samenvatting labo levensmiddelenmicrobiologie

THEORIE LABO
LEVENSMIDDELENMICROBIOLOGIE
HOOFDSTUK 1: KWANTITATIEVE ANALYSE VAN HET AANTAL MICRO-ORGANISMEN IN
VOEDING

INLEIDING:
Methode voor overzicht aantal bacteriën:
 Rechtstreekse microscopische telling (BREED)
 Bepaling van aantal kweekbare MO volgens de plaatmethode
 Bepaling van MPN (Most Probable Number)

BREED: PLAATMETHODE: MPN:
Alleen vloeibare stalen Vaste en vloeibare stalen Vaste en vloeibare stalen
Toepasselijk bij groot aantal MO Klein & groot aantal MO Klein & groot aantal MO
Telt dode & levende MO Telt aantal kweekbare MO: Meest waarschijnlijke aantal:
directe telling van het aantal berekening na enting van een
kolonies op vaste VB = kiemgetal reeks vloeibare VB = kiemgetal
Geen incubatie nodig Overnacht incubatie Overnacht incubatie
Snelle methode

DE BEPALING VAN HET AANTAL BACTERIËN VOLGENS BREED:


PRINCIPE:

- Staal op voorwerpglaasje  uitspreiden
- Staal drogen en kleuren
- aantal bacteriën / groep bacteriën in 1 microscopisch veld tellen
- Oppervlakte van microscopisch veld + microscopische factor van microscoop op voorhand bepalen
- Aantal bacteriën per 1 ml berekenen

Belangrijke factoren:
 Afmeten & uitstrijken van vloeistof moet heel nauwkeurig gedaan worden
 Manier van tellen: bacteriën afzonderlijk / bacteriehoopjes tellen


WERKWIJZE:
BEPALING VAN DE MICROSCOPISCHE FACTOR MF:
Diameter (d) van microscopisch veld in mm bepalen door micrometerobjectief  oppervlakte van veld bepalen

Het aantal microscopische velden in 1 cm2 is dan (in mm2):
100
¿ 2
d
3,14∗( )
4


1

, Voorbeeld de diameter van een microscopisch veld = 0,205 mm:
10 000 10 000
= =303000 of 300 000 afgerond
MF = 3,14∗( 0,205 ) 2
0,033
4
Aantal bacteriën per mL: gemiddelde aantal getelde MO per veld x MF x VF


VOORBEREIDING VOOR LABO PLAATMETHODE EN MPN:

Droge sterilisatie:
 Voor alle glaswerken & pipetten
 160 °C gedurende 2 uur
 170 °C gedurende 1 uur
 180 °C gedurende ½ uur

Vochtige sterilisatie:
 Voor VB & glaswerk
 121 °C gedurende 15 minuten



SOORTEN VOEDINGSBODEMS
Plate Count Agar (PCA):
- rijke, algemene voedingsbodem
- gebruikt bij het tellen van MO
 Gistextract
 Caseïnehydrolysaat
 Glucose
 Agar

Briljantgroen-gal-lactose bouillon:
- selectieve VB (rundergal & briljantgroen)
- differentiële VB(lactose) voor coliformen
 Peptonen
 Lactose
 gedroogde rundergal
o grampositieve MO afremmen
 briljantgroen
o kleurstof
o grampositieve MO afremmen

DE BEPALING VAN HET AANTAL BACTERIËN VOLGENS DE PLAATMETHODE EN DE MPN
METHODE


INLEIDING :
Hygiënisch eisen voor levensmiddelen:
 Afwezigheid van pathogene & enterotoxigene MO
 Aantal kweekbare aerobe, anaerobe bacteriën, gisten en schimmels bepalen besmettingsgraad
 Bacteriële besmetting van voedingsmiddelen = ongewenst
 Veilig & hygiënisch bereidt voedsel voor consument

Voedselveiligheidssysteem HACCP:

2