Eerstelijnscontrole van een analyse
Analyse v stalen voor calibratiecurve en onbekende stalen
Analyse extra stalen gerund op toestel
Nagaan of opzuivering en analyse op LC-MS correct is verlopen
Injecties:
- Eerste injectie: standaardmix
Standaardmix: bevat injectiesolven met daarin ochratoxine A en
zearalanone
!! indien 1 van de 2 componenten onzichtbaar / retentietijden zijn
niet in orde
Probleem kan bij toestel liggen: - mobiele fase
- kolom
- MS-methode
- LC-methode
Probleem kan bij standaardmix liggen
!! altijd eerst test-run doen en resultaten analyseren om te weten of
probleem weg is
- Tweede injectie: injectiesolvent
Injectiesolvent: bevat geen componenten, mag geen piek geven
!! indien duidelijke piek aanwezig ( bv van ochratoxine A)
Er kan carry-over zijn van de component
o Carry-over: component is niet volledig van kolom gegaan,
hierdoor kan je bij volgende run nog restanten zien
o Oplossing: gradiënt HP-LC aanpassen, langere spoeling
Er kan contaminatie zijn opgetreden tijdens opzuivering
o Kan optreden bij gebruik van foute pipet-tips
o Oplossing: solvent opnieuw maken
, - Derde injectie: blanco
Blanco: bevat interne standaard ( ZAN), zou geen ochratoxine A
mogen bevatten
!! indien blanco wel ochratoxine A bevat
Er kan een fout tijdens de analyse optreden: - rare resultaten
onbekende
- foutieve ijklijn
- fout controle staal
o Oplossing: hele analyse hernemen
Er kan natuurlijke contaminatie van blanco optreden
o Natuurlijke contaminatie: blanco waar calibratiecurve uit
opstelt, bevat van nature ochratoxine A (= bv. Patiënt at dag
voordien iets beschimmeld)
o Bij opstelling calibratiecurve zal telkens extra ochratoxine A
toegevoegd worden, bovenop de
natuurlijke hoeveelheid
o Oplossing: calibratiecurve aanpassen
** door hoeveelheid ochratoxine in blanco zal elk
punt hoger liggen (= rode lijn) dan verwacht.
** corrigeer elk punt, door curve door 0 te
forceren, elk punt reduceren met deze waarde (=
zwarte lijn)
- Vierde injectie: stalen voor de calibratiecurve
Calibratiecurve moet correlatiecoëfficiënt R > 0,95 hebben
!! indien correlatiecoëfficiënt < 0,95
Er kan een fout zitten in de belasting: - matrixbelasting
- overbelasting van detector
- overbelasting van kolom
- fout aantal calibratiepunten
o Oplossing: spoor fout op (= volledige analyse, standaard
gebruik,..) en herneem volledige analyse
Er kan een fout gebeurd zijn tijdens de opzuivering
Analyse v stalen voor calibratiecurve en onbekende stalen
Analyse extra stalen gerund op toestel
Nagaan of opzuivering en analyse op LC-MS correct is verlopen
Injecties:
- Eerste injectie: standaardmix
Standaardmix: bevat injectiesolven met daarin ochratoxine A en
zearalanone
!! indien 1 van de 2 componenten onzichtbaar / retentietijden zijn
niet in orde
Probleem kan bij toestel liggen: - mobiele fase
- kolom
- MS-methode
- LC-methode
Probleem kan bij standaardmix liggen
!! altijd eerst test-run doen en resultaten analyseren om te weten of
probleem weg is
- Tweede injectie: injectiesolvent
Injectiesolvent: bevat geen componenten, mag geen piek geven
!! indien duidelijke piek aanwezig ( bv van ochratoxine A)
Er kan carry-over zijn van de component
o Carry-over: component is niet volledig van kolom gegaan,
hierdoor kan je bij volgende run nog restanten zien
o Oplossing: gradiënt HP-LC aanpassen, langere spoeling
Er kan contaminatie zijn opgetreden tijdens opzuivering
o Kan optreden bij gebruik van foute pipet-tips
o Oplossing: solvent opnieuw maken
, - Derde injectie: blanco
Blanco: bevat interne standaard ( ZAN), zou geen ochratoxine A
mogen bevatten
!! indien blanco wel ochratoxine A bevat
Er kan een fout tijdens de analyse optreden: - rare resultaten
onbekende
- foutieve ijklijn
- fout controle staal
o Oplossing: hele analyse hernemen
Er kan natuurlijke contaminatie van blanco optreden
o Natuurlijke contaminatie: blanco waar calibratiecurve uit
opstelt, bevat van nature ochratoxine A (= bv. Patiënt at dag
voordien iets beschimmeld)
o Bij opstelling calibratiecurve zal telkens extra ochratoxine A
toegevoegd worden, bovenop de
natuurlijke hoeveelheid
o Oplossing: calibratiecurve aanpassen
** door hoeveelheid ochratoxine in blanco zal elk
punt hoger liggen (= rode lijn) dan verwacht.
** corrigeer elk punt, door curve door 0 te
forceren, elk punt reduceren met deze waarde (=
zwarte lijn)
- Vierde injectie: stalen voor de calibratiecurve
Calibratiecurve moet correlatiecoëfficiënt R > 0,95 hebben
!! indien correlatiecoëfficiënt < 0,95
Er kan een fout zitten in de belasting: - matrixbelasting
- overbelasting van detector
- overbelasting van kolom
- fout aantal calibratiepunten
o Oplossing: spoor fout op (= volledige analyse, standaard
gebruik,..) en herneem volledige analyse
Er kan een fout gebeurd zijn tijdens de opzuivering
