Labster
1. Aseptische techniek
Microbiologische cultuur
Kweken is het kweken van micro-organismen, zoals gist of bacteriën, in het laboratorium. De
voedingsstoffen die de microben nodig hebben, worden geleverd door het kweekmedium. Micro-
organismen kunnen worden gekweekt in vloeibare cultuur of op media die vast zijn gemaakt door
toevoeging van agar, dat cultuurmedia een gel-achtige consistentie geeft.
Goede aseptische techniek vereist om de kweek vrij te houden van verontreinigingen van buitenaf.
Opzetten van vloeibare en vaste culturen
Om een vloeistofkweek te maken, wordt een kolonie van een agarplaat met behulp van een
kweekring aan vloeibaar medium toegevoegd of wordt met behulp van een pipet een klein volume
vloeistofkweek toegevoegd.
Om een vaste cultuur te maken, wordt een kolonie met behulp van een cultuurlus over een een
zogenaamde agarplaat gestrooid of wordt een kleine hoeveelheid vloeibare cultuur aan de plaat
toegevoegd en met behulp van een spreider over het oppervlak verspreid. Alle apparatuur moet
voor en na elk gebruik worden gesteriliseerd.
Controles
Negatieve controle ongecultiveerd medium. Aangezien het medium en de apparatuur steriel
moeten zijn, wijst microbiële groei in deze controle op een verontreiniging. Al het andere moet
hetzelfde worden behandeld in het monster en de controle.
Aseptische technieken
Deuren en ramen van het laboratorium worden gesloten gehouden om luchtstromingen te
voorkomen, zodat micro-organismen aan het oppervlak niet in de lucht terecht kunnen
komen.
De draadlus en de glazen strooier worden voor en na gebruik gesteriliseerd met een
bunsenbrander om de introductie van ongewenste micro-organismen te voorkomen.
Deksels van flessen en buizen worden vastgehouden wanneer ze worden verwijderd, en niet
op de tafel gelegd.
De hals van een fles of buis moet onmiddellijk met de bunsenbrander worden verwarmd,
zodat elke luchtverplaatsing naar buiten is.
De fles of buis wordt zo kort mogelijk geopend, en terwijl zij open is, worden alle
werkzaamheden dicht bij de vlam van de bunsenbrander uitgevoerd.
Media en apparatuur worden gesteriliseerd om de groei van ongewenste micro-organismen
te voorkomen.
Bunsenbrander
Niet aanzetten wanneer je ethanol gebruikt
Biosavity cabinet
Zorg voor een laminaire luchtstroom en ontsmet de oppervlakken alvorens met het werk te
beginnen
Zorg ervoor dat alle onderdelen in de bioveiligheidskast vooraf gesteriliseerd zijn
Kweektechniek
Plaats alleen de noodzakelijke voorwerpen in de bioveiligheidskast en houd de minimale afstand tot
de schuif om de laminaire luchtstroom niet te verstoren
, Organiseer de materialen zodanig dat bewegingen tot een minimum worden beperkt
Houd besmette voorwerpen uit de buurt van steriele voorwerpen en voer besmette materialen zo
snel mogelijk correct af
Ontsmetting en afvalverwijdering
Na beëindiging van de werkzaamheden alle gecontamineerde materialen afvoeren en het oppervlak
decontamineren
Verwissel handschoenen
Sterile materialen en reagens
Oppervlak Alcohol 70%
Medium en pipet tips Autoclaaf Vochtige stoom dat proteïnen
coaguleert en cellen dood.
Kleine uitrusting Bunsenbrander Blauwe vlam dood cellen
(verspreiders, loops)
Handen Desinfecteren/ handschoenen Bij bunsenbrander gebruik
moeten handen
gedesinfecteerd zijn
2. Pippeteren
TAPE
Het medium en de verpakking moeten vóór gebruik worden gesteriliseerd door autoclaveren, om
besmetting te voorkomen. De autoclaaf maakt gebruik van verzadigde stoom onder hoge druk bij
121°C gedurende 15 tot 20 minuten om de micro-organismen in het medium en de recipiënt te
doden. Om er zeker van te zijn dat de autoclaafprocedure correct is uitgevoerd, wordt de fles die het
medium bevat, geëtiketteerd met een stukje autoclave-tape. Het autoclaaflint heeft een witte
streep die zwart wordt als hij wordt blootgesteld aan stoom van hoge temperatuur.
Pipetteren
Om het volume aan te passen, draait u aan het regelwieltje of de plunjer (afhankelijk van de pipet)
tot het gewenste volume op de aflezing verschijnt. Het is zeer belangrijk om binnen het
volumebereik van de betreffende pipet te blijven om vervuiling van de pipet of onnauwkeurige
metingen te voorkomen. Een juiste pipetteertechniek is belangrijk om te garanderen dat een
nauwkeurig volume vloeistof wordt overgebracht.
