Hydrolase
Les 5 -Elk enzyme dat een verbinding hydrolyseert
Spijsverteringsenzymen Verbinding verbreken dmv opname
Hydrolase van water
A-amylase • Classificatie: aard v/d verbinding die
Lipase gehydrolyseerd wordt
• Klinisch relevante hydrolasen:
Spijsverteringsenzymen: lipase,
amylase, (chemo-)trypsine
Zure en alkalische fosfatase
Cholinesterase
α-amylase
Functie: polysachariden hydrolyseren naar monosacchariden
2 relevante isovormen:
• S(peeksel) amylase
• P(ancreas) amylase
Zeer klein enzym uitscheiding in urine(<->niet bij Macro-amylase +
nieraandoeningen)
macro-amylase
immuuncomplexen gevormd met amylase (vnl. de S-isovorm).
klinisch niet relevant (geen ernstige ziektebeelden), maar deze vorm kan niet
gesecreteerd worden via urine hogere concentratie amylase in bloed; secretie
volledig gebaseerd op Reticulo-endotheliale systeem
In vivo reactie
• Primaire substraten: zetmeel en glycogeen
Vervolg
• Hydrolyseert 1,4-α-D-glycosidische bindingen
Inhibitie:
<-> inactief op 1,6-α-D-glycosidische bindingen
-door chelators
• pH-optimum: 6,9 – 7
• EDTA, citraat, oxalaat Verwijderen Ca-ionen/ Mg
• Co-factoren: Ca-ionen en Cl-ionen
Activatie: (kit met activator)
• Cl- en Br-ionen
, • Verhoogde amylasewaarden:
-Aandoeningen van de pancreas:
*Pancreatitis
*Ulcus van de pancreas
-Aandoeningen van de speekselklieren
*Bof
-Gastro-intestinale problemen
*galstenen
* darmobstructies
-Kankers
, Lipase
Functie: Triglyceriden afbreken tot vetzuren + glycerolmolecule.
->25% van geconsumeerde vetten wordt 100% omgezet tot FFA en
glycerolmoleculen
Pancreas enzym: glycoproteïne
In vivo reactie
Lipase hydrolyseert esterbindingen van triglyceride, gevolgd door
isomerisatie, tot glycerol en vrije vetzuren
Belangrijke factoren:
Galzouten
• Verminderd interactie lipase met andere proteïnen
• Vormen micellen met hydrofobisch substraat
Lipase (waterig milieu) kan inwerken op water/olie-grensvlak
Co-lipase
• Stabiliseert lipase en hecht lipase op micel
• Beperkt inhiberende effecten van galzouten
Ca2+
• Stabilisatie van lipase
Bepalingsmethode (turbimetrische methode of spectrofotometrische
methode)
-Turbidimetrische methode
-Metingen zijn sterk afhankelijk van spectrofotometer (en instellingen)
->Calibrator (factorbepaling) en controles zijn vereist
Les 5 -Elk enzyme dat een verbinding hydrolyseert
Spijsverteringsenzymen Verbinding verbreken dmv opname
Hydrolase van water
A-amylase • Classificatie: aard v/d verbinding die
Lipase gehydrolyseerd wordt
• Klinisch relevante hydrolasen:
Spijsverteringsenzymen: lipase,
amylase, (chemo-)trypsine
Zure en alkalische fosfatase
Cholinesterase
α-amylase
Functie: polysachariden hydrolyseren naar monosacchariden
2 relevante isovormen:
• S(peeksel) amylase
• P(ancreas) amylase
Zeer klein enzym uitscheiding in urine(<->niet bij Macro-amylase +
nieraandoeningen)
macro-amylase
immuuncomplexen gevormd met amylase (vnl. de S-isovorm).
klinisch niet relevant (geen ernstige ziektebeelden), maar deze vorm kan niet
gesecreteerd worden via urine hogere concentratie amylase in bloed; secretie
volledig gebaseerd op Reticulo-endotheliale systeem
In vivo reactie
• Primaire substraten: zetmeel en glycogeen
Vervolg
• Hydrolyseert 1,4-α-D-glycosidische bindingen
Inhibitie:
<-> inactief op 1,6-α-D-glycosidische bindingen
-door chelators
• pH-optimum: 6,9 – 7
• EDTA, citraat, oxalaat Verwijderen Ca-ionen/ Mg
• Co-factoren: Ca-ionen en Cl-ionen
Activatie: (kit met activator)
• Cl- en Br-ionen
, • Verhoogde amylasewaarden:
-Aandoeningen van de pancreas:
*Pancreatitis
*Ulcus van de pancreas
-Aandoeningen van de speekselklieren
*Bof
-Gastro-intestinale problemen
*galstenen
* darmobstructies
-Kankers
, Lipase
Functie: Triglyceriden afbreken tot vetzuren + glycerolmolecule.
->25% van geconsumeerde vetten wordt 100% omgezet tot FFA en
glycerolmoleculen
Pancreas enzym: glycoproteïne
In vivo reactie
Lipase hydrolyseert esterbindingen van triglyceride, gevolgd door
isomerisatie, tot glycerol en vrije vetzuren
Belangrijke factoren:
Galzouten
• Verminderd interactie lipase met andere proteïnen
• Vormen micellen met hydrofobisch substraat
Lipase (waterig milieu) kan inwerken op water/olie-grensvlak
Co-lipase
• Stabiliseert lipase en hecht lipase op micel
• Beperkt inhiberende effecten van galzouten
Ca2+
• Stabilisatie van lipase
Bepalingsmethode (turbimetrische methode of spectrofotometrische
methode)
-Turbidimetrische methode
-Metingen zijn sterk afhankelijk van spectrofotometer (en instellingen)
->Calibrator (factorbepaling) en controles zijn vereist
