Se hicieron muestras de las proteínas y aminoácidos ( glicilglicina, L-cisteina,
glicocola, L+arginina y ovoalbúmina ) de distintas concentraciones.
La técnica operatoria utilizada fue la misma que en la anterior determinación de
hidratos de carbono.
Prueba de sulfato de amonio: se colocó 1ml de muestra y 1m de
SO4(NH4)2 . Determina proteínas. Su reacción positiva es un precipitado
blanco que se justifica por la desnaturalización de las mismas.
Ovoalbúmina +
Albumina de orina + ( menos cantidad de precipitado)
Ovoalbúmina re diluida: precipitado:
Para comprobar que esta reacción era reversible, retiramos el precipitado
mediante la centrifuga y lo re-disolvimos en agua; volvió a estar en
disolución.
Reactivo de Biuret: se agregó 1ml de muestra y 1ml de biuret. Reconoce
uniones de tipo peptídicas y a reacción positiva se obtiene un coloreado
violeta. Se incubaron las muestras
Glicilglicina +
L-cisteína - Coloreado marrón
, glicocola -
L+arginina -
ovoalbúmina +
El complejo de color marrón se debe a la reacción entre el grupo sulfhidrilo de la L-
cisteína y el cobre perteneciente al reactivo.
Reacción positiva comparada con reacción positiva comparada con el
La muestra que reacciono con el grupo blanco.
Sulfhidrilo:
Reacción con azufrados: se agregó 1ml de muestra, se alcalinizo el medio con
Na(OH)colocando 5 gotas ( primero se optó por usar una concentración 0,1M ,
pero al verse demorado el tiempo de reacción. Para corregir esto se utilizó una
concentración 10M en una nueva determinación) y luego se agregaron 10 gotas
de acetato de plomo y se calentó a ebullición. Su reacción positiva da color negro
en presencia de grupos SH
Glicilglicina -
L-cisteína +
Glicocola - (color blanco)
L+arginina -
ovoalbúmina +++
Reacción positiva comparada con el blanco de reactivos: