voegen aan de
wells. Je kan aan de kleurverandering bij je eerste drie cupjes duidelijk zien dat dit de
positieve resultaten zijn. Bij de cupjes 4 tot en met 6 zijn de negatieve cupjes duidelijk
kleurloos en dus effectief negatief
In de cupjes met staal A of nr. 141 is diezelfde kleurverandering zichtbaar, waardoor men
dus weet dat deze patiënt positief is. Dit wil dus zeggen dat deze patiënt antilichamen heeft
aangemaakt tegen SARS-CoV-2 door middel van besmetting of vaccinatie.
