TEMA 4.CULTIVO IN VITRO:MICROPROPAGACION VEGETAL
1. Cultivo in vitro
Un cultivo in vitro es aquel realizado sobre un medio nutritivo en condiciones estériles.
En algunos casos en la domesticación las plantas perdieron la reproducción sexual,
algunas plantas con características particulares se intenta que con la micro
propagación no se pierdan.
Se puede cultivar de forma in vitro plantas, semillas, embriones, órganos, explantos,
células y protoplastos, siempre limitado por el tamaño.
CARACTERISTICAS
-Es empleado a microescala
-Hay optimización de las condiciones ambientales. Temperatura, humedad, intensidad
de luz.
-No se produce el patrón normal de desarrollo de una planta porque hay limitaciones
de espacio, el medio de crecimiento es un medio de crecimiento diferente del suelo
donde crecería, esta saturado de agua y por tanto la planta tiene un desajuste en el
balance hídrico.
-Permite la manipulación de las células individuales o tejidos. Esto es fundamental para
la transformación genética.
TIPOS DE CULTIVO IN VITRO
Los callos son cúmulos de células en constante división, no se especializan.
El esquema muestra el flujo de la flexibilidad de regeneración de plantas pero no
todas las plantas presentan esta flexibilidad.
CONDICIONES
La principal condición es la esterilidad. Se le aporta un medio con nutrientes, una
fuente principal de C debido a que la actividad fotosintética esta disminuida, no hay
suficiente C entonces por eso se les suministra una fuente de C externa para que el
desarrollo no sea lento. Por los elevados niveles de nutrientes es necesaria la esterilidad
para que no haya infecciones.
, Capacidad de las células de totipotencia (capacidad de las células de regenerar un
organismo completo) reprogramación del desarrollo (se altera el ciclo celular, inducir
la producción de nuevos meristemos que darán origen a nuevas células y órganos)
competentes ya que no todas las células responden igual por los niveles endógenos
que tengan.
Factores que introducimos:
• Auxinas
-Es la hormona de la lobulación, se transporta de manera polar y a larga distancia a
través del floema.
-Esencial para la viabilidad de la planta, por lo que todas
las plantas tienen ciertos niveles basales como mínimo.
-Existen formas conjugadas de la hormona (inactivas), por
lo que nos tenemos que centrar en los niveles de las que
están activas.
-Se suelen usar las auxinas sintetizadas químicamente
(más sencillo que extraerlas)
-Algunas son citotóxicas en dosis elevadas, por lo que se
pueden utilizar como herbicida.
-Las Auxinas generan un fuerte enraizamiento de las
plantas. Esto es muy útil para propagar plantas por
esquejes.
-Tienen un alto nivel de interacción con las citoquininas y con el ácido abscísico:
Dominancia apical. La auxina está implicada en la redistribución de las
citoquininas sintetizadas en la raíz hacia el ápice. Normalmente existe una
yema apical (ápice) y varias yemas laterales que se encuentran en estado de
dormición. Cuando se escinde el ápice hay una redistribución de las hormonas
y existe un mayor nivel de citoquininas en las yemas laterales, que cesan la
dormición.
El acido abscísico se acumula en las yemas laterales y al escindirse el ápice,
disminuye su contenido. De esta manera hay una proliferación de tallos
axilares.
• Citoquininas
-Se descubrieron al buscar factores que indujesen división celular y promoviese el
crecimiento del material vegetal.
-Se encontraron en el DNA desnaturalizado de esperma de arenque, y se observo
que eran muy efectivas para promover las divisiones celulares.
-La primera citoquinina identificada y de estructura conocida fue la kinetina.
-En los medios de cultivo, al igual que en auxinas, se usan las de síntesis, la kinetina
y la benzyladenina.
1. Cultivo in vitro
Un cultivo in vitro es aquel realizado sobre un medio nutritivo en condiciones estériles.
En algunos casos en la domesticación las plantas perdieron la reproducción sexual,
algunas plantas con características particulares se intenta que con la micro
propagación no se pierdan.
Se puede cultivar de forma in vitro plantas, semillas, embriones, órganos, explantos,
células y protoplastos, siempre limitado por el tamaño.
CARACTERISTICAS
-Es empleado a microescala
-Hay optimización de las condiciones ambientales. Temperatura, humedad, intensidad
de luz.
-No se produce el patrón normal de desarrollo de una planta porque hay limitaciones
de espacio, el medio de crecimiento es un medio de crecimiento diferente del suelo
donde crecería, esta saturado de agua y por tanto la planta tiene un desajuste en el
balance hídrico.
-Permite la manipulación de las células individuales o tejidos. Esto es fundamental para
la transformación genética.
TIPOS DE CULTIVO IN VITRO
Los callos son cúmulos de células en constante división, no se especializan.
El esquema muestra el flujo de la flexibilidad de regeneración de plantas pero no
todas las plantas presentan esta flexibilidad.
CONDICIONES
La principal condición es la esterilidad. Se le aporta un medio con nutrientes, una
fuente principal de C debido a que la actividad fotosintética esta disminuida, no hay
suficiente C entonces por eso se les suministra una fuente de C externa para que el
desarrollo no sea lento. Por los elevados niveles de nutrientes es necesaria la esterilidad
para que no haya infecciones.
, Capacidad de las células de totipotencia (capacidad de las células de regenerar un
organismo completo) reprogramación del desarrollo (se altera el ciclo celular, inducir
la producción de nuevos meristemos que darán origen a nuevas células y órganos)
competentes ya que no todas las células responden igual por los niveles endógenos
que tengan.
Factores que introducimos:
• Auxinas
-Es la hormona de la lobulación, se transporta de manera polar y a larga distancia a
través del floema.
-Esencial para la viabilidad de la planta, por lo que todas
las plantas tienen ciertos niveles basales como mínimo.
-Existen formas conjugadas de la hormona (inactivas), por
lo que nos tenemos que centrar en los niveles de las que
están activas.
-Se suelen usar las auxinas sintetizadas químicamente
(más sencillo que extraerlas)
-Algunas son citotóxicas en dosis elevadas, por lo que se
pueden utilizar como herbicida.
-Las Auxinas generan un fuerte enraizamiento de las
plantas. Esto es muy útil para propagar plantas por
esquejes.
-Tienen un alto nivel de interacción con las citoquininas y con el ácido abscísico:
Dominancia apical. La auxina está implicada en la redistribución de las
citoquininas sintetizadas en la raíz hacia el ápice. Normalmente existe una
yema apical (ápice) y varias yemas laterales que se encuentran en estado de
dormición. Cuando se escinde el ápice hay una redistribución de las hormonas
y existe un mayor nivel de citoquininas en las yemas laterales, que cesan la
dormición.
El acido abscísico se acumula en las yemas laterales y al escindirse el ápice,
disminuye su contenido. De esta manera hay una proliferación de tallos
axilares.
• Citoquininas
-Se descubrieron al buscar factores que indujesen división celular y promoviese el
crecimiento del material vegetal.
-Se encontraron en el DNA desnaturalizado de esperma de arenque, y se observo
que eran muy efectivas para promover las divisiones celulares.
-La primera citoquinina identificada y de estructura conocida fue la kinetina.
-En los medios de cultivo, al igual que en auxinas, se usan las de síntesis, la kinetina
y la benzyladenina.