Hoe wordt 20microliter in de P20 pipet weergegeven:
1. Aseptische techniek
Microbiologische cultuur
Kweken is het kweken van micro-organismen, zoals gist of bacteriën, in het laboratorium. De
voedingsstoffen die de microben nodig hebben, worden geleverd door het kweekmedium. Micro-
organismen kunnen worden gekweekt in vloeibare cultuur of op media die vast zijn gemaakt door
toevoeging van agar, dat cultuurmedia een gel-achtige consistentie geeft.
Goede aseptische techniek vereist om de kweek vrij te houden van verontreinigingen van buitenaf.
Opzetten van vloeibare en vaste culturen
Om een vloeistofkweek te maken, wordt een kolonie van een agarplaat met behulp van een
kweekring aan vloeibaar medium toegevoegd of wordt met behulp van een pipet een klein volume
vloeistofkweek toegevoegd.
Om een vaste cultuur te maken, wordt een kolonie met behulp van een cultuurlus over een een
zogenaamde agarplaat gestrooid of wordt een kleine hoeveelheid vloeibare cultuur aan de plaat
toegevoegd en met behulp van een spreider over het oppervlak verspreid. Alle apparatuur moet
voor en na elk gebruik worden gesteriliseerd.
Controles
Negatieve controle ongecultiveerd medium. Aangezien het medium en de apparatuur steriel
moeten zijn, wijst microbiële groei in deze controle op een verontreiniging. Al het andere moet
hetzelfde worden behandeld in het monster en de controle.
Aseptische technieken
Deuren en ramen van het laboratorium worden gesloten gehouden om luchtstromingen te
voorkomen, zodat micro-organismen aan het oppervlak niet in de lucht terecht kunnen
komen.
De draadlus en de glazen strooier worden voor en na gebruik gesteriliseerd met een
bunsenbrander om de introductie van ongewenste micro-organismen te voorkomen.
Deksels van flessen en buizen worden vastgehouden wanneer ze worden verwijderd, en niet
op de tafel gelegd.
De hals van een fles of buis moet onmiddellijk met de bunsenbrander worden verwarmd,
zodat elke luchtverplaatsing naar buiten is.
De fles of buis wordt zo kort mogelijk geopend, en terwijl zij open is, worden alle
werkzaamheden dicht bij de vlam van de bunsenbrander uitgevoerd.
Media en apparatuur worden gesteriliseerd om de groei van ongewenste micro-organismen
te voorkomen.
Bunsenbrander
Niet aanzetten wanneer je ethanol gebruikt
Biosavity cabinet
Zorg voor een laminaire luchtstroom en ontsmet de oppervlakken alvorens met het werk te
beginnen
Zorg ervoor dat alle onderdelen in de bioveiligheidskast vooraf gesteriliseerd zijn
Kweektechniek
Plaats alleen de noodzakelijke voorwerpen in de bioveiligheidskast en houd de minimale afstand tot
de schuif om de laminaire luchtstroom niet te verstoren
, Organiseer de materialen zodanig dat bewegingen tot een minimum worden beperkt
Houd besmette voorwerpen uit de buurt van steriele voorwerpen en voer besmette materialen zo
snel mogelijk correct af
Ontsmetting en afvalverwijdering
Na beëindiging van de werkzaamheden alle gecontamineerde materialen afvoeren en het oppervlak
decontamineren
Verwissel handschoenen
Sterile materialen en reagens
Oppervlak Alcohol 70%
Medium en pipet tips Autoclaaf Vochtige stoom dat proteïnen
coaguleert en cellen dood.
Kleine uitrusting Bunsenbrander Blauwe vlam dood cellen
(verspreiders, loops)
Handen Desinfecteren/ handschoenen Bij bunsenbrander gebruik
moeten handen
gedesinfecteerd zijn
2. Pippeteren
TAPE
Het medium en de verpakking moeten vóór gebruik worden gesteriliseerd door autoclaveren, om
besmetting te voorkomen. De autoclaaf maakt gebruik van verzadigde stoom onder hoge druk bij
121°C gedurende 15 tot 20 minuten om de micro-organismen in het medium en de recipiënt te
doden. Om er zeker van te zijn dat de autoclaafprocedure correct is uitgevoerd, wordt de fles die het
medium bevat, geëtiketteerd met een stukje autoclave-tape. Het autoclaaflint heeft een witte
streep die zwart wordt als hij wordt blootgesteld aan stoom van hoge temperatuur.
Pipetteren
Om het volume aan te passen, draait u aan het regelwieltje of de plunjer (afhankelijk van de pipet)
tot het gewenste volume op de aflezing verschijnt. Het is zeer belangrijk om binnen het
volumebereik van de betreffende pipet te blijven om vervuiling van de pipet of onnauwkeurige
metingen te voorkomen. Een juiste pipetteertechniek is belangrijk om te garanderen dat een
nauwkeurig volume vloeistof wordt overgebracht.
Hoe wordt 20microliter in de P20 pipet weergegeven:
