een fluorescerend eiwit
Onderzoek in het isoleren en aantonen van GFP, YFP, CFP en
mCherry en de verschillen tussen deze eiwitten.
Practicum verslag voor Bouwstenen van het leven
Paul Konig - Tu10 - 2556418
Britt Scheerman- Tu10 - 2573114
Inhoudsopgaven:
-Samenvatting 3
-Inleiding 3
Wat is GFP 3
Hoe ontstaat fluorescentie in GFP 3
Verschillende kleuren fluorescerende eiwitten 4
Fluorescerende eiwitten gebruikt in onderzoek 5
Ons onderzoek 5
, -Methode en materialen 7
Cultures aanenten (1) 7
Isolatie en zuivering van plasmide DNA 7
DNA analyse 8
Cultures aanenten voor eiwitexpressie (2) 8
Eiwitisolatie, eiwitbepaling 8
SDS Gelelectroforese: scheiden eiwitten 9
Spectrofotometer en fluorimeter 11
-Resultaten 12
Expressie van de plasmide 12
DNA analyse door middel van gelectroforese 12
De bepaling van het eiwitgehalte 13
Controleren van de zuiverheid 15
Het Absorptie- en fluorescentiespectrum 17
-Discussie 19
-Conclusie 20
-Bronvermelding 20
2