Samenvatting Farmaceutische analyse II: practicum

Practicum 1: kwantitatieve UV-spectrofotometrie


1. Doel van het experiment
 Het kwantitatief bepalen van het coffeïnegehalte in een onbekende staal aan de hand
van UV-spectrofotometrie.
 Door middel van een ijklijn en door middel van de specifieke absorbantie.
 Ook wordt de specifieke absorbantie en de molaire extinctiecoëfficiënt bepaald.

2. Belangrijke punten om op te letten
 Omzettingen van mg/mL  mg% DOOR mg/mL * 100 te doen
 Verdunningsfactoren op het einde van een berekening gebruiken wanneer men
verdund had.
 Bij het berekenen van een gemiddelde, de standaardafwijking ook berekenen.
 Bepaling van de molaire extinctiecoëfficiënt en de specifieke absorbantie.
 Opletten met de juiste eenheden in formules te gieten.

3. Berekeningen
VOOR AL DE REST, ZIE OEFENSESSIE

Verdunningsreeks voor de ijklijn
 Als je een concentratie 100x moet verdunnen bv. doe je gewoon c/100
 Om dan het volume na te gaan dat je moet nemen uit uw stockoplossing (de niet-
verdunde oplossing) moet je (c(gewenste conc.)/c(stockoplossing))* V(gewenste
volume) doen

Gehaltebepaling via de ijklijn
 y = ax + b

 x = (y-b)/a

Met y = gemeten absorbantie(s)

!!! als de ijklijn werd gemaakt met mg% is de uitkomst: in mg/100 mL, zo niet dan is het
een andere eenheid afh. van de gegevens en de titels die in de grafiek staan

Gehaltebepaling via de specifieke absorbantie
1%
 A = A1 cm. c . d (Wet van Lambert Beer)

1%
Met : A = gemeten absorbantie(s); A1 cm = … 100 mL/g*cm of … 10 L/g*cm en d =
cuvetlengte.

Bepaling van de specifieke absorbantie
“De absorbantie van een 10 g/L (of 100 g/mL) oplossing gemeten bij een
weglengte van 1 cm en een welbepaalde golflengte.”
1%
 Wet van Lambert Beer: A = A1 cm * c * d
 A11 %
cm = A / c*d


Met c = … mg/mL ; d = 1 cm en A = y in de ijklijn


1

,  y=a*x+b

 y = a * mg% + b OF y = a * 1000 mg/100mL + b WANT 10 g/L = 10000 mg/1000 mL
OF 1000 mg/100 mL
1%
DAN y = A DUS A1 cm = A / (1000 mg/100 mL) * 1 cm LET OP: IN RM 1000 noteren omdat
de oplossing in mg% gegeven zal worden en dan * 1000 om resultaat te krijgen in g/100 mL
cm-1

Bepaling van de molaire extinctiecoëfficiënt
“De absorbantie van een … M oplossing gemeten bij een weglengte van 1 cm en
een welbepaalde golflengte”

A11 % -1 -1
cm = … mg/100 mL cm  … g/100 mL cm door (*1000 te doen van mgg)

n (coffeïne) = m / MM = … g (komt van uw eindresultaat van uw specifieke
absorbantiecoëfficiënt hierboven) / MM

MAAR dit was in 100 mL dus moet je nog *10 doen om de molaire extinctiecoëfficiënt te
vinden in 1000 mL = 1 L

Massaprocent
 m% = [m (werkelijke massa) / m (theoretische massa)] * 100
 Wordt vaak gebruikt bij gehaltebepalingen

4. Theoretische vragen
Wat is de eenheid van de molaire extinctiecoëfficiënt?
 M-1 cm-1 of L mol-1 cm-1

Wat zou de mogelijke reden kunnen zijn om HCl 0,05 M te gebruiken als
oplosmiddel?
 Om cafeïne te ioniseren en zo zal het dan beter oplossen in water.

Wat is de maximale absorbantie waarbij de wet van Lambert-Beer nog geldig is?
 Bij een absorbantie gemeten bij 1 mg% = c, cuvetlengte 1 cm = d en specifieke
1%
absorbantie A1 cm
1%
 A = A1 cm * c * d = 470 * 10 mL/mg*cm * 1 mg/100 mL * 1 cm = 47?

Meet je enkel de absorptie van je staal?
 Neen, ook de transmissie.




2