Hoofdstuk12 gentechnologie
Biotechnolie= maakt gebruik MO in zeer ruime cotext om oa op zeer industriële schaal volgende
prodcten te kunnen produceren :
- Antbiotca
- Enzymen
- Voedseladditeven
- Chemicaliën
Moleculaire biologe= een subdiscipline uit biotechnologie waarbij de ontdekkingen in
micriobiologie hebben genetsche manipulate mogelijk gemaak.
12.1 Restricteeenzymen (R.E.)
= eiwit geproduceerd door de bacteriën
- Is in staat om korte DNA-sequente van 4 a 4 basen te herkenen in Dna-molecuul
- Deze sequente op een specifeke manier knippen (stcky ends) DNA wordt in kleine
fragmenten gedeeld
- Afkomstg: ECO R1 eerste restricte enzymen uit E.coli bacterie
- Functe: verdediging tegen bacteriofagen
Mechanisme
- Bacteriële R.E. knipt het virale DNA in stukken
- Het bacteriële genoom wordt tegen de restricte-enzyme beschermd
Voordeel van R.E: men weet exact wat de uiteinden van het DNA-fragment zijn
Als je DNA fragmenten van verschillende bronnen met dezelfde
R.E. knipt bekom je complementaire Stcky ends die makkelijk
aan elkaar kleven, zo ontstaat recombinante DNA-moleculen.
Door de mutates kunnen de knipplaatsen van menselijke DNA-
fragmenten wegvallen of ontstaan die speciefek zijn voor iedere
individue=R.F.L.P
Toepassing: DNA-fngerprintng en kloneren
12.2 PCR (polymerase chain reacton)
door Taq-polymerase
=komt neer op het vermenigvuldigen van een stukje DNA
Bestaat uit 3 stappen:
1. Denaturate: Temperatuur stjgt tot 90°C (enkel Raq-polymerase overleef)
2. Annealing: de temperatuur daalt zodat de primers kunnen binden aan de fankerende
sequentes.
3. Extenton: Taq-polymerase maakt complementaire DNA aan zodat er terug dsDNA-strengen
ontstaat. Bij elke cyclus wordt het al ontstane DNA opnieuw tot 90°C verwarmd (enkel Taq-
polymerase overleef deze temperatuur en andere eiwiten(=enzymen) worden bij zo’n hoge
T vernietgd).
12.3 Agrobacterium tumefaciens
Is gebaseerd op genetsche modifcate in een plant door MO waarbij ter hoogte van de overgang
tussen de strengen en wortelhals een wilgroei (kroongallen) is ontstaan.
bodembacteriën ( Agrobacterium tumefaciens):
- Dringt binnen de plant via de wonden
Biotechnolie= maakt gebruik MO in zeer ruime cotext om oa op zeer industriële schaal volgende
prodcten te kunnen produceren :
- Antbiotca
- Enzymen
- Voedseladditeven
- Chemicaliën
Moleculaire biologe= een subdiscipline uit biotechnologie waarbij de ontdekkingen in
micriobiologie hebben genetsche manipulate mogelijk gemaak.
12.1 Restricteeenzymen (R.E.)
= eiwit geproduceerd door de bacteriën
- Is in staat om korte DNA-sequente van 4 a 4 basen te herkenen in Dna-molecuul
- Deze sequente op een specifeke manier knippen (stcky ends) DNA wordt in kleine
fragmenten gedeeld
- Afkomstg: ECO R1 eerste restricte enzymen uit E.coli bacterie
- Functe: verdediging tegen bacteriofagen
Mechanisme
- Bacteriële R.E. knipt het virale DNA in stukken
- Het bacteriële genoom wordt tegen de restricte-enzyme beschermd
Voordeel van R.E: men weet exact wat de uiteinden van het DNA-fragment zijn
Als je DNA fragmenten van verschillende bronnen met dezelfde
R.E. knipt bekom je complementaire Stcky ends die makkelijk
aan elkaar kleven, zo ontstaat recombinante DNA-moleculen.
Door de mutates kunnen de knipplaatsen van menselijke DNA-
fragmenten wegvallen of ontstaan die speciefek zijn voor iedere
individue=R.F.L.P
Toepassing: DNA-fngerprintng en kloneren
12.2 PCR (polymerase chain reacton)
door Taq-polymerase
=komt neer op het vermenigvuldigen van een stukje DNA
Bestaat uit 3 stappen:
1. Denaturate: Temperatuur stjgt tot 90°C (enkel Raq-polymerase overleef)
2. Annealing: de temperatuur daalt zodat de primers kunnen binden aan de fankerende
sequentes.
3. Extenton: Taq-polymerase maakt complementaire DNA aan zodat er terug dsDNA-strengen
ontstaat. Bij elke cyclus wordt het al ontstane DNA opnieuw tot 90°C verwarmd (enkel Taq-
polymerase overleef deze temperatuur en andere eiwiten(=enzymen) worden bij zo’n hoge
T vernietgd).
12.3 Agrobacterium tumefaciens
Is gebaseerd op genetsche modifcate in een plant door MO waarbij ter hoogte van de overgang
tussen de strengen en wortelhals een wilgroei (kroongallen) is ontstaan.
bodembacteriën ( Agrobacterium tumefaciens):
- Dringt binnen de plant via de wonden
